TY - JOUR ID - TI - A Modified Method For Mitochondrial Purification And DNA Isolation From Muscles طريقة محورة لتنقية المايتوكوندريا واستخلاص الDNA من العضلات AU - Athraa H. Hassun عذراء حميد حسون PY - 2006 VL - 11 IS - 1 SP - 246 EP - 248 JO - Tikrit Journal of Pure Science مجلة تكريت للعلوم الصرفة SN - 18131662 24151726 AB - Normally, the muscles are rich in mitochondria, but in myopathic patients, the muscles are degenerated, and low mitochondrial content is land marked. In the present modification a small piece of muscle biopsy (0.5-0.8gram) was taken twice at a time from each patient (12 patients with primary muscular dystrophy). The first biopsy was processed by the standard method, while the other was subjected to the modified method. In the latter method, the muscle biopsy was first minced and then digested with the enzyme trypsin III at a concentration of 0.35mg / gram for 10 minutes. In the standard method, the enzyme concentration was 0.25mg /gram, and the incubation time was 30 minutes. Therefore, some time saving was reached. But, the more important finding was highly enriched mitochondrial pellet, as well as, no contamination with other cellular components was observed. This modification has led to isolate a pure mtDNA, which was not contaminated with nuclear DNA

العضلي الذين تعاني عضلاتهم من نقص في المايتوكوندريا نتيجة لتحللها. اعتمادا على طريقة استخلاص DNA المحورة الحالية حيث يمكن اخذ قطعة صغيرة من العضلة المصابة (0.5-0.8 )غم من (12) مريض ذوي الشذوذ العضلي الابتدائي وبمكررين لكل عينة. احدها عوملت بطريقة الاستخلاص القياسية و الأخرى بالطريقة المحورة التي تركز التعديل فيها على زيادة تركيز إنزيم التربسين III ليصل إلى 0.35 ملغم/غم وخفض فترة الحضن لتصل إلى 10 دقائق في حين كانت الطريقة الأساسية تعتمد على تركيز الإنزيم 0.25 ملغم/غم وفترة حضن تصل إلى 30 دقيقة، مما أفضى إلى الحصول على كمية كبيرة من المايتوكوندريا فضلا عن نقاوتها من مكونات الأخرى وهذا أدى إلى استخلاص كمية اكبر من الـDNA المايتوكونيدري غير ملوث بـالـ DNA النووي ، فضلا عن اختصار بعض الوقت المهم في هكذا تحليلات. ER -