TY - JOUR ID - TI - Extraction and Partial Purification of Lipopolysaccharide from Clinical Proteus mirabilis Isolate and Compared with Standard Bacteria الاستخلاص والتنقية الجزئية لمتعدد السكريد الشحمي للعزلة السريرية Proteus mirabilis ومقارنتها مع البكتريا القياسية AU - Rawnaq Zuhir رونق زهير AU - Mouruj A. Sattar Alaubydi مروج عبد الستار العبيدي PY - 2016 VL - 57 IS - 1C SP - 599 EP - 608 JO - Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم SN - 00672904 23121637 AB - Ninety five samples were collected from different samples (urine, ear and wounds swaps), from hospitals in Baghdad city. The results of cultural, microscopic , biochemical tests indicated that in urine samples E.coli have high occurrence frequency 19 (47.5%) followed by Proteus mirabilis 18(45%) and Klebsiella species 1 (2.5%), while in wounds samples each of Pseudomonas spp. and Proteus mirabilis 10 (25%) , then followed by E.coli with 5 (12.5%) and Klebsiella species 3 (7.5%). Ear swaps samples revealed that Pseudomonas aeruginosa 7 (46%) was the major bacterium followed by Proteus mirabilis 4(26.6).Sensitivity test against eleven antimicrobial agents was done for all of the Proteus mirabilis isolates (32 isolates). The results displayed that most of the isolates were resistant to Methicillin (96.8%), and Rifampin (93.7%) followed by trimethoprim–sulfamethoxazole (71.8%), chloramphenicol (62.5%), and cefazoline (59.3%). while the most effective antimicrobial agents against P. mirabilis were Imipenem (96.9%), Azetronam (81.3%), Azithromycin (71.9%) ,Ciprofloxacin (69%).Whereas a moderate effect appeared against both gentamycin and tobramycin in a percentage of (53.2 and 62.5) % respectively. More resistant isolate was selected, and lipopolysaccharide was extracted by hot EDTA method and the yield was (150) mg LPS from (22)g dry weight cell of pathogenic P.mirabilis and (95) mg as LPS from (16) g dry weight cell of standard bacteria were obtained. After partial purification ,chemical analysis of crud and partial purified LPS showed that the carbohydrate percentages were (35 , 44.3) % and (49 , 62)%, while the protein percentage (0.98 ,0.1) % and ( 1.3 ,0.1)% for the standard and isolated bacteria respectively ,whereas both extract appeared free from nucleic acid . Molecular weight of LPS was estimated and it was equivalent to (63095 and 70794) Dalton for the standard bacteria and pathogenic one respectively.

جمعت 95 عينة تضمنت عينات مختلفة (ادرار ومسحات من الاذن والجروح) ومن مستشفيات مختلفة في محافظة بغداد .اظهرت نتائج اختبارات عملية الزرع ، الفحص المجهري ، والاختبارات البايوكيمائية ان عزلة بكتريا E.coli في عينات الادرار سجلت النسبة الاعلى 19 (47.5%) وتبعتها عزلة Proteus mirabilis 18(45%) ، ثم جنس الـ Klebsiella 1 (2.5%) ، بينما في عينات الجروج سجل كل من عزلات جنس بكتريا Pseudomonas ، و 10 (25%) Proteus mirabilis، ثم تبعتها بكتريا E.coli 5 (12.5%) ، وجنس الـ 3 (7.5%) Klebsiella. . وأظهرت عينات مسحات الأذن ان بكتريا Pseudomonas aeruginosa 7 (46%) كانت الرئيسة و تبعتها Proteus 4(26.6) mirabilis . أجري أختبار الحساسية الدوائية لأحد عشر مضاد مايكروبي على عزلات Proteus mirabilis عددها (32 عزلة ) ،وا ظهرت نتائج الفحص ان معظم هذه العزلات كانت مقاومة لـ Methicillin (96.8%) ، و Rifampin (93.7%) ، وتبعها trimethoprim–sulfamethoxazole (71.8%) ، chloramphenicol (62.5%) ، و cefazoline (59.3%) . بينما المضادات المايكروبية التي اظهرت فعالية ضد Proteus mirabilis كانتImipenem (96.9%)، Azetronam (81.3%) ، Azithromycin (71.9%)، و (69%). في حين أظهر كل من gentamycin و tobramycin تاثيرا معتدلا وبنسبة (53.2 و 62.5 ) على التوالي. وعلية أختيرت العزلة الأكثر مقاومة للمضادات المايكروبية، وتم استخلاص متعدد السكريد الشحمي منها ومن بكتريا Proteus mirabilis القياسية بطريقة EDTA الساخن ، وكان ناتج عملية الاستخلاص (150.95) ملغم كـمتعدد السكريد الشحمي من (22.16) غم من الخلايا البكتيرية الجافة لكل من Proteus mirabilis القياسية والمرضية على التوالي .ثم اجريت عملية التنقية الجزئية لمتعدد السكريد الشحمي، واجري التحليل الكيمائي لكل من المستخلص الخام والمنقى جزئيا، واظهرت النتائج ان نسبة الكاربوهيدرات في النموذج الخام كانت ( 35 ، (49 لكل من العزلتين المرضيه والقياسيه على التوالي,% بينما نتائج الكاربوهيدرات للعزلتين المنقاه جزئيا (.344 ، 62)%. نسبة البروتينات الخام كانت (0.98% للعزله القياسيه و .31 % للعزله المرضيه, اما نتائج التنقيه الجزئيه كانت (0.1 )% لكل من البكتريا القياسية والمرضية ، في حين اظهر كلا المستخلصين خلوه من الاحماض النووية. ثم قدر الوزن الجزيئي لمتعدد السكريد الشحمي وكان (63095 و 70794 ) دالتون لكل من البكتريا القياسية والمرضية على التوالي . ER -