TY - JOUR ID - TI - Determination the titer antibodies against LPS extracted from Pseudomonas aeruginosa isolated from eye infection تحديد عيارية الاجسام المضادة لمتعدد السكريد الشحمي المستخلص من بكتريا Pseudomonas aeruginosa المعزولة من خمج العين AU - Jinan M. Hasan جنان محمد حسن AU - Rasmyia A. Abu-risha رسمية عبد أبو ريشة AU - May T. Flayyih مي طالب فليح PY - 2012 VL - 6 IS - 2 SP - 57 EP - 66 JO - Journal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية SN - 18151140 27081370 AB - rom September 2008 to May 2009, 122 specimens were collected by sterile cotton swaps from patients suffering from eye infection at Ibn Al-Haitham Teaching Eye Hospital, 12 of them (9.83% isolation percentage) were diagnosed as Pseudomonas aeruginosa isolates by using biochemical tests, API 20 E system: they were named (P(1), P(2),……..P(12)). The agglutination sera for the grouping of P. aeruginosa test show that all the isolates belong to the P. aeruginosa strains (6, 9, 12, 16). The result show that P10 isolate have a greater ability to adhesion when all P. aeruginosa isolates were tested on Congo red agar medium and adherence to smooth surfaces. The chemical analysis of crude LPS that was extracted from P10 by using digestive enzyme and hot phenol water method showed that the percentage of carbohydrates was 7.3 and the percentage of protein was 1.3. No nucleic acids were found while the chemical analysis of partially purified LPS that was made by gel-filtration chromatography by using Sephacryl 200 S showed that the percentage of carbohydrates in the partial purified LPS was 19.5% and the percentage of binding proteins was 0.006%. No nucleic acids were found. When the molecular weight of LPS was measured by gel-filtration chromatography by using Sepharose C1- 6B- 200 it was found to be 630957 Dalton. The sera were prepared by using two wild type rabbits (weight 2-2.5 kg). They were injected with five doses over 70 days of different concentrations of partially purified LPS that have been extracted from P. aeruginosa P (10) isolate. One rabbit was used as a control that has been injected with PBS. The titer of antibodies in sera was determined by passive haemagglutination and it was in the immunized rabbit’s sera 160, and the best concentration of LPS was 10µg.

جمعت 122عينة للفترة من أيلول 2008 لغاية أيار 2009 من مرضى يعانون من التهاب العين من مستشفى ابن الهيثم التعليمي للعيون بواسطة مسحات قطنية معقمة. باستخدام نظام الAPI 20 E شخصت 12 عينة من هذه العينات و التي تمثل 9.83% من العينات انها بكترياPseudomonas aeruginosa . في حين اظهر التشخيص المصلي باستخدام اختبار التلازن المصلي لمجاميع الـ P. aeruginosa أن العزلات تعود للسلالات الآتية (16,12,9,6) و قد أظهرت النتائج ان العزلة P10 لها القابلية الأكثر على الالتصاق عند اختبار قابلية جميع العزلات على الالتصاق على الأسطح الملساء و اغار احمر الكونغو . تم استخلاص متعدد السكريد الشحمي الخام من العزلة P10 باستخدام طريقة الفينول الساخن حيث كانت نسبة التحليل الكيميائي للكاربوهيدرات 7.3% وللبروتينات 1.3% على التوالي في حين لم توجد أي أحماض نووية ، في حين اظهر التحليل الكيميائي لمتعدد السكريد الشحمي المنقى جزئيا بواسطة كروماتوكرافيا الترشيح الهلامي باستخدام هلام الـ Sephacryl 200 S أن نسبة الكاربوهيدرات كانت19.5% ونسبة البروتينات المرتبطة كانت 0.006% و لا يحتوي على احماض نووية . عند قياس الوزن الجزيئي لمتعدد السكريد الشحمي بواسطة كروماتوكرافيا الترشيح الهلامي باستخدام هلام الـ Sepharose C1- 6B 200 أظهرت النتائج أن الوزن الجزيئي لمتعدد السكريد الشحمي يبلغ 630957 دالتون . حضرت المصول بحقن أرنبين من النوع البري (2-2.5 كيلو غرام) بخمس حقنات على مدى70 يوما و بتراكيز مختلفة من متعدد السكريد الشحمي المستخلص من بكتريا الـ P. aeruginosa العزلة P10 والمنقى جزئيا مع استخدام أرنب سيطرة واحد حيث تم حقنه بمحلول دارئ الفوسفات . حددت عيارية الاجسام المضادة في المصول باستخدام تفاعل التلازن الدموي المنفعل و قد كانت العيارية لمصول الأرانب الممنعة ضد متعدد السكريد الشحمي 160 والتركيز الأمثل لمتعدد السكريد الشحمي هو 10 مايكروغرام . ER -