TY - JOUR ID - TI - Uricase Isolated from Seeds of Leek (Allium ampeloprasum), Celery (Apium graveolens) and Arugula (Eruca sativa) انزيم البوريكيز المعزول من بذور الكراث (Allium ampeloprasum) والكرافس (Apium graveolens) والجرجير (Eruca sativa) AU - Luay Abed Al-Helaly لؤي عبد الهلالي AU - Fatma A. Mohammad فاطمة عبد الحميد محمد PY - 2014 VL - IS - 55 SP - 340 EP - 356 JO - Iraqi National Journal Of Chemistry المجلة العراقية الوطنية لعلوم الكيمياء SN - 22236686 AB - AbstractThis research included isolation of uricase from the seeds of leek (Allium ampeloprasum ), celery(Apium graveolens) and arugula(Eruca sativa). Studied the factors effecting its activity and determination of its molecular weight. One proteinous peak had been isolated by gel filtration (using sephadex )G-100)) from the proteinous supernatant obtained using ammonium sulfate saturation(70%). The apparent molecular weight of the isolated enzymes using gel filtration chromatography were (59600+ 209) Dalton for leek, (59430+ 221) Dalton for celery and (59800+ 190) Dalton for arugula .The results also showed that the optimum conditions for the activity of uricase isolated from seeds of leek, celery and arugula obtained at (100 µg/ml) of enzymes concentration using (100, 100 and 120 mmol/l) of uric acid as a substrate, with borate buffer solution at pH (7.0, 7.0, 6.5 ) for (15) minutes at (40, 40 and 35 C) respectively. Using Line Weaver–Burk plot, the values of maximum velocity (Vmax) and Michaelis constant (Km) were from to be (33.3 µmol/ min) and (83.3 mmol/l) for leek, (40 µmol/ min) and (285.7 mmol/l) for celery while (27 µmol/ min) and (166.6 mmol/l) respectively for arugula. When using 100 mM chemical compounds for mercuric chloride(HgCl2), ferrous chloride (FeCl2) and ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) showed decreased the activity of the enzyme, but calcium chloride (CaCl2), manganese sulphate (MnSO4), magnesium sulphate (MgSO4) and potassium chloride (KCl) increased the activity .

الخلاصةتم عزل إنزيم اليوريكيز من بذور الكراث (Allium ampeloprasum) والكرافس (Apium graveolens) والجرجير (Eruca sativa) ثم درست بعض العوامل المؤثرة على فعالية الإنزيم فضلا عن تحديد وزنه الجزيئي. حيث تم فصل قمة بروتينية واحدة بتقنية الترشيح الهلامي سيفادكس نوع G-100 للراسب البروتيني الناتج من عملية الترسيب بكبريتات الامونيوم (70%). بعدها قدر الوزن الجزيئي للإنزيم باستخدام تقنية الترشيح الهلامي التي كانت بحدود 59600 + 209 دالتون للكراث و59430 + 221 دالتون للكرافس و59800 + 190 دالتون للجرجير.أشارت النتائج أيضا إن الظروف المثلى لقياس فعالية الإنزيم المنقاة من بذور الكراث والكرافس والجرجير على التوالي: عند تركيز الإنزيم 100 مايكروغرام/مل باستخدام حامض اليوريك كمادة اساس عند تراكيز 100، 100 و120 ملي مول/لتر بوجود محلول بورات المنظم عند أس هيدروجيني 7.0، 7.0، 6.5 وزمن التفاعل 15 دقيقة ودرجة حرارة 40، 40 و35°م على التوالي. واستخدمت رسومات لاين ويفر– برك لحساب قيمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت مكيلس (Km) وكانت مساوية لـ 33.3 مايكرومول/دقيقة و83.3 ملي مول/لتر للكراث و40 مايكرومول/دقيقة و285.7 ملي مول/لتر للكرافس، بينما 27 مايكرومول/دقيقة و166.6 ملي مول/لتر على التوالي للجرجير. لوحظ عند استخدام 100 ملي مول لكل من المركبات الكيميائية كلوريد الزئبقيك(HgCl2) وكلوريد الحديدوز(FeCl2) واثيلين ثنائي الامين رباعي حامض الخليك (EDTA) انها تعمل على خفض فعالية الإنزيم ولكن كلوريد الكالسيوم (CaCl2) وكبريتات المنغنيز (MnSO4) وكبريتات المغنيسيوم (MgSO4) وكلوريد البوتاسيوم (KCl) عملت على زيادة فعالية الإنزيم . ER -