TY - JOUR ID - TI - Isolation and Identification of food Probiotic Saccharomyces boulardii by using traditional methods, Vitek 2 system and molecular identification methods. عزل وتشخيص المعزز الحيوي الغذائي Saccharomyces boulardii باستعمال الطرائق التقليدية ونظام الفايتك2 والطرائق الجزيئية. AU - Rahem. AL-Zaiadi رحيم عناد خضير الزيادي AU - Amer. AL-Shekdhaher عامر عبد الرحمن الشيخ ظاهر AU - ماجد حسين الجيلاوي PY - 2016 VL - 8 IS - 1 SP - 42 EP - 60 JO - iraq journal of market research and consumer protection المجلة العراقية لبحوث السوق وحماية المستهلك SN - 20713894 25236180 AB - This study was aimed to isolate and identify Saccharomyces boulardii from Mangosteen fruits (Garcinia mangostana L.) by traditional and molecular identification methods To get safe and healthy foods probiotics for use, The isolates and two commercial strains were subjected to cultural, morphological and biochemical tests, The colonies of the isolates were spherical, smooth, mucoidal, dull and white to cream colour on SD agar media .The shape of cells was globose to ovoid and sometimes with budding, in a single form or clustered like a beehive. The isolates and two commercial strains were unable to metabolized galactose and lactose , Results shows that all isolates were unable to utilize potassium nitrate and not grow in the presence of (0.01%) cyclohexamide. Also the isolates and two commercial strains were identified by the Vitek 2 identification system, as S. cerevisiae with probability 90-94%, Since there are no data in this device includes S. boulardii. Because the cultural, morphological and biochemical tests didn’t provide sufficient evidence to distinguish between S. boulardii and S. cerevisiae, the probiotics strains must be identified up to genus and strain levels by internationally accepted methods, So the SbR7 isolate which shown high probiotic advantages and two commercial strains were diagnosed molecularly by using specific primers targeting sequence for the region (ITS) of the 5.8S rRNA gene Genomic DNA was isolated from SbR7 Isolate and ITS region of the 5.8S rRNA gene was amplified using PCR. PCR products was sequenced and compared with the sequence of this region in the DNA of S. boulardii available in GenBank (NCBI) using the program BLASTn. Results revealed, this isolate was almost genetically identical (99%) with S. boulardii standard strains.

هدفت هذه الدراسة الى عزل وتشخيص المعزز الحيوي الغذائي Saccharomyces boulardii من ثمار المانغستين (Garcinia mangostana L.) بطرائق التشخيص التقليدية والتشخيص الجزيئي للحصول على معززات حيوية غذائية امنه الاستعمال وصحية، اخضعت العزلات فضلا عن عزلتين تجاريتين للاختبارات المزرعية والمجهرية والكيموحيوية، اذ أظهرت العزلات مستعمرات ذات شكل دائري بلون ابيض مائل إلى الكريمي الباهت عند تنميتها على الوسط الصلب SD وبدت بشكل محدب ذات حواف منتظمة وقوام كريمي لزج، وان الخلايا تمتلك أشكالا بيضوية، او شبه كروية متبرعمة أحيانا، مفردة او متقاربة في تجمعات، وعدم المقدرة على تمثيل الكالاكتوز فضلا عن سكر اللاكتوز ولم تستطع استهلاك نترات البوتاسيوم او النمو بتركيز 0.01% من المضاد الحيوي السايكلوهكسمايد.كما شخصت باستعمال نظام الفايتك 2 على انهاSaccharomyces cerevisiae باحتمالية تراوحت بين90– 94%، اذ لا تتضمن بيانات الجهازS. boulardii، ولكون الاختبارات المزرعية والمجهرية والاختبارات الكيموحيوية لا تعطي ادلـــة كافية وقاطـــعة للتفريق بين النوعين S. boulardii وS. cerevisiae، شخص المعزز الحيوي S. boulardii جزيئيا باستعمال بوادئ متخصصة تستهدف التسلسل النوعي الخاص بالمنطقة البينية الفاصلة (ITS) للجين الرايبوسومي 5.8S rRNA، واستخلص الدنا المجيني من العزلة SbR7 التي اظهرت امتلاكها للعديد من صفات المعزز الحيوي والعزلتين التجاريتين، واجري تفاعل تضخيم السلسلة للمنطقة البينية ITS وحددت تعاقبات القواعد النيتروجينية وتمت مقارنتها مع تعاقباته في دنا سلالات S. boulardii المتوفرة في بنك الجينات NCBI باستعمال برنامج BLASTn تبين ان هناك تطابقا للتعاقبات، وان هذه العزلة تتماثل جينيا بنسبة 99% مع سلالات Saccharomyces boulardii القياسية المتوافرة في بنك الجينات. ER -