TY - JOUR ID - TI - Isolation of Latent Matrix Metallo Proteinase-1 (Latent Collagenase-1) from Serum and Synovial Fluid of Rheumatoid Arthritis Patient عزل أنزيم الميتالوبروتينيز-1-الكامن (الكولاجينيز-1-الكامن) من المصل والسائل الزليلي لمريض مصاب بالتهاب المفاصل الرثوي AU - Zahraa M. Hamoudatt زهراء محمد علي حمودات AU - Layla A. Mustafa Department of Chemistry ليلى عبد الله مصطفى PY - 2013 VL - 24 IS - 6E SP - 23 EP - 36 JO - Rafidain journal of science مجلة علوم الرافدين SN - 16089391 AB - This study included the isolation of the enzyme Matrix Metalloprotrinase-1 (MMP-1; Collagenase-1) from serum of healthy individual and synovial fluid (SF) of a patient with rheumatoid arthritis using different techniques.After precipitation of proteins using saturated ammonium sulfate, two porteinous components had been isolated by gel filtration chromatography. It was found that only the first peak has high activity of latent-MMP-1. The apparent molecular weights of MMP-1 in serum and SF using gel filtration chromatography was found to be (47752 ± 816 and 48194 ± 707) dalton respectively.High performance liquid chromatography (HPLC) was used to show the extent of purity. The main maximum of the enzyme from serum and SF appeared at retention times (1.652 and 1.65) minutes respectively compared with the retention time of standard enzyme at (1.571) minutes. The approximate molecular weight of latent-MMP-1 by HPLC technique, in serum and SF were found (48067 and 48033) dalton respectively.The study included, also, the effect of some material compounds on the activity of latent-MMP-1. The results revealed that the addition of ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA), 2,4-dinitrophenol, sodium azide, potassium oxalate, mercaptoethanol (MEH), glutathione (GSH), cystein and healthy human serum decreased the activity of latent-MMP-1, while the addition of NaCl, MgSO4, CoCl2, CaCl2, CuSO4, ZnSO4, HgCl2 and pepsin increases the activity of enzyme.

تضمنت هذه الدراسة عزل أنزيم الميتالوبروتينيز-1-الكامن (الكولاجينيز-1-الكامن) من مصل شخص سليم ومن السائل الزليلي لمريض مصاب بالتهاب المفاصل الرثوي باستخدام تقنيات مختلفة. وقد فصلت حزمتين رئيسيتين من البروتينات بتقنية الترشيح الهلامي للراسب البروتيني الناتج من الترسيب بكبريتات الأمونيوم. أظهرت حزمة واحدة فقط فعالية عالية لأنزيم الميتالوبروتينيز-1-الكامن.قدر الوزن الجزيئي للأنزيم في المصل والسائل الزليلي باستخدام الترشيح الهلامي وكان بحدود (47752 ± 816) و (48194 ± 707) دالتون على التوالي.استخدمت تقنية كروماتوكرافيا السائل ذو الأداء العالي لبيان مدى نقاوة البروتين الناتج من معرفة قمة الروغان التي تم الحصول عليها، أظهرت قمة الحزمة لأنزيم المعزول من المصل والسائل الزليلي عند زمن ٳحتباس (1.652 و 1.65) دقيقة على التوالي مقارنة بزمن احتباس الأنزيم القياسي (1.571) دقيقة .أظهرت النتائج أن الوزن الجزيئي التقريبي للأنزيم في المصل والسائل الزليلي و باستخدام تقنية كروماتوكرافيا السائل ذو الأداء العالي يقع بحدود (48067 و48033) دالتون على التوالي.درس تأثير بعض المركبات الكيميائية على فعالية الأنزيم، حيث أظهرت النتائج أن إضافة رباعي حامض الخليك أثيلين ثنائي الأمين و2,4-ثنائي نايتروفينول والصوديوم أرسينيت والصوديوم أزيد وأوكزالات البوتاسيوم والميركابتو ٳيثانول والكلوتاثايون والسستين ومصل بشري سليم يؤدي الى تقليل فعالية الأنزيم، إلا أنه عند إضافة كلوريد الصوديوم والكالسيوم والكوبالت والزئبق وكبريتات المغنيسيوم والنحاس والخارصين والببسين تؤدي ٳلى زيادة فعالية الأنزيم. ER -