@Article{, title={GENOTYPING OF THE ABO BLOOD GROUP SYSTEM IN IRAQ POPULATION USING PCR-RFLP التنميط الوراثي لمجموعة الدم ABO للمجتمع االعراقي بإستعمال PCR-RFLP}, author={Mohammed I. Nader}, journal={Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية}, volume={11}, number={2}, pages={464-474}, year={2012}, abstract={Due to a large number of alleles that could give similar phenotypes but differ in genomic structure. This study study was conducted to determine the ABO genotyping by use PCR-RFLP method. Blood samples withdrawn from 30 unrelated individuals who appear to be healthy. ABO system phenotype grouping was detected by two immunoagglutination tests. Slide and ELISA were done for all samples. Homozygous allele was selected by chosen special family which gives known offspring according to Mendel laws. The DNA was extracted by using two methods, the manual method by using extra gene kit gives relatively high yield concentration (5-10µg/ml) but slightly low purity (0.9-3.3) and the automated BioRobot EZ1 gives slightly lower yield of DNA(4-8 µg/ml) but high purity (1.6–2.2) in comparison with manual method . Two separate segments of ABO gene the glycosyltransferases gene (216pb) in exon 6 and (703pb) in exon 7 were amplified using two sets of specific primers. Restriction digisten of the two amplification PCR productes was used for discrimination of AB and O allells.

هدفت الدراسة الى الكشف الجزيئي لمجموعة الدم ABO ومطابقتها مع الكشوف المختبرية المعتمدة على النمط الظاهري وإيجاد أنسب الظروف لعمل الكشف الجزيئي. توجد العديد من السمات التي تتشابة بالنمط الظاهري لكنها تختلف بالتركيب الوراثي ومن أبرز الأمثلة عليها جين مجموعة الدم ABO. جمعت عينات الدم من 30 شخص بدو من الفحص الظاهري أنهم أصحاء, أستعملت طريقتين للتحري عن النمط الظاهري لفصائل الدم لكل النماذج. الطريقة الاولى التلازن المباشر على الشريحة, الطريقة الثانية هي اليلايزا، إذ تطابقت النتائج لطريقتان علماً ان الطريقتان لم تميزا نوع الاليل. تم إنتخاب أفراد من أبوين معلومين لصنف الدمAB) ) حيث يكون نسل هذه العوائل متجانس الزيجة Homozygous وذلك لقلة صفة التجانس الوراثي في المجتمعات مقارنةً بالطرز الهجين . Heterozygous عزلت المادة الوراثية بطريقتين, الطريقة اليدوية بإستعمال عدة العزل وكانت ذات تركيز عالي نسبياً (10 – 5 ميكروغرام) لكنها بنقاوة دون المثالية (3.3 – 0.9). كانت نقاوة الطريقة الميكانكية بإستعمال جهاز عزل المادة الوراثية الالي (EZI )أفضل (2.2- 1.6) لكنها أقل تركيزاً (8 – 4 ميكروغرام) مقارنهً بالطريقة اليدوية. ضبط تركيز المادة الوراثية مع مايلائم طريقة تفاعل التضاعف التسلسلي (PCR)وأستعملت تسلسلات من بادىء البلمرة( Primers ) مخصصة لمضاعفة قطعتان تمثل جينABO بجميع اليلاته. تم مضاعفة قطعتان من جين ABO, القطعة الاولى في المحور 6 تتضمن النيوكليوتيد 261, والقطعة الثانية في المحور7 والمتضمنة النيوكليوتيد 703(جين ABO يتكون من 7 اكسونات و 6 انترونات) نتجَ من مضاعفة القطعة الاولى 200 زوج قاعدة بينما نتج عن القطعة الثانية 128 زوج قاعدة. فصلت نواتج بإستعمال النيوكليوتيدات 261 و 703 لتميز اليلات مجاميع الدم A,B,O بواسطة أنزيمات التقييد.} }