research centers


Search results: Found 7

Listing 1 - 7 of 7
Sort by

Article
Purification And Characterization of Trametes hirsute DSMZ No.5072 Laccase
تنقية وتوصيف انزيم اللاكس(laccase) المنتج من الفطرTrametes hirsuta DSMZ no.5072

Author: Ali A. Taha Al Shaikly علي عبد الرحمن طه
Journal: Jornal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية ISSN: 18151140 Year: 2009 Volume: 3 Issue: 1 Pages: 46-59
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

In this study, the Production of laccase enzyme from Trametes hirsuta strain (DSMZ No.5072) in the 2L fermenter using different culturing media had been achieved. The production of laccase was also induced by using different concentrations of Copper sulphate, 2, 5 Xylidine and Gallic acid as inducers. The maximum laccase activitiy observed during T. hirsuta growth in the presence of various inducers was 5.89 U ml -1. Laccase purification was performed by precipitated the enzymes with ammoniam sulphate, saturation 90%, followed by gel filtration chromatography using Sephadex-G25 and more purified by ion-exchanger (DEAE-Sephadex). The obtained enzyme was concentrated by ultra filtration membrane and analyzed by SDS-PAGE. The activity of home prepared laccase and the commercial laccase from Trametes versicolor were carried out in different media (aqueous, reverse micelles, co-solvent, ionic liquid and ternary systems) depend on oxidation of ABTS as an enzyme substrate. The optimum pH for the laccase activity of the two fungal laccases was observed at acidic pH values close to (pH 3.5-4.6) while the optimum temperature was 70ºC.

في هذه الدراسة , تم انتاج انزيم اللاكس من العزلة Trametes hirsuta DSMZ no.5072 في مخمر سعة 2 لتر باستخدام وسطين زرعيين واضافة محفزات مثل كبريتات النحاس , حامض الكاليك ((Gallic acid والزايليدين (2,5 Xylidine) , حيث بلغت الفعالية القصوى للانزيم 5.89 وحدة /مل . اجريت عملية ترسيب الانزيم بنسبة تشبع 90% كبريتات الامونيوم ثم اجريت عملية التنقية باستخدام كروموتوكرافي الترشيح بالهلام ) (Sephadex-G25 والتبادل الايوني (DEAE-Sephadex) , ثم تركيز الانزيم باستخدام تقننية الترشيح الفائق (Ultrafiltration) والتحليل باستخدام تقنية الترحيل الكهربائي ) (SDS-PAGE . قورنت فعالية اكسدة المادة الاساس (ABTS) للانزيم المحضر مختبريا مع الانزيم القياسي من الفطر Trametes versicolor في الوسط المائي والاوساط العضوية قليلة المحتوى المائي , حيث لوحظ ان درجة الحموضة المثلى لكلا الانزيمين تقع ضمن المدى الحامضي (3.5-4.6) وان درجة حرارة التفاعل المثلى كانت 70م .

Keywords


Article
Antioxidant activity of Linalool

Authors: Majid S. Jabir --- Ali A. Taha --- Usama I. Sahib
Journal: Engineering and Technology Journal مجلة الهندسة والتكنولوجيا ISSN: 16816900 24120758 Year: 2018 Volume: 36 Issue: 1 Part (B) Scientific Pages: 64-67
Publisher: University of Technology الجامعة التكنولوجية

Loading...
Loading...
Abstract

In recent years, Essential oils from their various aromatic plants hadbeen reported to be used in treating of many types of cancer due to their antitumoractivity. In addition, numerous studies had investigated the highest capability ofchemopreventive phytochemicals compound to act as anticancer drugs. In thepresent research, the antioxidant activity of Linalool on free radicals compoundswas studied. The Antioxidant activity was performed using two methods, DPPHand Hydrogen Peroxide (H2O2) Scavenging Capacity. The DPPH scavengingactivity demonstrated that Linalool had antioxidant activity comparing withascorbic acid. Linalool demonstrated moderate antioxidant activity with50.57471% compared with ascorbic acid that showed 86%. Meanwhile, H2O2scavenging capacity methods investigated that Linalool exhibited moderatescavenging activity 56.36% comparing with ascorbic acid that showed 65%. Theresults of this study investigated that the Linalool can be used as easily accessiblesource of natural antioxidants. It can able to be used in the treating several typesof cancers as a result of antioxidant activity of it.


Article
Preparation of Nanoliposomes Incorporated Leishmania donovani Antigens
تحضير مستضد اللشمانيا الحشوية المغروزة في الجسيمات الدهنية النانوية

Loading...
Loading...
Abstract

This study was designed to incorporate leishmania donovani antigens in nanoliposomes prepared by size exclusion (using Sephadex G25) and organic solvent (using Chloroform). Lipids mixture of 4Mm Phosphatidylcholine, 2.2mM Cholesterol and 0.55mM Phosphatidylethanolamine in a ratio of 7:2:1 was depended in two nanoliposome preparation methods. Physio-chemical characterizations of prepared nanoliposomes was performed by using Scanning Electron Microscope (SEM ), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and Zeta Potential assays to determine the size, morphology, chemical active group and charge . Parasite reactivation was carried out when inoculated into RPMI and incubated at 23 ̊ C for 4 days. Soluble Leishmania Antigenes (SLAs) were extracted from the promastigotes ghost membrane after fourth passages of subculturing in SNB9. The extracted SLAs were entrapped in prepared. The percentage of nanoliposomes entrapment efficiency (EE) was 62 and 50 of SLAs for chloroform and Sephadex G25 methods, respectively. Moreover, stability of SLAs entrapped nanoliposomes at 4 and 37 ̊C, as storage temperature, was examined. The stability at 4 °C showed decreasing in EE to 32 and 16 %, while stability at 37 °C revealed decreasing in EE to 16 and 8 % within 12 days of storage for nanoliposomes prepared in both methods, respectively.

في هذه الدراسة، تم استخدام طريقتين لتحضير الجسيمات الدهنية النانوية، الطريقة الاولى اعتمدت حجم الإقصاء و باستخدام السفادكس (G25) والطريقة الثانية هي طريقة استخدام المذيبات العضوية (باستخدام الكلوروفورم). اعتمدت نسبة تحضير من 1:2:7 لمركبات 4 ملي مولار من مركب الفوسفاتيديل كولين و 2.2 ملي مولار من مركب الكولسترول و 0.55 ملي مولار من مركب الفوسفاتيديل ايثانولامين في طريقتي التحضير. تم إجراء التوصيف الفيزيائي الكيميائي للجسيمات الدهنية النانوية باستخدام مجهر المسح الإلكتروني (SEM)، ومطياف فورييه بالأشعة تحت الحمراء (FTIR) وزيتا التكافئية لتحديد حجم وشكل والمجموعة الكيميائية النشطة والشحنة. ونظرا لكون مكونات الجسيمات النانوية الدهنية عبارة عن مركبات طبيعية, كانت فكرة الدراسة في استخدامها كمتممات نانوية تحمل مستضدات طفيلي اللشمانيا الحشوية الذائبة خارج الجسم الحي. تم تنشيط الطفلي على وسط ( RPMI ) وفي درجة حضن 23 م لمدة 4 ايام ليتم بعدها استخلاص المستضد من غشاء الطفيلي بعد التمرير الرابع من زراعة الطفيلي في وسط (SNB9) ليتم قنصها في الجسيمات المحضرة انيا. تم احتساب كفاءة الاحتفاظ او انحباس المستضدات في الجسيمات المحضرة وكانت 62 و 50 بطريقتي استخدام الكلوروفورم والسيفادكس على التوالي. اضافة الى ذالك, فقد تم احتساب ثباتية الجسيمات القانصة للمستضدات الذائبة في درجتي حرارة تخزين 4 و37 م ̊ , وظهرت النسبة المئوية لثبات هذا المعقد بقيمة 32 و 16 في درجة حرارة تخزين 4م ̊ في حين بلغت 16 و 8 في درجة حرارة تخزين 37 م ̊ للجسيمات المحضرة باستخدام الكلوروفورم والسيفادكس ( G25) وخلال 12 يوم وعلى التوالي.


Article
CHARACTERIZATION OF WHEAT GERM LECTIN
توصيف لكتين جنين الحنطة

Loading...
Loading...
Abstract

This research was aimed to study the characters of purified Wheat germ lection (Wheat germ agglutinin) which confirmed by electrophoresis. It was shown that the molecular weight was 17800 Dalton as determined by polyacrylamid gel electrophoresis under denaturing conditions and presence of the reducing agent 2-mercaptoethanol. The isoelectric point was found to be 8.7 as determined by Isoelectric focusing which indicating the lection under study is basic protein. No carbohydrate was found in purified lectin using Phenol-Sulfuric acid method so the lection under study differ from other lections in this struactural property because the other ones are glycoprotein. The optimum pH for lection activity was found to have ranged from 6.5-7.0 while agglutinating activity was found to be lost completely at pH lower than 5.5 and more than 8.5 . The lection retained its original activity when incubated at 20-60°C for 15 minutes, while it had retained half of its original activity after incubation for the same time at 70 °C the activity was decreased to lowest level at 80°C that it was lost 93.75 % of its original activity and became completely inactive at 90°C. It found that the lection has not lost any of its activity until six week of storage at -18 °C , but the agglutinating activity was decreased partly of seventh and eighth week of storage under the same condition, as it lost just 50% of the activity . It was found that the activity decline so quickly after the first week at 25 °C and after the second week when held at 4 'C.

استهدف البحث الحالي دراسة خواص لكتين جنين الحنطة (ملازن جنين الحنطة ) التقى حد التجانس كما تم التاكد منه بالترحيل الكهربائي وبينت النتائج وزنه الجزيئي يبلغ 17800 دالتون بطريقة الترحيل الكهربائي تحت الظروف الماسخة باستخدام SDS وبوجود المادة المختزلة 2 – ميركابتوايثاتول وبلغت نقطة تعاداه الكهربائي 8.7 بطريقة التبئير الكهربائي المتشابة مما يشسر انه بروتين قاعدي الشحنة تبين خلواللكتين المتقى من الكاربوهيدرات عند اجراء التقدير بطريقة الفينول – حامض الكبريتيك ويختلف اللكتين قيد الدراسة في هذه الخاصية عن اللكتينات الاخرى التي تتميز بكونها من البروتينات السكرية . تراوح الأس الهيدروحينى الأمثل لفلعالية اللكتين بين 6.5 – 7.0 ‏في حين لوحظ انعدام فعالية التلازن عند الأسس الهيدروجبينة الاوطأ من 5.5 واعلى من 8.5 على حد سواء. واحتفظ اللكتين بكامل فعاليته عند حضنه مدة 15 دقيقة فى درجات الحرارة 20 -60 م فيما احتفظ بمعدل 50% من فعالهته الأصلية عند حضنه بالمدة نفسها بدرجة الحرارة 70 ‏م وانخفضت الفعالية الي اوط مستوى لها عند 80 ‏م اذ فقد اللكتين 93.75 % ‏من فعالهته ولقد كامل فعالهته عند درجة الحرارة 90 ‏م. احتفظ اللكتين بفعالهتة كاملة عند الخزن بدرجة ´حرارة -18 م لغاية الأسبوع السادس من الحزن ثم تدهورت الفعالية قليلا فى الأسبوعين السابع والثامن إذ فقد اللكتين 50 %‏ ‏من فعاليته الأصلية بعد هذه المدة . فيما شهدت الفعالية التلازنية انخفاضا واضحا بعد الأسبوع الأول من الخزن بدرجة الحرارة25 ‏م وبعد الأسبوع الثانى من الفزن بدرجة الحرارة 4 م .

Keywords


Article
SIMPLE METHOD FOR PURIFICATION OF WHEAT GERM LECTIN BY AFFINITY CHROMATOGRAPHY
طريقة مبسطة لتنقية لكتين جنين الحنطة بكروموتوكرافيا الالفة

Loading...
Loading...
Abstract

Because of various application of purified lectin ,the aim of this study was to extract it from wheat germ which is one of the byproducts from wheat processing. The extraction steps including fat elimination from wheat germ by heptan fellowed by lectin extraction by 0.05 M hydrochloric acid solution in ratio (1: 10)(w/v) for one hour at 25C . The crud extract was subjected to different purification steps including concentration by ultrafiltration by this step it was possible to eliminate high portion of low molecular wight compounds which is below 10000 dalton. The difiltration was done to concentrated the sample by 0.01 M Tris-HCL, pH 8.5 .The purification folds and yeild of the lectin were 5.71 and 98.34% respectively. Ion-exchange chromatography by bachwise procedure using Diethel amino ethel cellulose (DEAE¬Cellulose) then affinity chromatography by chitin column, where the chitin itself was prepared from outer shells of shrimp ,we obtained about 40 g chitin which is equel to 20% chitin from the dry shells then the chitin was used as a matrix and a ligand in affinity chromatography for purification of the lectin after this step the purification fold was 20 and yeild of the lectin was 19.51 % . The lectin was purified to homogeneity as indicated by presence of one band in polyacrylamide gel electrophoresis under denaturing conditions in presence and absence of the reducing agent 2-mercaptoethanol .The amount of lectin is about 60mg /1000 gm of wheat germ when using the steps which indicated in this study .

‏نظرا للاستخدامات المتعددة للكتين النقي فقد هدفت هذه الدراسة إلى استخلاصه من جنين الحنطة , وهو أحد النواتج العرضية لتصنيع الطحين .،وشملت خطوات الاستخلاص إزالة الدهن من جنين الحنطة باستخدام الهبتان تلا ه استخلاص اللكتين بمحلول حامض الهيدروكلوريك بتركيز 0.05 ‏ مولار بنسبة (1 :10 ) (وزن/حجم) مدة ساعة واحدة بدرجة حرارة 25 ‏م. واخضع المستخلص الخام لخطوات تنقية عدة تمثلت بتركيزه بالترشيح الفائق لازالة نسبة كبيرة من المركبات ذات الاوزان الجزيئية التي تقل عن 10000 ‏ دالتون. وأجريت عملية غسل وترشيح متكررة Diafiltration للاطموذج المركز باستخدام محلول Tris-HCI‏ الدارئ بتركيز0.01 ‏مولار ذي الأس الهيدروجيني8.5 ‏وحققت هذه الخطوة تنقية جزئية للكتين بلغت 5.71 ‏مرة وبحصيلة مقدارها 98.34 % . تلتها خطوة كروماتوكرافيا التبادل الأيوني _باسلوب الوجبة باستخدام المبادل شنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE- Cellulose وبلغت عدد مرات التنقية لجزء الغسل 7.5 ‏مرة في حين بلغت حصيلة اللكتين 80 ‏% و أخيرا جرت خطوة تفتية اللكتين باستخدام كروماتوكرافيا الألفة بعمود الكايتين والذي حضر مختبريا من الهيكل الخارجي للروبيان وأسفرت عملية التحضير عن الحصول على ما يقارب من 40 ‏غم كايتين أي ما يعادل20 % ‏كايتين من وزن القشور الجافة واستخدم الكايتين المحضر بوصفه شبكة للفصل وذراعا في كروماتوكرافيا الألفة لتنقية اللكتين. وبلغت عدد مرات التنقية بعد هذه الخطوة 20 ‏ مرة وبحصيلة متدارها 19.51 ‏% ‏. وقد تبين ان اللكتين المنقى يتميز بنقاوة عالية حد التجانس وذلك بظهوره حزمة واحدة عند ترحيله كهربائيا في هلام متعدد الاكريلامايد بظروف ماسخة بوجود المادة المختزلة 2 -ميركابتوايثانول وغيابها. وباتباع الخطوات المذكورة في هذه الدراسة بلغت كمية اللكتين المحصل عليها 60 ‏ ملغم/ 1000 ‏غم من جنين الحنطة .

Keywords


Article
Biotransformation of Natural Compounds by Free and Immobilized Fungal Laccase using Mediator Combinations in the LMS Reaction Model.
التحول الحيوي للمركبات الطبيعية باستخدام انزيم اللاكيزlaccase) (الحر و المقيد والجمع بين المركبات الوسطية في نموذج تفاعل(LMS)

Loading...
Loading...
Abstract

The ternary systems constructed on the basis of isotropic properties of various compositions of a hydrocarbon and a short chain alcohol in a low water content were used to carry out the oxidation of Mastic oil, d-limonene and α-Pinene at 30 °C using fungal laccase from Trametes versicolor in the presence of different concentrations and combinations of three mediators ,2,2'-azino-bis 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid(ABTS), 1-hydroxybenzotriazole (HBT) and 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl (TEMPO) in Laccase Mediator System (LMS) model . The biotransformation was conducted with the use of either free or immobilized laccase on organogels prepared by introducing appropriate amounts of Dioctyl Sulfosuccinate (AOT) microemulsions containing laccase to a second solution of polymer Hydroxy Propyl Methyl Cellulose (HPMC) . The main oxidation product of α-pinene was verbenone and verbenol, but low amounts of α-pinene oxide was also detected. Similarly, d-limonene was oxidized to limonene epoxide, while mastic oil was oxidized to α-pinene oxide, limonene epoxide, verbenol, verbenone . In all cases, some of the reaction products remained unidentified. The amounts of unidentified products were rather high especially in the case of d-limonene and crude mastic oil. Mediator Combinations with HBT in different ratio were used for further transformation optimization of the three natural compounds in the ternary systems. Ascorbic and Gallic acids in 40mM concentration also were used in combination with HBT to transform the natural compounds. All combinations revealed different level of oxidation and only one combination of Gallic acid and HBT was unable to oxidize any of three compounds. The natural compounds oxidation rate correlated with the mediator concentration in the reaction mixture, and clear synergetic effect were found when two mediators were present, 10mM ABTS and 80mM HBT , while the best triple combination was 10mM ABTS: 40mM HBT: 40mM TEMPO .

في هذه الدراسة تم اعتماد النظام الثلاثي متساوي الخواص من حيث الهيدروكاربون والكحول قصير السلسلة في مستوى منخفض من الماء لاكسدة مركب البنين ,الليمونين و زيت المستكي الطبيعي في درجة حرارة °30م وباستخدام انزيم اللاكيز( Laccase) المنتج من ( Trametes versicolor ) بوجود المركبات الوسطيةTEMPO ( ABTS, HBT,) في نموذج تفاعل الانزيم ,المركب الوسطي و المادة الاساس والذي يسمى( LMS). اجري التحول الحيوي للمركبات الطبيعية اعلاه باستخدام الانزيم الحر وبشكله المقيد والذي تم تحضيره في الهلام العضوي بمزج المستحلب الذي يحتوي الانزيم مع البوليمر (HPMC) , حيث لوحظ ان معظم نواتج الاكسدة لمركب البنين تتكون بصورة رئيسية من Verbenol ,Verbnone) (وبنسبة اقل من مركب (Pinene oxide) بينما كان ناتج اكسدة الليمونين الرئيسي هو (Limonene epoxide) في حين ظهرت جميع هذه النواتج عند اكسدة زيت المستكي . كانت نسبة النواتج غير المشخصة من اكسدة الليمونين وزيت المستكي اعلى بكثير من اكسدة البنين . لوحظ ان عملية الجمع بين المركبات الوسطية يؤدي الى زيادة نواتج عملية التحول الحيوي خاصة عند اسخدام (HBT ). تم استخدام حامض الاسكوربيك و الكاليك( Gallic ) في عملية الجمع مع المركبات الوسطية , حيث لوحظ زيادة نواتج التحول الحيوي مع جميع حالات الجمع باستثناء اسخدام حامض الكاليك مع ( HBT) . كانت نواتج التحول الحيوي عند الجمع بين (10mM ABTS:80mM HBT) افضل من اسخدام المركب الوسطي بشكل منفرد , في حين كان استخدام ثلاث مركبات وسطية وبتراكيز 10mM ABTS:40mM HBT:40mM TEMPO)) الافضل بين كل انواع الجمع للمركبات الوسطية.

Keywords


Article
Preparation of Nanoliposomes by Size Exclusion Chromatography to Entrap Soluble Antigens from Leishmania Donovani
تحضير الجسيمات الدهنية النانوية باستخدام كروموتوكرافيا الترشيح الحجمي لاقتناص المستضدات الذائبة لطفيلي اللشمانيا دونفاني

Loading...
Loading...
Abstract

In this study, we investigated the ability of nanoliposomes preparation, as a nanoadjuvant, to entrap soluble Leismania donovani antigens (SLAs) and release in vitro. The parasite reactivation was carried out when inoculated into Rosewell park memorial institute media (RPMI) and incubated at 23 °C for 4 days. L. donovani promastigote inoculum (104 cell / ml) of 4 days was used to inoculate modified medium of Saline - Neopeptone and Blood agar 9 (SNB 9) to produce promastigote mass. SLAs were extracted from the promastigotes ghost membrane after fourth passages of subculturing in SNB. The membrane pellet obtained was suspended in 5 mM Tris buffer (pH 7.6) and sonicated three times at 4 °C and entrapped in freshly prepared nanoliposomes. Lipids mixture of 4mM Phosphatidylcholine, 2.2 mM Cholesterol and 0.55 mM Phosphatidylethanolamine in a ratio of 7:2:1 were used to prepare nanoliposome. Physio-chemical characterizations of prepared nanoliposomes was performed by using Scanning Electron Microscope (SEM) , Atomic Force Microscope (AFM) and Zeta Potential assays to determine the size, morphology and charge. The efficiency of freshly prepared nanoliposoms to entrap SLAs was determined by measuring the nanoliposome efficiency entrapment (EE). The percentage of EE was 50 and 27.5 of SLAs entrapped nanoliposomes prepared by Sephadex G25 and Sephadex G75, respectively. Moreover, stability of SLAs entrapped nanoliposomes was examined at 4 and 37 °C as a storage temperature.

في هذه الدراسة، قمنا بفحص قدرة الجسيمات الدهنية النانويه المحضره ، باعتبارها مساعدات مناعية نانويه ، لاقتناص مستضدات اللشمانيا دونفاني القابلة للذوبان (SLAs) في المختبر. جرى إعادة تنشيط الطفيلي عند تلقيحة في وسط زرعي خاص يعرف بالـ RPMI وحضنت في 23 م˚ لمدة 4 أيام. وقد استخدمت اللشمانيا دونفاني امامية السوط بعد 4 ايام من تلقيحها وبواقع 104خلية / مل لتلقيح الوسط الزرعي المعدل المكون من ملح - نيوببتون وأجار الدم 9 (SNB 9) لإنتاج كتلة من امامية السوط. تم استخراج مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان من غشاء اللشمانيا امامية السوط بعد التمريره الرابعة من المزرعة في الوسط SNB 9. علق راسب الاغشية التي تم الحصول عليها في 5 ملي مولر دارئ تريس (درجة الحموضة 7.6) وتم تكسير الخلايا ثلاث مرات في درجة حرارة 4 م˚ ، ومن ثم اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية المحضره بشكل طازج.استخدم خليط الدهون المكون من : 4 ملي مولر من Phosphatidylcholine ، 2.2 ملي مولر من Cholesterol و 0.55 ملي مولر من Phosphatidylethanolamine بنسب7:2:1 استخدمت لتحضير الجسيمات الدهنيه النانويه. تم تحديد المواصفات الفيزيائية الكيميائية للجسيمات الدهنية النانوية باستخدام مجهر المسح الإلكتروني (SEM)، مجهر القوة الذري (AFM) وقياس زيتا المكافئ ,وذلك لتحديد حجم وشك والمجموعة الكيميائية النشطة والشحنة لهذة الجسيمات. تم تحديد كفاءة الجسيمات الدهنية النانوية الطازجةلاقتناص مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان عن طريق قياس كفاءة اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية (EE). بلغت نسبة كفائة الاقتناص 50 و 27.5 من مستضدات اللشمانيا القابلة للذوبان المقتنصة بالجسيمات الدهنية النانوية والمحضره باستخدام سيفادكس G25 و G75 ، على التوالي . علاوة على ذلك، تم فحص استقرار مستوى اقتناص الجسيمات الدهنية النانوية في درجة تخزين 4 و 37 م˚ .

Listing 1 - 7 of 7
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (7)


Language

English (5)

Arabic (2)


Year
From To Submit

2018 (1)

2016 (2)

2012 (1)

2009 (1)

2008 (2)