Separation and Studies of Lactoperoxidase from Camel and Buffalo Milk Locality

Abstract

تضمن البحث فصل إنزيم اللاكتوبيروكسيديز (LP) من حليب الإبل والجاموس المحلية باستخدام التقنيات الحياتية المختلفة. تم فصل حزمة بروتينية واحدة بتقنية الترشيح الهلامي سيفادكس G-50 وG-100 للراسب البروتيني الناتج من عملية الترسيب بكبريتات الامونيوم. وقدر وزنه الجزيئي التقريبي بإستخدام تقنية الترشيح الهلامي (G-100) التي كانت بحدود 75219+ 900 دالتون لحليب الإبل وبحدود 76493 + 1000 دالتون لحليب الجاموس.أظهرت النتائج أن الإنزيم المنقى من حليب الإبل والجاموس يعمل عند تركيز 70 مايكروغرام/مل باستخدام محلول الفوسفات المنظم بتركيز0.08 مول/لتر وعند أس هيدروجيني 7 وزمن تفاعل 25 دقيقة ودرجة حرارة 45 °م و400 ملي مول/لتر من مادة الأساس البايروكالول. وباستخدام رسم (لاين ويفر– برك) تم إيجاد قيمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت ميكيلس (Km) وكانت مساوية لـ3.49 مايكرومول/دقيقة و26.3 ملي مول/لتر على التوالي لحليب الإبل و4.44 مايكرومول/ دقيقة و45.4 ملي مول/ لتر على التوالي لحليب الجاموس. واخيراً تم دراسة تأثير بعض المركبات الكيميائية والدوائية على فعالية الإنزيم، وبينت النتائج ان ميتا زرنيخات الصوديوم( NaAsO2) مثبط لاتنافسي والفينايل فرين (Phenylphrine) مثبط غير تنافسي عند تراكيز مختلفة من المثبط، ولكن الأثيلين ثنائي الأمين رباعي حامض الخليك ثنائي الصوديوم (Na2-EDTA) والتتراسايكلين يعدان منشطان للاكتوبيروكسيديز.