Fulltext

Molecular study to detect cutaneous leishmania with identify the parasite species and screening for some virulence factors own

دراسة جزيئية للكشف عن طفيلي اللشمانيا الجلدي مع تحديد نوع الطفيلي والتحري عن بعض عوامل الضراوة الخاصة به

Ghyda,a Abbas Jassem غيداء عباس جاسم

journal of al-qadisiyah for pure science(quarterly) مجلة القادسية للعلوم الصرفة (فصلية).
ISSN: 19972490 Year: 2014 Volume: 19 Issue: 3 Pages: 76-83
Publisher: Al-Qadisiyah University جامعة القادسية

Abstract

This study aimed to evalute the sensitivity of the polymerase chain reaction technique (PCR) in detection of cutaneous leishmania parasite ,and identification the species of parasite,with search for the presence of three virulence factors lipophosphoglycan, Cysteine protease and proteophosphoglycans by using the same technique .Fifty-five biopsies were taken from skin ulcers which clinically diagnosed as cutaneous leishmaniasis from patients attending education AL-Diwaniyah hospital in AL-Qadisiya city for the period between 1 11 2012-1 5 2013 ,whose age ranged from (10-80) years .The DNA was extracted from samples,then amplified by using primers selected on repetitive kDNA for identification of a Leishmania parasite, it is L.major species and the above three virulence factors,after that DNA electrophoresis was done for the amplified DNA. The results showed that Leishmania parasite was detected in 89.09% of samples.The L.major species was identified in the majority of Leishmania parasite positive samples 98%. And the above three virulence factors were identifed in all L.major positive samples.There for , the study confirmed that PCR technique is a sensitive method in diagnosis of cutaneous leishmaniasis .Beside that it can be use in differentiation among different cutaneous leishmania spp. And identification of some parasite virulence factors. The study showed the L.major is the main cutaneous leishmania species in AL-Qadisiya city beside the prrsence of the three virulence factors in all L.major samples.

هدفت هذه الدراسة الى تقييم فعالية تقنية سلسلة تفاعل الانزيم المتبلمرPCR في الكشف عن طفيلي اللشمانيا الجلدي .وايضا تحديد نوع الطفيلي مع التحري عن ثلاثة عوامل ضراوة للطفيلي هيCysteine protease, proteophosphoglycans lipophosphoglycan,وبأستخدام نفس التقنية. تم جمع 55 عينة كخزعات من القروح الجلدية المشخصة سريريا كأصابات بداء اللشمانيا الجلدي للمرضى الوافدين الى مستشفى الديوانية التعليمي في محافظة القادسية للمدة الواقعة بين 1112012 – 152013 , وقد كان مدى أعمارهم بين 10-80 سنة. تم استخلاص DNA من العينات المأخوذة وبعد تضخيمه باستخدام بادئات خاصة مصممة للجين المشفر للدنا المسمى kDNA الخاص بعترة طفلي اللشمانياالجلدي ولنوعه المسمىLeishmania major ولعوامل الضراوة الثلاثة الخاصة به.ثم تم تمرير نواتج الدنا المضخم في جهاز الترحيل الكهربائي لـ DNA. اظهرت النتائج بأنه تم تشخيص طفيلي اللشمانيا الجلدي في 89.09%من العينات المأخوذة ,وان الطفيلي نوع L.major هو الغالب على العينات وبنسبة 98% وان العوامل سابقة الذكر موجودة في جميع عينات L.major . وبذلك أكدت الدراسة بأن تقنية سلسلة تفاعل الانزيم المتبلمر حساسة ودقيقة في تشخيص داء اللشمانيا الجلدي ,ويمكن ان تستخدم في التفريق بين أنواع طفيلي اللشمانيا الجلدي ولتحديد بعض عوامل الضراوة الخاصة به. وان L.major هو النوع الغالب لطفيلي اللشمانيا الجلدي في محافظة القادسية مع وجود عوامل الضراوة الثلاثة في كل عينات L.major.