Fulltext

Crystal Violet Binding Assay for Assessment of Biofilm Formation by Klebsiella pneumoniae on Catheter, Glass and Stainless-steel Surfaces

أختبـار ربـط البـلور البنفسـجي لتقديـر تكـون الغشـاء الحيوي لبكتريـا Klebsiella pneumoniae على اسطح القثطار البولي و الزجاج و الفولاذ المقاوم للصدأ

Rashid M. Musleh رشيد محجوب مصلح --- Asmaa Q. Jebur أسماء قاسم جبر

Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم
ISSN: 00672904/23121637 Year: 2014 Volume: 55 Issue: 3B Pages: 1208-1212
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Abstract

In this paper, quantified study of the biofilm formed by Klebsiella pneumoniae isolated from urine specimen of patient suffering from acute urinary tract infection (UTI) on catheter, stainless-steel and glass coupon surfaces, as well as determine the relationship between time contact and biofilm progression using crystal-violet binding assay based on the values of optical density at 620nm of the crystal violet stain which bonded total biofilm biomass by resolubizing with 99.9% ethanol at the specific interval times. The result showed biofilm formed on three tested surfaces but in different degrees. According to obtained data, the catheter coupons presents a higher capability to attract bacteria cell and biofilm formation followed by glass surfaces while stainless-steel surfaces regard as a less attractive surfaces in bacterial adhesion and biofilm progression. The attachment of the bacterial cells on the fresh produce surfaces increase with the contact time but the increase reached a maximum at time 48h. in which, the optical densities of catheter, glass and stainless-steel coupon surfaces were (0.169 nm), (0.085 nm) and (0.07 nm) respectively. The statical analysis showed significant differences between substratum type's adherence and biofilm progression.

في هذا البحث، تمت دراسة كمية للغشاء الحيوي المتكون بواسطة بكتريا Klebsiella pneumoniae و المعزولة من عينة ادرار لمريض يعاني من التهاب المجاري البولية الحاد على كل من اسطح القثطار البولي و الزجاج و الفولاذ المقاوم للصدأ و تحديد العلاقة بين وقت تعرض القطع للعالق البكتيري و تطور الغشاء الحيوي للبكتريا ذاتها, بأستخدام أختبار ربط البلور البنفسجي و المعتمد على قيم الكثافة الضوئية لملون البلور البنفسجي المرتبط بالكتلة الحيوية الكلية للغشاء الحيوي و المستخلص بالكحول الايثانولي (99.9%) عند 620 نانوميتر ولفترات زمنية محددة. بينت النتائج تكون الغشاء الحيوي على الاسطح الثلاثة لكن بدرجات متفاوتة. وفقا للبيانات التي تم الحصول عليها، كان سطح القثطار البولي اكثر السطوح جذبا للخلايا البكتيرية و تكوينا للغشاء الحيوي يليه السطح الزجاجي بينما كان سطح الفولاذ المقاوم للصدأ الأقل جذبا للبكتريا، و فيها التصاق الخلايا البكتيرية للسطوح اعلاه يزداد بأزدياد وقت تعرضها للعالق البكتيري و ان هذة الزيادة تصل حدها الأعلى عند الساعة 48 حيث كانت الكثافة الضوئية لكل من سطح القثطار البولي و الزجاج و الفولاذ المقاوم للصدأ (0.169nm) و(0.085nm) و (0.07nm) على التوالي. أظهر التحليل الاحصائي فروق ذات دلالة إحصائية بين انواع اسطح الالتصاق و تطور الغشاء الحيوي.

Keywords

Biofilm --- Klebsiella pneumoniae --- Catheter --- Glass --- Stainless-steel --- Crystal Violet Binding Assay