TY - JOUR ID - TI - EXAMINING THE PROPERTIES OF LACTASE PRODUCED FROM THE MOLD Aspergillus aculeatus 3. DETERMINATION OF THE OPTIMUM CONDITIONS FOR THE INTRACELLULAR ENZYME PRODUCTION AND PARTIAL PURIFICATION WITH STUDYING SOME OF IT’S PROPERTIES AND APPLICATIONS إنتاج اللاكتيز من العفن Aspergillus aculeatus ودراسة بعض صفاته 3- تعيين الظروف المثلى لإنتاج اللاكتيز الداخل خلوي Intracellular وتنقيته جزئياً و دراسة بعض خصائصه وتطبيقاته AU - S. R. Alani سعود رشيد العاني AU - S. S. Al-Taáy سمر صالح الطائي AU - A. T. Al-Rawi اكرم ثابت الراوي PY - 2010 VL - 15 IS - 1 SP - 154 EP - 167 JO - IRAQ JOURNAL OF AGRICULTURAL RESEARCH مجلة الزراعة العراقية البحثية SN - 27905306 27905314 AB - The optimum condition and best medium for the production of intracellular lactase were studied.The best conditions for the enzyme production from the mold Aspergillus aculeatus were found as : period of fermentation 168h., initial follows pH 5.0, size of inoculums 1106 spore/ml., speed of shaking incubator 150 r.p.m., temp. of fermentation 30C. The best medium for the intracellular lactase production was: deproteinized whey fortified with (NH4)2SO4 0.1% (W/V), K2HPO4 0.1% (W/V), yeast extract 0.01% (W/V) and lactose 10% (W/V).The intracellular lactase was partially purified by two steps that included: dialysis and ion exchange column chromatography (DEAE-cellulose) the yield and fold of purification was 67.69 and 2.63% respectively. The Properties of the partially. purified lactase were investigated. It was found that the pH stability ranged between 5-7. The enzyme retained 94% of it’s original activity after incubation at 50C for 30 min. And the complete loss of the activity was at 60C for the same peiod. The enzyme activity was inhibited by D- galactose. Some technical applications of the crude lactase were investigated. It was found that there was a development in the rate of lactic acid production in lactase hydrolyzed milk by dialyzed and non dialyzed lactase during fermentation by starter of yoghurt in comparison with control milk. Lactase hydrolyzed whey by crude intracellular lactase was used in the production of biomass from baker’s yeast Saccharomyces cerevisiae. There was a raise in biomass by one log. cycle after incubation for72 h. Whey proteins were around activators for crude lactase activity, while milk caseins were strong inhibitors.

درست الظروف المثلى لإنتاج اللاكتيز الداخل خلوي (Intracellular) فضلاً عن تعيين التركيبة المثلى لوسط إنتاج الإنزيم وكانت افضل الظروف لانتاج الانزيم من العفن Aspergillus aculeatus عند مدة تخمر 168 ساعة ورقم هيدروجين ابتدائي 5.0 وحجم لقاح 1 × 106 بوغ / مل وسرعة دوران الحاضنة الهزاز 150 دورة/ دقيقة ودرجة حرارة تخمر 30 ْم. أما أفضل وسط لإنتاج اللاكتيز الداخل خلوي فانه يتمثل بالشرش المزال منه البروتين والمدعم مع (NH4)2SO4 بتركيز 0.1% (وزن/حجـم) و K2HPO4 بتركيز 0.1 (وزن/حجـم) ومستخلص الخميرة بتركيز 0.01% (وزن/حجم) واللاكتوز بتركيز 10% (وزن/حجم) . نقي اللاكتيز الداخل خلوي تنقية جزئية بخطوتين هما: الديلزة والتبادل الأيوني باستعمال المبادل الأيوني (DEAE-cellulose) وكانت الحصيلة الإنزيمية وعدد مرات التنقية 67.69% و 2.63 مرة على التوالي. ودرست بعض خصائصه اذ كان رقم الهيدروجين الأمثل للثبات يتراوح بين 5-7 واحتفظ الإنزيم المنقى جزئياً بمقدار 94% من فعاليته عند درجة حرارة 50م / 30 دقيقة وفقد فعاليته تماماً عند 60 ْم للمدة ذاتها. كما وجد إن الفعالية الإنزيمية للإنزيم المنقى جزئياً قد ثبطت بوجود الكالاكتوز. وأشارت نتائج التطبيق التقني للإنزيم باستعمال اللاكتيز الخام الداخل خلوي قبل وبعد ديلزته في تحليل لاكتوز الحليب الفرز إلى زيادة في معدلات تطور الحموضة باستعمال بادئ اللبن الرائب مقارنةً مع استعمال الحليب غير المعامل بالإنزيم. كما اظهر الشرش المعامل (متحلل اللاكتوز باستعمال اللاكتيز الخام) قدرة في دعم نمو خميرة Saccharomyces cerevisiae وذلك بزيادة الكتلة الحيوية بما يقارب دورة لوغاريتمية واحدة . وكان لبروتينات الشرش تأثير تحفيزي في الفعالية الإنزيمية في حين كان لكازينات الحليب دور تثبيطي. ER -