TY - JOUR ID - TI - Protective effect of cytosine-phosphate-guanosine oligodeoxynucleotide against experimental mastitis induced by Cryptococcus neoformans infection in goats التأثير الواقي للسايتوسين فوسفات كوانوسين ضد الاصابة التجريبية بإلتهاب الضرع المتسبب عن الإصابة بالمكورات الخبيئة في الماعز AU - Nidhal R. Mahdi نضال رؤوف مهدي AU - Shaimaa N. Yassein شيماء نبهان ياسين AU - Jenan M. Khalaf جنان محمود خلف PY - 2016 VL - 40 IS - 2 SP - 113 EP - 123 JO - The Iraqi Journal of Veterinary Medicine المجلة الطبية البيطرية العراقية SN - 16095693 24107409 AB - The present study investigated the effect of synthetic non-methylated oligonucleotides containing Cytosine-phosphate-guanosine dinucleotides (Cytosine-phosphate-guanosine oligodeoxynucleotide) on caprine mastitis with Heat Killed Cryptococcus neoformans Ag. 20 healthy local breed does were used with weight ranging of 25-30 Kg and free of mastitis by examination via California Mastitis Test and Somatic Cell Count. The does were allotted into four equal groups, the first group (G1) was treated intramammary with 100μg/kg of Cytosine-phosphate-guanosine oligodeoxy nucleotide on fifth day postpartum in the right mammary gland while the left mammary gland served as control and were infused with sterile phosphate buffered saline. On day 8 postpartum repeat dosages of Cytosine-phosphate-guanosine oligodeoxynucleotide and phosphate buffered saline were infused respectively. On day 9 pp the right mammary gland was infused with 2ml of 2x108 cell/ml of Heat Killed Cryptococcus neoformans Ag. The second group (G2) was infused at day 9 postpartum with 2ml of 2x108 cell/ml of Heat Killed Cryptococcus neoformans Ag in the right mammary gland only. The third group (G3) was left until the challenge test done after one week of immunization in the G1 and G2, by inoculation of 2ml of 5x106 viable C. neoformans in the right mammary gland. The fourth group (G4) was kept as a control receiving 2ml of sterile PBS. Blood samples were collected at 0, 5, 10, 20, 30 and 40 days of the study, to determine the antibody titer by passive haemagglutination assay, while the cell mediated immunity was evaluated by detecting the goat Interferon Gamma by ELISA test and Phagocytic index. Also the cell mediated immunity was determined by delayed type hypersensitivity test after 21 days of immunization. The results showed a significant variation (P≤0.05) between vaccinated groups (G1 and G2) and the control. However, there was a significant increase (P≤0.05) of skin thickness shown after 48 hrs in the G1compared to G2. High level of Interferon Gamma concentration was noticed in the G1 as compared with other groups. Moreover, cell mediated immunity developed effectively in the G1 which was noted by a significant increase (P≤0.05) of phagocytic activity of polymorphonuclear cells. The high level of antibody titer was observed in the G1 as compared with other groups. In conclusion: These results suggest that vaccination with Cytosine-phosphate-guanosine oligodeoxynucleotide plus Heat Killed Cryptococcus neoformans Ag intramammary lead to a good protection of caprine mammary glands against C. neoformans mastitis.

أظهرت هذه الدراسة تأثير استعمال المحفز المناعي السايتوسين فوسفات كوانوسين ضد الإصابة بإلتهاب الضرع في الماعز مع مستضد خميرة المكورات الخبيئة المقتول بالحرارة حيث استعملت 20 رأسا من الماعز المحلي تراوحت اعمارها بين 2-4 سنوات ومتوسط وزن 25-30 كغم وقد تم فحص جميع الحيوانات باختبار كاليفورنيا واختبارعد الخلايا الجسمية للتحري عن خلوها من التهاب الضرع. وقسمت الحيوانات على 4 مجاميع متساوية. المجموعة الاولى: حقنت ب 100 مايكروغرام/كغم من وزن الجسم بالمحفز المناعي السايتوسين فوسفات كوانوسين بعد 5 ايام من الولادة وكررت الجرعة عند اليوم الـ 8 من الولادة وفي اليوم الـ 9 حُقنّت 2 مل من 2× 108 من المستضد المقتول في الشطر الأيمن من الضرع أما الشطر الأيسر فقد ترك كسيطرة وحقن بدارئ الفوسفات الملحي الفسلجي. المجموعة الثانية: حقنت ب 2 مل من 2×108 من المستضد المقتول فقط وذلك بعد 9 أيام من الولادة في الشطر الأيمن فقط. المجموعة الثالثة: تركت لحين اجراء اختبار التحدي الذي اجري بعد اسبوع من تمنيع الحيوانات في المجموعتين الاولى والثانية وذلك بحقن 2 مل من C.neoformans وبتركيز وبتركيز2× 106 في الشطر الايمن من الضرع. المجموعة الرابعة:مجموعة السيطرة فقد حقنت ب2 مل دارئ المحلول الملحي الفسلجي. جمعت عينات الدم لفحص المناعة الخلوية المتمثلة بقياس تركيز الانترفيرون كاما وفحص البلعمة ولغرض قياس مستوى الاجسام المضادة بواسطة فحص التلازن الدموي غير المباشر ابتداء من اليوم 0 و5 و10 و20 و30 و40 من الدراسة. أظهرت النتائج أن التمنيع بواسطة المستضد المقتول مع او بدون المحفز المناعي السايتوسين فوسفات كوانوسين ادى الى تحفيز استجابة مناعية خلوية وخلطية جيدة اذ ان جميع الحيوانات الممنعة أظهرت نتائج ايجابية في الفحص الجلدي باستعمال ألمستضدات الطافية الناتجة من عملية تكسيرخميرة C.neoformans كما اوضحت نتائج الدراسة ان حيوانات المجموعة الاولى اظهرت مستوى عال من تركيزالانترفيرون كاما مقارنة بالمجاميع الاخرى اضافة الى تأثر المناعة الخلوية في قابلية الالتهام للخلايا متعددة الانوية وخلايا وحيدة النواة بزيادة معنوية وخاصة في المجموعة الأولى، اما فيما يخص المناعة الخلطية فان الحيوانات التي جرى تمنيعها مسبقا كما في المجموعة الأولى اظهرت معاييرعالية من الاجسام المضادة مقارنة بالمجاميع الاخرى. ومن هذا كله يتضح أن التلقيح باستخدام المحفز المناعي السايتوسين فوسفات كوانوسين قبل المستضد المقتول داخل الحلمة قد ولد حماية للغدد اللبنية للماعز ضد التهاب الضرع بخميرة C.neoformans. ER -