TY - JOUR ID - TI - Purification and characterization of extra cellular Pectin lyase from Erwinia carotovora isolate from spoilt potatoes تنقية وتوصيف اضافية ياز البكتين الخلوية من carotovora الإيروينية عزل من البطاطا مدلل AU - Alyaa. M AU - kbaal M.Salmaan Abdul Hammed PY - 2010 VL - 6 IS - 2 SP - 383 EP - 397 JO - Academic Science Journal مجلة العلوم الاكاديمية SN - 83732222 25189255 AB - Erwinia carotovora (7) isolates were obtained out of 20 spoilt potato samples from local market of Baquba city .The isolates that gave higher Pectinolytic activity was selected to purify pectin lyase through three stages of purification including (ethanol precipitation, ion- exchange chromatography by DEAE – Sepharose and gel filtration by Sephadex G50 with 63.9- fold purification , 69.5U / mg specific activity and 30% recovery.The purified enzyme was characterized :the molecular weight was about 29 KDa by gel filtration chromatography .The temperature for maximum activity was 60c° and maximal activity was observed at pH 8.5 .Some metallic ions such as Ca+ and Mg+2 increased Pectin lyase activity to 140 and 133 % respectively .while the other metals such as Co+2 ,Hg+2 ,Ni+2 Zn+2and Sn+2 inhabited enzyme activity.Therefor ,This research leads to increase interest by using Pectin lyase in the current biotechnological application .

تنقية وتوصيف انزيم بكتين لاييز Pectin lyase من العزلات المحلية لبكتريا Erwinia carotovora المعزولة من البطاطا المصابة بالتعفن الطري تم الحصول على 7 عزلات تعود لبكتريا Erwinia carotovora من مجموع 20عينةبطاطا تالفة ماخوذة من الاسواق المحلية في مدينة بعقوبة التي اعطت اعلى انتاجية لانزيم البكتين لاييز لاجراء تجارب التنقية .تم استخلاص الانزيم وتنقيته باستخدام ثلاث مراحل تضمنت (الترسيب بالايثانول , التبادل الايوني باستخدامDEAE-Sepharose والترشيح الهلامي باستخدام Sephadex G-50 ) بعدد مرات تنقية 63.9 وفعالية نوعية 89.5 وحدة/ملغم بروتين وحصيلة نهائية 30%. تم توصيف الانزيم المنقى ووجد ان وزنه الجزيئي حوالي 29 كيلو دالتن باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي , كما درست درجة الحرارة المثلى لفعالية الانزيم هي حوالي 29 كيلو دالتن باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي , كما درست درجة الحرارة المثلى لفعالية الانزيم هي 60 م° بينما الرقم الهيدروجيني الامثل للفعالية الانزيمية كان8.5 درس تاثير بعض العناصر الفلزية في فعالية الانزيم حيث وجد ان Ca+2 Mg+2,ادى الى زيادة الفعالية الانزيمية الى 140و 133% على التوالي بينما العناصر الاخرى مثل, Co+2 ,Hg+2 Ni,+2 ,Zn+2, Sn+2 ادت الى تثبيط الفعالية الانزيمية .وان هذه النتائج تعطي اهمية للانزيم في استخدامات التقانة الاحيائية الحديثة . ER -