Fulltext

Serum Antioxidant Enzymes and Purification of Blood Cells Cu-Zn Superoxide Dismutase in Chronic Childhood Diarrhea

Moaed O. Al-Gazally

journal of kerbala university مجلة جامعة كربلاء
ISSN: 18130410 Year: 2007 Volume: 5 Issue: 1 Pages: 39-51
Publisher: Kerbala University جامعة كربلاء

Abstract

This study included two parts: the firstly, measurements the antioxidant enzymes activities [Superoxide Dismutase (SOD), Catalase (CAT), Reduce Glutathione (GSH) and Glutathione –S- Transferase (GST)] and lipid peroxidation product (LPO) levels in sera of children healthy[control(n=35),male=16,females=15] and children with chronic diarrhea less than two years[patients (n=41), male=21,females=20].The results revealed that highly significant increasing in the SOD activity and LPO in sera of children with chronic diarrhea (p<0.01) in comparison with that of controls subjects. The results show depletion in the CAT, GSH and GST activities in sera of children with chronic diarrhea (p<0.01) to compared with control group. This increase and decrease in this enzyme in male more than female. The correlation between the level of GSH and SOD, GST.MDA. The results show highly negative correlation (significant) between GSH and (SOD, MDA) while weak positive correlation (no significant) between GSH and (GST, CAT). The secondly part from this study included the purification of erythrocytes Cu-Zn superoxide dismutase from control and children with chronic diarrhea by ion exchange chromatography, on a column (7×0.7 cm) of DEAE-Sepharose-CL-6B. The purification of SOD had a specific activity of 2956 U/mg protein(control) and 6502.6 U/mg protein for patients, and gave a single band on polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulfate (SDS) and each of its to subunit has a molecular weight about[(18500 Daltons, control) , (18300 Daltons, children with chronic diarrhea)].

هذه الدراسة تضمنت جزئيين : الأول قياس فعاليات الأنزيمات المضادة للأكسدة [superoxide dismutase ( SOD ), reduce glutathione (GSH ), catalase (CAT). [Glutathione –S- transferase(GST)وفعالية بيرو كسيد الدهون(LPO) في مصو ل كل من الأطفال الأصحاء(35n = ,ذكور=16 ,إناث = 15) ومرضى الإسهال المزمن ( أطفال اقل من سنتين 41, n = ,ذكور=21 ,إناث = 20). النتائج أظهرت ارتفاع معنوي في فعالية إنزيم أل SODو مستوى LPO لمرضى الإسهال المزمن ((P<0.01مقارنة مع مصول الأطفال الأصحاء .كذالك تم قياس فعاليات كل من الإنزيمات CAT, GSH , GST في نفس المجاميع وأظهرت النتائج انخفاض معنوي (P<0.01) لمرضى الإسهال المزمن مقارنة مع الأطفال الأصحاء وان الارتفاع والانخفاض في هذه الإنزيمات في الذكور أكثر مما في الإناث .العلاقة بين مستوى أنزيم GSHو, SOD CAT, MDA , GST.النتائج أظهرت وجود علاقة عالية المعنوية(سالبة) بين GSH و (SOD ,MDA ), بينما علاقة غير معنوية(موجبة) بين GSH و (GST,CAT) الجزء الثاني من هذه الدراسة تضمن تنقية إنزيم Cu-Zn superoxide dismutase من الأطفال الأصحاء ومرضى الإسهال المزمن بواسطة تقنية كروموتوكرافية التبادل ألايوني على عمود أبعاده (7×0.7) سم وهلام. DEAE-Sepharose-CL-6B إنزيم أل SOD المنقى من الأطفال الأصحاء ومرضى الإسهال المزمن يملك فعالية نوعية مقدارها (2956 u / mg) و ( (6502.6 u / mg على التوالي .وكل منهما أعطى حزمة مفردة بواسطة الترحيل الكهربائي بوجود أل SDS وكل وحدة ثانوية تملك وزن جزيئي مقدارها ]سيطرة (دالتون18500) ومرضى الإسهال المزمن(دالتون18300). [