Fulltext

Cloning and gene expression equine leukocyte α-interferon in cells of Escherichia Coli

استنساخ تعبير جين الانترفيرون الفا من كريات الدم البيضاء للحصان في بكتريا القولون Escherichia Coli

A. A. Muttar عرفات عبد الرزاق مطر --- M.I. Potapovich ماكسيم بتانوفج --- V.A. Prokulevich فلاديمير بروكليفيج

Al-Qadisiyah Journal of Veterinary Medicine Sciences مجلة القادسية لعلوم الطب البيطري
ISSN: 18185746 23134429 Year: 2013 Volume: 12 Issue: 1 Pages: 82-86
Publisher: Al-Qadisiyah University جامعة القادسية

Abstract

Interferon’splays role in innate immune responses through upregulation of costimulatory molecules and induction of proinflammatory cytokines.interferons including interferon alpha (IFNA). The present study characterized IFNA cDNA and predicted protein.The interferon’s play a great role in protection from infections, which have been called by microorganisms, and also have powerful antiproliferation and immunomodulation activity.The purposes of study:cloning andexpression of horse leukocyte interferonand purification the product protein. The results and discussion : In the result we isolated (DNA) from equine leukocyte in blood, which was using in the quality of matrix for amplification of α-interferon gene with PCR HELP, and isolation gene α-interferon and transformation in vector puc18 and expression vector PET24b (+) and recombinant plasmid was transformed into E. coli strain BL21( codon plus 440) induction with IPTG.The results showed the protein having the same molecular weight as horse interferon alphaabout 18.5 kDa.

الانترفيرونات تلعب دورا في الاستجابة المناعية الفطرية من خلال اعادة التنظيم وتحفيز السايتوكاينيز من خلال تكوينها مضادات للفايروسات ومضادات التكاثر ولها دورا كبيرا في الحماية من العدوى بواسطة الكائنات الحية الدقيقة، ولها نشاط مناعي.الغرض من الدراسة: استنساخ والتعبير الجيني لجين الانترفيرون الفا وتنقية البروتين المنتج.النتائج والمناقشة: تم عزل (DNA) من الكريات البيض في دم الخيول، وتضخيم جين الانترفيرون المعزول من الدنا بمساعدةPCR، ومن ثم التحول في ناقل puc18 تم التحول البكتيري بواسطة ناقلPET24b(+). البلازميد الهجين ينقل إلى سلالة الاي كولايBL21 (440) والتحفيز بواسطة اضافة IPTG. أظهرت النتائج ان البروتين المنتج بواسطة بكتريا الاي كولي له نفس الوزن الجزيئي للانترفيرون الفا للخيول بمايقارب18.5 كيلو دالتون.

Keywords

Cloning --- gene expression --- equine leukocyte α-interferon --- E. Coli --- استنساخ تعبير جين الانترفيرون الفا كريات الدم البيضاء للحصان بكتريا القولون