TY - JOUR ID - TI - Isolation and purification of glutathione peroxidase from hemophilia patients serum and study effect of some Carthamus tinctorius L. (carthamus) secondary metabolites on enzyme activity عزل وتنقية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز من مصل دم مرضى الهيموفيليا ودراسة تأثير بعض المركبات الايضية الثانوية لنبات الكسوب على فعاليته AU - Mohammed Bahry Hassin محمد بحري حسن AU - Nazar Ahmed Najy نزار أحمد ناجي AU - Qussay Hazime Yahiya قصي حازم يحيى PY - 2020 VL - 2 IS - 3 SP - 7 EP - 18 JO - Samarra Journal of Pure and Applied Science مجلة سامراء للعلوم الصرفة والتطبيقية SN - 26637405 27896838 AB - The study was performed measuring the level effectiveness of the Glutathione peroxidase in the serum of Hemophilia patients as well as the separation and purification of this enzyme, as it included 48 samples of serum hemophilia patients of both types (40 samples of type A and 8 of type B), in addition to 50 samples of healthy people only male. The results of this study showed a significant decrease at the probability level P≤ 0.05 of the effectiveness of the Glutathione peroxidase in the serum of hemophilia patients of both types. The Glutathione peroxidase was also separated and purified from the serum of those with hemophilia by precipitation of ammonium sulfate and dialysis, and by using the DEAD - Cellulose exchange chromatography technique where a major protein bundle was relied upon which was used to determine the optimal conditions for the partially purified enzyme. The optimum conditions were determined for the partially purified enzyme from the blood serum and were maximum activity of (GPx) at minute (6), acidic function at pH = 8, enzyme concentration 105 µg/ml, concentration of substrate H2O2 0.6 mmol/L temperature(40oC) and that the maximum speed (Vmax) and the Michaelis constant (Km) were equal to 0.9μmol/min and 0.195 mmol/Liter, respectively, using a line –weaver plot diagram.

تضمنت الدراسة عزل وتنقية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز (GPx) في مصل دم مرضى الهيموفيليا، إذ شملت 48 عينة من مصل دم مرضى الهيموفيليا بكلا نوعيه (40 عينة من النوع A و 8 من النوع B)، علاوة على 50 عينة من الأشخاص الأصحاء ومن الذكور فقط. بينت نتائج الدراسة وجود انخفاض معنوي عند مستوى الاحتمالية P≤ 0.05 لفعالية أنزيم GPx في مصل دم مرضى الهيموفيليا بكلا نوعيه. وتم ايضا عزل وتنقية أنزيم GPx من مصل دم المصابين بالهيموفيليا من خلال الترسيب بكبريتات الامونيوم والديلزة وباستخدام تقنية كروماتوغرافيا التبادل الايوني DEAD – Cellulose حيث تم فصل حزمة بروتينية رئيسة والتي اعتمد عليها في تحديد الظروف المثلى للأنزيم المنقى جزئيا. حُددت الظروف المثلى للأنزيم المنقى جزئيا من مصل الدم وكانت أعلى فعالية لزمن التفاعل عند الدقيقة 6، دالة حامضية عند pH=8، وتركيز الانزيم 105 µg/ml، وتركيز مادة الاســــاس H2O2 L/0.6 mmol، ودرجة حرارة 40oC وان السرعة القصوى Vmax وثابت ميكيلس Km كانت µmol/min 0.9 و 0.195 mmol/Liter على التوالي باستخدام رسم لاينويفر. - برك. تضمنت الدراسة أيضا تأثير بعض النواتج الطبيعية من بذور نبات الكسوب (الزيت، الفلافونويدات، الكلايكوسيدات) على فعالية أنزيم GPx. ER -