TY - JOUR ID - TI - EXTRACTION, PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF CAMELS PEPSIN (Camelus dromedarius 64 استخلاص وتنقية وتوصيف الببسين المعزول من المعدة الرابعة للجمال Camelus dromedarius AU - PY - 2007 VL - 6 IS - 2 SP - 64 EP - 76 JO - Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية SN - 18154794 25207245 AB - ABSTRACTThe results of the current study revealed that chymosen and pepsin are themajor enzymes constituents of the camel aqueous abomasal homogenates.Enzymes were precipitated with ammonium sulphate at 35-80% saturation, andfurther purification involved chromatography on DEAE cellulose-32 and gelfiltration on Sephadex G-100. Three activity peaks (P1, P2 and P3) were elutedat 0.24, 0.43 and 0.54 M NaCl, and P2 and P3 completely inactivatedribonuclease confirming that they are pepsin (A and B), whereas P1 showedvery little activity indicating that it is chymosin. In addition to that, the milkclotting activity was distributed in order of 11.62, 52.98 and 35.40% forchymosin, pepsin A and B, respectively. Pepsin A and B had molecular weightapproximate 35000 and 36500 Dalton respectively. Also, pepsins are notglycoproteins, but contained 0.7 and 1.1 mol of organic phosphate per 1 mol ofprotein, for pepsin, A and B respectively. The results also showed that bothisoenzymes neither serin or thiol nor metallo proteases, and tyrosine may notparticipating at the active site of the pepsins.Key words: Camel pepsin, Purification, Camelus Dromedarius.

الخلاصةأظهرت نتائج هذه الدراسة احتواء مستخلص المعدة الرابعة للجمال على الكايموسينوالببسين، تم ترسيب الأنزيمات بإستخدام كبريتات الأمونيوم بنسب إشباع تراوحت بينDEAE- %80-35 تشبع، ثم أجريت خطوة التنقية اللاحقة باستخدام عمود من المبادل الأيونيوالترشيح الهلامي على عمود من Cellulose32أوضحت نتائج كروماتوغرافيا التبادل الأيوني بأسلوب التدرج .Sephadex G- ال 100الملحي الخطي وجود ثلاث قمم في التراكيز 0.24 و 0.43 و 0.54 مولار كلوريد الصوديومأن القمة الأولى Ribonuclease وتبين من خلال دراسة قدرة هذه القمم على تثبيط نشاط العلى التوالي، وتوزعت B و A ببسين P و 3 P تمثل الكايموسين في حين تمثل القمتين 2 (P1)الفعالية التخثرية بين هذه الأنزيمات على النحو الآتي 11.62 و 52.98 و 35.40 % للكايموسينعلى التوالي. تبين من خلال هذه الدراسة أيضاً أن الوزن الجزيئي للببسين B و A والببسينB و A المنقى والمقدر بطريقة الترشيح الهلامي كان بحدود 35000 و 36500 دالتون للببسينglycoproteins على التوالي. ووجد أن هذه الأنزيمات هي ليست من البروتينات السكريةوتحتوي على 0.7 و 1.1 مول من الفوسفات العضوي للمول الواحد من البروتين لكل من ببسينلبعض الكواشف وأن كلا B و A على التوالي. وأوضحت النتائج استجابة كل من ببسين B و Aوالثايولية Serine proteases ليس من البروتينات السيرنية (Isoenzymes) المتناظرينولوحظ أن التايروسين لا يشكل جزءاً Metallo proteases أو المعدنية Thiol proteasesمن الأنزيم. Active site مهماً من الموقع الفعال ER -