TY - JOUR ID - TI - Preparation of Nanoliposomes by Size Exclusion Chromatography to Entrap Soluble Antigens from Leishmania Donovani تحضير الجسيمات الدهنية النانوية باستخدام كروموتوكرافيا الترشيح الحجمي لاقتناص المستضدات الذائبة لطفيلي اللشمانيا دونفاني AU - Rawaa N. Abdallah روعة نجم عبدالله AU - Raghad K. Allihaibi رغد كاظم اللهيبي AU - Mohammad M.F. Al-Halbosiy محمد محمود فرحان الحلبوسي AU - Ali A. Taha علي عبدالرحمن طه PY - 2016 VL - 57 IS - 2A SP - 814 EP - 823 JO - Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم SN - 00672904 23121637 AB - In this study, we investigated the ability of nanoliposomes preparation, as a nanoadjuvant, to entrap soluble Leismania donovani antigens (SLAs) and release in vitro. The parasite reactivation was carried out when inoculated into Rosewell park memorial institute media (RPMI) and incubated at 23 °C for 4 days. L. donovani promastigote inoculum (104 cell / ml) of 4 days was used to inoculate modified medium of Saline - Neopeptone and Blood agar 9 (SNB 9) to produce promastigote mass. SLAs were extracted from the promastigotes ghost membrane after fourth passages of subculturing in SNB. The membrane pellet obtained was suspended in 5 mM Tris buffer (pH 7.6) and sonicated three times at 4 °C and entrapped in freshly prepared nanoliposomes. Lipids mixture of 4mM Phosphatidylcholine, 2.2 mM Cholesterol and 0.55 mM Phosphatidylethanolamine in a ratio of 7:2:1 were used to prepare nanoliposome. Physio-chemical characterizations of prepared nanoliposomes was performed by using Scanning Electron Microscope (SEM) , Atomic Force Microscope (AFM) and Zeta Potential assays to determine the size, morphology and charge. The efficiency of freshly prepared nanoliposoms to entrap SLAs was determined by measuring the nanoliposome efficiency entrapment (EE). The percentage of EE was 50 and 27.5 of SLAs entrapped nanoliposomes prepared by Sephadex G25 and Sephadex G75, respectively. Moreover, stability of SLAs entrapped nanoliposomes was examined at 4 and 37 °C as a storage temperature.

في هذه الدراسة، قمنا بفحص قدرة الجسيمات الدهنية النانويه المحضره ، باعتبارها مساعدات مناعية نانويه ، لاقتناص مستضدات اللشمانيا دونفاني القابلة للذوبان (SLAs) في المختبر. جرى إعادة تنشيط الطفيلي عند تلقيحة في وسط زرعي خاص يعرف بالـ RPMI وحضنت في 23 م˚ لمدة 4 أيام. وقد استخدمت اللشمانيا دونفاني امامية السوط بعد 4 ايام من تلقيحها وبواقع 104خلية / مل لتلقيح الوسط الزرعي المعدل المكون من ملح - نيوببتون وأجار الدم 9 (SNB 9) لإنتاج كتلة من امامية السوط. تم استخراج مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان من غشاء اللشمانيا امامية السوط بعد التمريره الرابعة من المزرعة في الوسط SNB 9. علق راسب الاغشية التي تم الحصول عليها في 5 ملي مولر دارئ تريس (درجة الحموضة 7.6) وتم تكسير الخلايا ثلاث مرات في درجة حرارة 4 م˚ ، ومن ثم اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية المحضره بشكل طازج.استخدم خليط الدهون المكون من : 4 ملي مولر من Phosphatidylcholine ، 2.2 ملي مولر من Cholesterol و 0.55 ملي مولر من Phosphatidylethanolamine بنسب7:2:1 استخدمت لتحضير الجسيمات الدهنيه النانويه. تم تحديد المواصفات الفيزيائية الكيميائية للجسيمات الدهنية النانوية باستخدام مجهر المسح الإلكتروني (SEM)، مجهر القوة الذري (AFM) وقياس زيتا المكافئ ,وذلك لتحديد حجم وشك والمجموعة الكيميائية النشطة والشحنة لهذة الجسيمات. تم تحديد كفاءة الجسيمات الدهنية النانوية الطازجةلاقتناص مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان عن طريق قياس كفاءة اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية (EE). بلغت نسبة كفائة الاقتناص 50 و 27.5 من مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان المقتنصة بالجسيمات الدهنية النانوية والمحضره باستخدام سيفادكس G25 و G75 ، على التوالي . علاوة على ذلك، تم فحص استقرار مستوى اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية في درجة تخزين 4 و 37 م˚ . ER -