TY - JOUR ID - TI - Spectroscopic studies of AFP, Anti AFP antibody and AFP/125I- anti AFP antibody complex. دراسات طيفية لجزيئة البروتين الجنيني الفا (AFP) جزيئة الضد لـ (AFP) والمعقد بين AFP وجزيئة الضد المعلم باليود المشع 125 AU - Hathama R Hassan حذامة رزوقي حسن AU - Sami A Al Mudhaffar سامي المظفر AU - Bilal Jasir Mohammed بلال جاسر محمد PY - 2013 VL - 7 IS - 2 SP - 36 EP - 44 JO - Journal of university of Anbar for Pure science مجلة جامعة الانبار للعلوم الصرفة SN - 19918941 27066703 AB - The aim of this work is to characterize spectrophotometrically the isolated Alpha fetoprotein from human colorectal tumor homogenates and the molecules of both AFP antibody and the complex of AFP/anti AFP antibody.Gel filtration technique was used to separate 125I-anti AFP antibody bound to human AFP from unbound (free) 125I-anti AFP antibody. The characterization of human-AFP, anti-AFP, and (AFP/Anti-AFP) complex were carried out through the ultraviolet (U.V) spectroscopic studies.Factors affecting the light absorption properties of the molecules under investigation in this work such as pH, solvent polarity (solvent perturbation technique), spectrophotometric pH titration and thermal stability have been studied.The spectrophotometric pH titration for h-AFP, anti AFP, and (AFP/anti-AFP) complex showed that pKa for tyrosine was 9.5, 10.2, and 9.9, while for histidine was 5.7, 6.0, and 5.9 respectively. Spectrophotometric pH titration and several spectral changes were obtained in the presence of different polar and non-polar solvents, like the alteration of max position and intensities of protein spectrum, and the appearance of new chromophores on the surface of protein molecule. These chromophores where embedded in an interior region of the protein in the absence of the solvent.The difference in pH and polarity of the solvents is very important thing to characterize the protein molecules spectrophotometrially because they change the positions and values of molecules λmax in the UV region.

الهدف من هذه الدراسة هو للتوصيف الطيفي لجزيئة البروتين الجنيني الفا (AFP) المنقى من متجانسات اورام القولون والمستقيم البشرية وكذلك توصيف مستضد الـ (AFP) والمعقد المتكون من الجزيئة والمستضد. استخدمت تقنية الترشيح الهلامي لفصل المعقد عن المستضد المعلم باليود المشع 125. تم التوصيف الطيفي في منطقة الاشعة فوق البنفسجية وتم دراسة المؤثرات على امتصاص الضوء وهي الدالة الحامضية وقطبية المذيب ( اي تقنية التشويه بالمذيب) والتسحيح الطيفي والاستقرارية الحرارية بوجود تراكيز مختلفة من ملح (NaCl).اظهر التسحيح الطيفي ان قيم ثوابت التاين لمتخلفات الحامض الاميني التايروسين لـ (AFP) و المستضد والمعقد كانت 9.5 و 10.2 و 9.9 على الترتيب بينما كانت للهستيدين 5.7 و 6.0 و 5.9 على الترتيب.تم ملاحظة التغيرات الطيفية الحاصلة على الجزيئات عند استخدام مذيبات مختلفة اذ تغيرت قيم قمم الامتصاص العظمى (λmax)وكذلك مواقع القمم. كما تم ظهور مجموعات قابلة للامتصاص ( الكروموفورات) نتيجة للاختلاف في قطبية المذيبات ونتيجة للتسحسح الطيفي دلالة على ان الكروموفورات كانت ضمن المناطق الداخلية للبروتين وبتاثير المذيب وصلت للسطح واصبحت معرضة للشعاع الطيفي. الاختلاف في قيم (pH)والقطبية عوامل مهمة جدا لتوصيف جزيئة البروتين طيفيا لما لها من تاثيرات على قيم حزم الامتصاص ومواقعها ضمن منطقة الاشعة فوق البنفسجية. ER -