TY - JOUR ID - TI - Identification of Red Complex Pathogens Group from Chronic Periodontitis Patients in Mosul City تشخيص مجموعة ممرضات المعقد الاحمر من مرضى التهاب انسجة حول الاسنان المزمن في مدينة الموصل AU - Amera M. Al-Rawi اميرة محمود الراوي AU - Sumaya A. Al-Hamdoni سمية عدنان الحمدوني PY - 2020 VL - 29 IS - 3 E SP - 1 EP - 16 JO - Rafidain journal of science مجلة علوم الرافدين SN - 16089391 AB - This study is concerned with the isolation of red complex pathogens, identifying them by a new molecular method as the first locally used and described procedure and characterizing these pathogens by their phenotypic features and biofilms. Gingival fluids were sampled from chronic periodontitis and inoculated into three types of culture media, Schaedler Anaerobe Agar, Tannerella forsythia (TF) agar, and Trypton Yeast extracts Gelatin Volatile fatty acids and Serum (TYGVS) agar. The different appearing colonies were purified and identified by Loop- Mediated Isothermal Amplification protocol (LAMP) for the detection of red complex species. Bacterial biofilm was estimated in term of mono- and polytypic biofilm by measuring the absorbance of a crystal violet- stained biofilm formed in a microtiter plate. Different forms of colonies appeared at the primary isolation. LAMP method was of a significant value for perfect rapid identification of the target species of extracted DNA or intact cells within half an hour. The three types of red complex pathogens were simultaneously detected in the same gingival fluid sample. They formed mono- and polymicrobial biofilms in a synergistic manner particularly the two intimates P. gingivalis and T. denticola. In conclusion, the updated LAMP molecular protocol was attractive method for the diagnosis of red complex pathogens which showed great morphological variations. P. gingivalis fortified the growth of the other two to establish polymicrobial biofilms in a synergistic manner.

عنيت الدراسة الحالية بعزل ممرضات المعقد الاحمر وتشخيصها بطريقة جزيئية حديثة كأول استخدام ووصف محلي لها وتوصيف هذه الممرضات بالصفات المظهرية والاغشية الحيوية. تم اخذ عينة سائل اللثة من اصابات انسجة حول الاسنان المزمنة ولقحت على ثلاث انواع من الاوساط الزرعية Schaedler Anaerobe Agar, Tannerella forsythia (TF) agar, and Trypton Yeast extracts Gelatin Volatile fatty acids and Serum (TYGVS) agar. تم تنقية الاشكال المختلفة من المستعمرات النامية وشخصت بطريقة Loop- Mediated Isothermal Amplification protocol (LAMP) للكشف عن انواع مجموعة المعقد الاحمر. تم تقدير الغشاء الحيوي البكتيري بمصطلح الغشاء الاحادي والمتعدد الانواع عن طريق قياس امتصاصية الغشاء الحيوي المتكون في الصفيحة العيارية والمصبوغ بالكريستال البنفسجية. ظهرت اشكال مختلفة من المستعمرات في العزل الاولي. طريقة LAMP كانت ذو فائدة قيمة للتشخيص السريع للنوع الهدف من DNA المستخلص او الخلايا الكاملة خلال نصف ساعة. تم الكشف عن الانواع الثلاث من ممرضات المعقد الاحمر سوية في نفس عينة سائل اللثة وأنها كونت غشاء حيوي احادي ومتعدد الميكروبات بنمط تآزري خاصة بين النوعين P. gingivalis و T. denticola. بروتوكول طريقة الجزيئي LAMP المتطورة كان مميز في تشخيص ممرضات المعقد الحمر والتي ابدت تباين مظهري كبير. النوع P. gingivalis عزز نمو النوعين الاخرين لتكوين غشاء حيوي متعدد الميكروبات بنمط تآزري. ER -