TY - JOUR ID - TI - ISOLATION AND PURIFICATION OF MYELOPEROXIDASE FROM HUMAN POLYMORPHONEUCLEAR-CELLS (PMN) عزل و تنمية المايلوبيروكسيديز من الخلايا متعددة الانوية في الانسان AU - Essam F.A. Al-Jumaily عصام الجميلي AU - Muntaha A.K. Al-Safar مثنى الصفار AU - Rhagad A.A. AlSuhail رغد السهيل PY - 2005 VL - 4 IS - 2 SP - 129 EP - 133 JO - IRAQI JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES المجلة العراقية للعلوم الطبية SN - 16816579 22244719 AB - Background: Myeloperoxidase (MPO) oxidoreductase, EC.1.11.1.7 stored in granules of neutrophils ingest microorganisms by generating of reactive oxidants.Objective: Isolation and Purification of (MPO) from polymorphonuclear cells.Methods: The enzyme was purified from polymorphonuclear blood cells by Ion exchange chromatography by CMC and gel filtration Sephacryl S.200 column and SDS electrophoresis.Results: Polymorphonuclear cell (PMN) were isolated from human blood; cell extract was prepared by homogenizetion of cell pellets in 0.34 M sucrose. Human (PMN) Myeloperoxidase (MPO) has been purified to homogeneity by two- steps procedure, which included CM-cellulose ion exchange chromatography and Sephacyl S- 200 column at purification fold and recovery of 1.281 and 43.94% respectively. The final product was homogeneous when examined by SDS -polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight of the enzyme is 80,000 daltons as determined by SDS- PAGE and 88,000 daltons by Sephacyl S-200.Conclusion: The purification of MPO with accepted yield may open new approaches for its using in the medical application as preparing of monclonal antibodies and diagnostic kits for detection of antimyeloperxidase that are required for some inflammatory diseasesKeywords: Polymorphonulear cells; Myeloperoxidase

خلفية الدراسة: يعد انزيم المايلوبيروكسيديز ( EC 1.11.1.7) من مجموعة انزيمات الاكسدة و الاختزال الموجودة في حبيبات الخلايا العدلة الهاضمة للاحياء المجهرية بفعل انتاجها لبعض المؤكسدات القاتلة لها.هدف الدراسة: عزل و تنقية الانزيم (MPO) من الخلايا متعددة الانوية.طريقة العمل: تمت تنقية الانزيم من حبيبات الخلايا متعددة الانوية من الدم باستخدام كروماتوغرافيا التبادل الايوني (CMC) و الترشيح الهلامي Sephacryl -200 و الترحيل الكهربائي بوجود SDS.النتائج: عزلت حبيبات الخلايا متعددة الانوية من الدم و حضر مستخلص الحبيبات بتجانس راسب الحبيبات بمحلول السكروز بتركيزM 0.34 نقي انزيم المايلوبيروكسيديز (MPO) المعزول من الخلايا متعددة الانوية في الانسان الى حد التجانس بخطوتين شملت كروماتوغرافي التبادل الايوني عمود CMC و عمود السيفاكريل S-200 بعدد مرات تنقية بحصيلة بلغت 1.281و 43.94% على التوالي. تجانس النتائج النهائي بواسطة الترحيل الكهربائي بوجود SDS و بلغ الوزن الجزيئي للانزيم 80.000 دالتن بطريقة الترحيل الكهربائي بوجود SDS و88.000 دالتن باستخدام عمود السيفاكريل S-200الأستنتاج: ان تنقية الانزيم سوف تفيد مستقبلا في البحوث الطبية و من جملتها الألتهابات.مفتاح الكلمات:- الخلايا متعددة الانوية، انزيم المايلوبيروكسيديز من الخلايا متعددة الانوية، تنقية انزيم المايلوبيروكسيديز ER -