Fulltext

Molecular and Bacteriological Detection of Some Bacterial Vaginosis Associate Bacteria in Women

التشخيص الجزيئي والبكتريولوجي لبعض أنواع البكتريا المرتبطة بالتهابات المهبل عند النساء

Khawlah Abdulameer Abed خولة عبد الامير --- Nuha Joseph Kandala نهى جوزيف قندلا

Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم
ISSN: 00672904/23121637 Year: 2016 Volume: 57 Issue: 3B Pages: 1926-1936
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Abstract

Bacterial vaginosis (BV) is one of the most common genital infections among women in the childbearing age. Many novel, fastidious and uncultivated bacterial species are related with BV. These are called bacterial vaginosis associated bacteria (BVAB), present in trace amount and have a significant role in the infection. A total of 80 vaginal swabs were obtained from 80 pregnant and non-pregnant women. Samples were collected from different hospitals in Baghdad city and Al-Kut city.Clinically, 60 sample among 80 were gave positive results depending on Nugent score and Amsel criteria ,the Bacteriologicall test showed the percentages of gram negative bacteria (E.coli ,K.pneumoniae, P.mirabilis, Ps.aeruginosaand A. baumanniiwere) were (38.3 ,28.3, 26.6,20,16.6,15)% respectively, while, the percentages of gram positive bacteria ( Lactobacillus spp., S. epidermidis , S. aureus, S. agalactiae and S. faecaliswere( 100, 46.6, 38.3,18.3 ,11.6)% respectively.The results of molecular detection revealed that the specific primers amplified in 48 sample of vaginal swabs and produced a single band with a molecular weight of 210 bp for G. vaginalisgene, and 9 samples of vaginal swabs for Leptotrichia/Sneathia gene and produced a single band with a molecular weight of 320bp,3While negative results for other bacteria such as Atopobiumvaginae and Bacterial Vagionosis Associated Bacteria 1,2,3 ( BVAB1, BVAB2 and BVAB3) .The results of LactobacillusSpp., showed that among 60 samples of LactobacillusSpp., 28 isolates (46.66%) were L. acidophilus and the PCR product appeared as a single DNA band with a molecular weight of 192bp,while 32 isolates (53.33%) were L. fermentum,the PCR product appeared as single DNA band with a molecular weight of 600 bp. Sequencing of 16s rRNA of G.vaginalisand L.fermentumwasagreed with PCR identification give similar identity in percentages (87.5 and 100)% respectively with the standard strains in NCBI web site. While for Leptotrichia spp. it differs and related to modified nucleic acid bacteria in comparison with NCBI web site and hence is considered as a novel BV associated bacteria in vagina.

يعد التهاب المهبل البكتيري من أكثر الأمراض التناسلية شيوعا ويصيب النساء في سن البلوغ. بعض أنواع البكتريا التي تتصف بكونها نادرة, شرهة و غير قابلة للزرع لها علاقة بهذا المرض, هذه البكتريا تسمى (البكتريا المرتبطة بالتهاب المهبل), حيث توجد باعداد قليلة وتلعب دورا مهما في الإصابة.تم الحصول على 80 عينة سريريه من 80 امرأة. جمعت العينات من مستشفى اليرموك في مدينة بغداد ومستشفيي الزهراء والكوت في مدينة الكوت . ثمانون امرأة خضعت لهذه الدراسة, ستون منها تم اختيارها كحالة مرضية اعتمادا على اختبار (Amsel criteria ,Nugent Score). اظهرت نتائج التشخيص البكتريولوجي للمسحات المهبلية تواجد انواع مختلفة من البكتريا السالبة لصبغة كرام( K.pneumoniae, P.mirabilis, P.aeruginosa and Acinetobacter spp.) ) بنسب (28,3, 26,6, 20 , 16,6 , 15) % على التوالي اما البكتريا الموجبة لصبغة كرام فكانت (Lactobacillus spp ,S. epidermidis , S. aureus , Streptococcus agalactiae and Enterococcus faecalis) بنسب(100 46,6, 38,3 , 18,3 , 11,6) %على التوالي. اظهرت نتائج التشخيص الجزيئي باستخدام تقنية PCR للكشف عن ستة انواع من البكتريا النادرة و الغير مستزرعة احتواء 48 عينة على حزمة مفردة بحجم حزيئي (210 ) زوج قاعدي تابعة الى بكتريا Gardnerella vaginalis,, بينما 9 عينات تحتوي على بكتريا Leptotrichia اذ اظهرت حزمة مفردة يحجم جزيئي (320) زوج قاعدي. بينما اظهرت النتائج عدم تواجد باقي الانواع المدروسة Atopobium vaginae والانواع المرتبطة بالمهبل Bacteria 1,2,3 BVAB1, BVAB2 and BVAB3)). واظهرت نتائج بكتريا Lactobacillus spp تواجد بكتريا Lactobacillus acidophilus في 28عينة اذ اعطت حزمة مفردة بحجم 192 زوج قاعدي. بينما 32 عينة اعطت نتيجة ايجابية لبكتريا Lactobacillus fermentum بظهور حزمة مفردة بحجم 600 زوج قاعدي. تم مقارنة نتائج التتابع للجين المتخصص لبكتريا , Gardnerella vaginalis Leptotrichia spp.و L.fermentum بوساطة قاعدة بيانات المركز القومي للمعلومات الحيوي ( NCBI ) وقد اشارت النتائج بأن Gardnerella vaginalis , L.fermentum لديها نسبة تماثل ( 92و 87,5) % مقارنة بالسلالات المعزولة عالميا, بينما Leptotrichia spp لا تتماثل وعدت نوع جديد من الانواع المعزولة من المهبل .

Keywords

Bacterial vaginosis --- Molecular detection --- PCR-technique.