@Article{, title={Purification and Characterization of Lipase from Local Isolate of Aspergillus aculeatus and Study of Inhibition Effect of Sunflower Seeds Extract تنقية وتوصيف إنزيم اللايبيز المنتج من العزلة المحلية للفطر Aspergillus aculeatus ودراسة امكانية تثبيطه بوساطة مستخلص بذور زهرة الشمس}, author={ZIAD T. SEDRAH زياد طارق السدرة and ASMAA S. AHMAED اسماء صباح احميد}, journal={Thi-Qar University Journal for Agricultural Researches مجلة جامعة ذي قار للبحوث الزراعية}, volume={5}, number={1}, pages={375-394}, year={2016}, abstract={We have isolated the lipase-producing fungi from the soil, cheese and whey, and isolate A6 chosen because of its high lipolytic ability, and diagnosed using morphological tests as Aspergillus aculeatusThe enzyme was purified by 40% saturation of ammonium sulphate precipitation with 6.25 fold and 66.4% recovery, and by gel filtration on Sephacryl S-200, with 18.05 fold and 16.4% recovery.The results of the enzyme characterization showed that it’s estimated optimum pH of activity was 7.5 and it’s optimum pH of stability was 6.5-8.5. The optimum temperature for the activity was 30OC, and the enzyme was retained its original activity after incubation at temperature 30 OC and less.The enzyme activity increased when using tributyrin and tricaprin as a substrate, where activity was 92 and 86 units/ml respectively, while the activity was decreased when use tristearin and triolein as a substrate, where activity was 56 and 47 units/ml, respectively.Calcium led to increased activity of the enzyme, while sodium and magnesium ions did not affect, and the use of zinc, mercury has reduced activity. The use of EDTA and β-Mercaptoethenol led to reduced activity and the enzyme activity was not, affected by non-ionic detergents Tween-80 and Triton X-100 while the enzyme activity was reduced when treated with SDS and the activity was reduced when treated with organic solvent acetone and ethanol.Km of the enzyme was 1.6 mg/ml and Vmax was 129.3 mM/min using Tributyrin as a substrate. The addition of sunflower seeds extract reduced Vmax while not affecting km, so this type of inhibitors is reversible non-competitive inhibitors.

تم الحصول على 12عزلة فطرية منتجة لانزيم اللايبيز من التربة والجبن والشرش ، واختيرت لاكمال الدراسة العزلة A6 لامتلاكها اعلى فعالية نوعية وجرى تشخيصها الى مستوى النوع من خلال اجراء اختبارات مورفولوجية ( شكلية ) اثبتت ان العزلة تعود للعفن Aspergillus aculeatus .نقي الانزيم بوساطة التركيز بكبريتات الأمونيوم الصلبة بنسبة اشباع 40% ، وقد أعطت خطوة التنقية هذه فعالية نوعية مقدارها 171.9 وحدة/ملغم بروتين بعدد مرات تنقية 6.25 مرة وحصيلة إنزيمية بلغت 66.4 % جرى بعدها اكمال عملية التنقية بالترشيح الهلامي بعمود Sephacryl S-200 التي اعطت فعالية نوعية مقدارها 496.6 وحدة/ملغم بروتين وعدد مرات تنقية 18.05 مرة وحصيلة إنزيمية 16.4 % . بلغ الرقم الهيدروجيني الأمثل للفعالية 7.5 ، والرقم الهيدروجيني الأمثل للثبات بين 6.5 – 8.5 ، وكانت درجة الحرارة المثلى لفعالية الإنزيم 30م ، اما افضل ثبات للانزيم فكان بدرجات حرارة 30م واقل .ارتفعت فعالية الانزيم عند استعمال Tributyrin و Tricaprin كمادة تفاعل اذ بلغت 92 و 86 وحدة/مل على الترتيب ، في حين لوحظ انخفاض الفعالية نسبيا عند استعمال Tristearin و Triolein كمادة تفاعل اذ بلغت 56 و 47 وحدة/مل على الترتيب .ازدادت فعالية الانزيم بوجود الكالسيوم في حين لم تتاثر فعالية الانزيم بوجود ايونات الصوديوم والمغنسيوم ، وانخفضت فعالية الانزيم عند استعمال الزنك والزئبق ، كا انخفضت الفعالية الانزيمية بوجود EDTA و β-Mercaptoethenol ، ولم تتأثر فعالية الانزيم بالمنظفات اللاايونية Tween-80 و Triton X-100 ، في حين اختزلت فعالية الانزيم عند معاملته بالمادة المنظفة الايونية SDS ، كما ادت المذيبات العضوية الايثانول والاسيتون الى اختزال واضح في فعالية الانزيم .بلغت قيمة Km للانزيم 1.6 ملغم/مل اما Vmax فقد بلغت 129.3 ملي مولار/دقيقة باستعمال Tributyrin كمادة اساس ، وادت اضافة مستخلص بذور زهرة الشمس الى خفض Vmax للانزيم في حين لم تتأثر قيمة Km ، وبذلك يندرج هذا النوع من المثبطات ضمن مجموعة المثبطات العكسية اللاتنافسية (Reversible Non-competitive inhibitors ) .} }