TY - JOUR ID - TI - Molecular diagnosis of bcr-abl fusion gene in CML patients using Multiplex-Reverse Transcreptase-Polymerase Chain Reaction الكشف الوراثي الجزيئي لجين BCR-ABL في مرضى ابيضاض الدم النخاعيني المزمن باستخدام تقنية تفاعل الاستنساخ الرجعي لجينات متعددة – التفاعل المتسلسل لانزيم بلمرة الدنا AU - Maysaa Abdul Razaq Dhahii د. ميساء عبد الرزاق ضاحي PY - 2010 VL - 23 IS - 3 SP - 141 EP - 146 JO - IRAQI JOURNAL OF COMMUNITY MEDICINE المجلة العراقية لطب المجتمع SN - 16845382 AB - Background: Chronic myeloid leukemia (CML) is a stem cell disorder results from chromosomal abnormality, Philadelphia chromosome (Ph), which arises from the reciprocal translocation of part of long arm of chromosome 9, in which proto-oncogene ABL gene (ablson) is located, to long arm of chromosome 22, in which BCR gene (break point cluster region) is located forming BCR-ABL fusion gene, a molecular marker of CML. The BCR-ABL gene can be detected using several molecular methods, including southern blotting, fluorescence in situ hybridization (FISH) and Reverse Transcreptase-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). For its simplicity, rapidity, and sensitivity, RT-PCR is one of the most common techniques used for analyzing whether a target gene is being expressed or not. Objective: This study was designed as a try to apply molecular techniques as conformational diagnosis of BCR-ABL gene and its variants in CML patients. Patients & Methods: Venous blood sample from 34 CML patients, 12 ALL patients, 1 AML patients, 1 CMML patient and 2 healthy individuals were collected. RNA was extracted from these samples using specific kit for this purpose. Molecular screening for the presence of bcr-abl in those samples was done using Multiplex-Single Step-Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (M-SS-RT-PCR). Amplified products were electrophoresid in 1.5% agarose gel. Results: The results showed that all CML patients were positive for bcr-abl while all the others were negative for this gene. Conclusion: qualitative molecular diagnosis of bcr-abl using M-SS-RT-PCR considered as Conformational diagnosis for CML patients before starting treatment.Key Word: CML - BCR/ABL -Multiplex Reverse Transcreptase Polymerase Chain Reaction.

خلفية الدراسة:سرطان الدم المايلودي المزمن ناجم عن اختلال كروموسومي كروموسوم فيلادلفيا والناجم عن انقلاب غير توافقي في جزء من الذراع الطويل للكروموسوم رقم 9 وفيها البوتوجين يسقط فوق الذراع الطويل للكروموسوم رقم 22 وهناك علامات وجود مؤشر جزيئي لسرطان الدم المايلويدي. هذه الاصابة في الجين ممكن كشفه بعدة طرق اسهلها هو باسعمالتفاعل السلسلة البوليمريه أهداف الدراسة:طريقه سريعه وخفيفه للكشف عن الجين الجزيئي المصاب ب(RT-PCR) وتشخيص سرطان الدم المايلودي المزمنطريقة العمل:تم جمع عينات من دم المرضى المصابين بسرطان الدم سرطان الدم المايلودي المزمن34و, سرطان الدم اللمفاوي12 الحاد, سرطان الدم المايلويدي الحاد 1 الميلوما المتعدد 1 واثنا اصحاء. تم استخلاص الحمض النووي RNA باستعمال الطريقة الجديدة للكشف عن الجين وفحص جميع العينات النتائج:ان جميع المصابين بسرطان الدم المايلويدي المزمن كان موجبي الفحص باستعمال PCRبينما جميع المرضى الاخرين والاصحاء كانت سالبهالاستنتاجات:استعمال الطريقة الجديدة هي الامثل لتشخيص المرض قبل البدء بالعلاج ER -