TY - JOUR ID - TI - Extraction, Purification, Characterization and Immobilization of Chicken Pepsin and Using it in Protein hydrolysate أستخلاص وتنقیة وتوصیف وربط ببسین الدجاج واستعماله في تحضیر متحلل بروتیني AU - Zena K. Issa زینة كاظم عیسى AU - Munir A. Jasim منیر عبود جاسم PY - 2013 VL - 26 IS - 2 SP - 110 EP - 123 JO - Basrah Journal of Agricultural Sciences مجلة البصرة للعلوم الزراعية SN - 18175868 AB - The present study aimed to Isolate pepsin enzyme Ec: 3.4.23.1 from someanimal sources and Purified it and Studied it’s Characteristics and Immobilized it as well asit’s practical applications in food industry. The enzyme was extracted from the stomach ofthree animal sources (Sheep, Chicken and Nuwaibi fish) using five extraction solutionsincluding Distilled water , Sodium chloride (10%) solution , Sodium chloride (6%) Boricacid (2%) solution ,Sodium Phosphate 0.1M and an pH 7.3 solution and Tris-acetic acid0.4M and an pH 7.6 solution in order to find out the best source of enzyme and the bestextraction solution . Sheep's stomach was the best source of enzyme , Sodium chloride(6%) Boric acid (2%) solution was the best extraction solution which gave the highestspecific activity 14.3 unit / mg .Protein content for the crude enzyme extracts were concentrated using saturated ammonium sulfate in arrange 30-70% , 20-90% and 20-60% forSheep, Chicken and Nuwaibi fish pepsin respectively, Dialysis was done using distilledwater. Dialyzed Chicken pepsin possesses the highest proteolytic activity. The dialyzedchicken pepsin Immobilized study with four carriers including Silica gel, SRF Resinous,Calicium Alginate and Agar showed that the best carrier was agar which gave themaximum Immobilized efficiency 67%.The best optimum concentration for Immobilizedialyzed chicken pepsin with agar was 3% with the highest proteolytic enzyme 75%. Thepurified sheep pepsin was Immobilized with agar in 3% concentration .The remainderenzyme activity for agar Immobilized pure Sheep pepsin and dialyzed Chicken pepsin were25% , 21% respectively after 7 times using and the remainder enzyme activity for agarImmobilize pure Sheep pepsin and dialyzed Chicken pepsin wer 22%, 27% respectivelywas stored for 60 days in 4 °C. The optimal pH for proteolytic activity for pure free andImmobilize dialyzed Chicken pepsin was 2 .The optimal pH for the stability of free andImmobilize dialyzed Chicken pepsin are 3. The free and Immobilize enzymes lost theiractivities at alkaline pH values 8 and 9. The optimal temperature for free dialyzed Chickenpepsin was 45 ◌C and 55 °C for its Immobilize form. The optimal temperature for clottingactivity for free and Immobilize dialyzed chicken pepsin was 35°C .The optimaltemperature for free and Immobilize dialyzed Chicken pepsin stability was 15-45 ◌C. Bothfree and Immobilize dialyzed Chicken pepsin lost their activities completely at 85°C. AgarImmobilized dialyzed Chicken pepsin was utilized in the preparation of protein concentratereached the maximum hydrolysis in 180 min. Immobilize Chicken pepsin hydrolysis wasapproximately similar to free Chicken pepsin which reached 2.6, 2.8 respectively.

بعض المصادر الحیوانیة وتنقیته EC: المستخلص: هدفت الدراسة الحالیة الى استخلاص انزیم الببسین 3.4.23.1ودراسة بعض صفاته وربطه واستعماله في التطبیقات العملیة في مجال الصناعات الغذائیة ، استخلص الانزیم من معدة ثلاثةانواع من الحیوانات ( الاغنام ، الدجاج ، سمك النویبي ) باستعمال خمسة محالیل استخلاص تضمنت الماء المقطر، محلولكلورید الصودیوم بتركیز 10 % ، محلول كلورید الصودیوم بتركیز 6 % الحاوي على 2 % حامض بوریك ، محلول فوسفاتبتركیز 0.4 مولاري برقم Tris-acetic acid الصودیوم الدارىء بتركیز 0.1 مولاري ورقم هیدروجیني 7.3 ومحلولهیدروجیني 7.6 لغرض تحدید افضل مصدر للانزیم وافضل محلول استخلاص وقد وجد ان معدة الاغنام كانت افضل مصدرللحصول على الانزیم وان محلول كلورید الصودیوم 6% الحاوي على 2% حامض البوریك هو افضل محلول استخلاص اذاعطى اعلى فعالیة نوعیة للانزیم والتي بلغت 14.3 وحدة/ملغم .بعد ذلكركز المحتوى البروتیني للمستخلصات الانزیمیة الخام60 % لببسین الاغنام والدجاج وسمك -20 ، %90-20 ، %70- باستعمال كبریتات الامونیوم بنسبة اشباع تراوحت بین 30النویبي على التوالي ، ثم اجریت عملیة الدیلزة باستعمال الماء المقطر ، وقد اعطى ببسین الدجاج المنقى جزئیاً اعلى فعالیة،SRF انزیمیة. اظهرت دراسة ربط ببسین الدجاج المنقى جزئیاً باربعة انواع من المواد الرابطة تضمنت السلیكاجل ،راتنجالجینات الكالسیوم والاكار ان افضل مادة ربط هي الاكار اذ اعطي اعلى كفاءة ربط والتي بلغت 67 %.كان افضل تركیزلربط ببسین الدجاج المنقى جزئیاً بالاكار هو 3 % اذ اعطى اعلى فعالیة انزیمیة والتي بلغت 75 %. بلغت الفعالیة المتبقیةلببسین الدجاج المنقى جزئیاً المرتبط بالاكار 21 % بعد استعماله 7 مرات، وبلغت الفعالیة المتبقیة لببسین الدجاج المنقىجزئیاً المر تبط بالاكار 27.6 % عند خزنه لمدة 60 یوم بدرجة حرارة 4 م. وجد ان الرقم الهیدروجیني الامثل للفعالیة التحلیلیةلببسین الدجاج المنقى جزئیاً الحر والمرتبط هو 2 ، ووجد ان الرقم الهیدروجیني الامثل لثبات ببسین الدجاج المنقى جزئیاًالحر والمرتبط كان 3 وان كلا الانزیمین الحر والمرتبط فقدا فعالیتهما عند الارقام الهیدروجینیة القاعدیة 8 و 9 .كانت درجةالحرارة المثلى للفعالیة التحللیة لببسین الدجاج المنقى جزئیاً الحر 45 م والمرتبط 55 م ، ووجد ان درجة الحرارة المثلى لثبات45 م وان ببسین الدجاج المنقى جزئیا الحر والمرتبط فقد - ببسین الدجاج المنقى جزئیاً الحر والمرتبط كانت تتراوح بین 15فعالیته بالكامل عند 85 م. استعمل ببسین الدجاج المنقى جزئیاً المرتبط بالاكار في تحضیر متحلل بروتیني من سمك النویبيووجد ان التحلل البروتیني بلغ اقصاه في فترة 180 دقیقة وان تحلل ببسین الدجاج المرتبط كان مقارب لتحلل ببسین الدجاج2.8 مل على التوالي . ، الحر حیث بلغ 2.6 ER -