research centers


Search results: Found 3

Listing 1 - 3 of 3
Sort by

Article
Preparation of Nanoliposomes Incorporated Leishmania donovani Antigens
تحضير مستضد اللشمانيا الحشوية المغروزة في الجسيمات الدهنية النانوية

Loading...
Loading...
Abstract

This study was designed to incorporate leishmania donovani antigens in nanoliposomes prepared by size exclusion (using Sephadex G25) and organic solvent (using Chloroform). Lipids mixture of 4Mm Phosphatidylcholine, 2.2mM Cholesterol and 0.55mM Phosphatidylethanolamine in a ratio of 7:2:1 was depended in two nanoliposome preparation methods. Physio-chemical characterizations of prepared nanoliposomes was performed by using Scanning Electron Microscope (SEM ), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and Zeta Potential assays to determine the size, morphology, chemical active group and charge . Parasite reactivation was carried out when inoculated into RPMI and incubated at 23 ̊ C for 4 days. Soluble Leishmania Antigenes (SLAs) were extracted from the promastigotes ghost membrane after fourth passages of subculturing in SNB9. The extracted SLAs were entrapped in prepared. The percentage of nanoliposomes entrapment efficiency (EE) was 62 and 50 of SLAs for chloroform and Sephadex G25 methods, respectively. Moreover, stability of SLAs entrapped nanoliposomes at 4 and 37 ̊C, as storage temperature, was examined. The stability at 4 °C showed decreasing in EE to 32 and 16 %, while stability at 37 °C revealed decreasing in EE to 16 and 8 % within 12 days of storage for nanoliposomes prepared in both methods, respectively.

في هذه الدراسة، تم استخدام طريقتين لتحضير الجسيمات الدهنية النانوية، الطريقة الاولى اعتمدت حجم الإقصاء و باستخدام السفادكس (G25) والطريقة الثانية هي طريقة استخدام المذيبات العضوية (باستخدام الكلوروفورم). اعتمدت نسبة تحضير من 1:2:7 لمركبات 4 ملي مولار من مركب الفوسفاتيديل كولين و 2.2 ملي مولار من مركب الكولسترول و 0.55 ملي مولار من مركب الفوسفاتيديل ايثانولامين في طريقتي التحضير. تم إجراء التوصيف الفيزيائي الكيميائي للجسيمات الدهنية النانوية باستخدام مجهر المسح الإلكتروني (SEM)، ومطياف فورييه بالأشعة تحت الحمراء (FTIR) وزيتا التكافئية لتحديد حجم وشكل والمجموعة الكيميائية النشطة والشحنة. ونظرا لكون مكونات الجسيمات النانوية الدهنية عبارة عن مركبات طبيعية, كانت فكرة الدراسة في استخدامها كمتممات نانوية تحمل مستضدات طفيلي اللشمانيا الحشوية الذائبة خارج الجسم الحي. تم تنشيط الطفلي على وسط ( RPMI ) وفي درجة حضن 23 م لمدة 4 ايام ليتم بعدها استخلاص المستضد من غشاء الطفيلي بعد التمرير الرابع من زراعة الطفيلي في وسط (SNB9) ليتم قنصها في الجسيمات المحضرة انيا. تم احتساب كفاءة الاحتفاظ او انحباس المستضدات في الجسيمات المحضرة وكانت 62 و 50 بطريقتي استخدام الكلوروفورم والسيفادكس على التوالي. اضافة الى ذالك, فقد تم احتساب ثباتية الجسيمات القانصة للمستضدات الذائبة في درجتي حرارة تخزين 4 و37 م ̊ , وظهرت النسبة المئوية لثبات هذا المعقد بقيمة 32 و 16 في درجة حرارة تخزين 4م ̊ في حين بلغت 16 و 8 في درجة حرارة تخزين 37 م ̊ للجسيمات المحضرة باستخدام الكلوروفورم والسيفادكس ( G25) وخلال 12 يوم وعلى التوالي.


Article
CHARACTERIZATION OF WHEAT GERM LECTIN
توصيف لكتين جنين الحنطة

Loading...
Loading...
Abstract

This research was aimed to study the characters of purified Wheat germ lection (Wheat germ agglutinin) which confirmed by electrophoresis. It was shown that the molecular weight was 17800 Dalton as determined by polyacrylamid gel electrophoresis under denaturing conditions and presence of the reducing agent 2-mercaptoethanol. The isoelectric point was found to be 8.7 as determined by Isoelectric focusing which indicating the lection under study is basic protein. No carbohydrate was found in purified lectin using Phenol-Sulfuric acid method so the lection under study differ from other lections in this struactural property because the other ones are glycoprotein. The optimum pH for lection activity was found to have ranged from 6.5-7.0 while agglutinating activity was found to be lost completely at pH lower than 5.5 and more than 8.5 . The lection retained its original activity when incubated at 20-60°C for 15 minutes, while it had retained half of its original activity after incubation for the same time at 70 °C the activity was decreased to lowest level at 80°C that it was lost 93.75 % of its original activity and became completely inactive at 90°C. It found that the lection has not lost any of its activity until six week of storage at -18 °C , but the agglutinating activity was decreased partly of seventh and eighth week of storage under the same condition, as it lost just 50% of the activity . It was found that the activity decline so quickly after the first week at 25 °C and after the second week when held at 4 'C.

استهدف البحث الحالي دراسة خواص لكتين جنين الحنطة (ملازن جنين الحنطة ) التقى حد التجانس كما تم التاكد منه بالترحيل الكهربائي وبينت النتائج وزنه الجزيئي يبلغ 17800 دالتون بطريقة الترحيل الكهربائي تحت الظروف الماسخة باستخدام SDS وبوجود المادة المختزلة 2 – ميركابتوايثاتول وبلغت نقطة تعاداه الكهربائي 8.7 بطريقة التبئير الكهربائي المتشابة مما يشسر انه بروتين قاعدي الشحنة تبين خلواللكتين المتقى من الكاربوهيدرات عند اجراء التقدير بطريقة الفينول – حامض الكبريتيك ويختلف اللكتين قيد الدراسة في هذه الخاصية عن اللكتينات الاخرى التي تتميز بكونها من البروتينات السكرية . تراوح الأس الهيدروحينى الأمثل لفلعالية اللكتين بين 6.5 – 7.0 ‏في حين لوحظ انعدام فعالية التلازن عند الأسس الهيدروجبينة الاوطأ من 5.5 واعلى من 8.5 على حد سواء. واحتفظ اللكتين بكامل فعاليته عند حضنه مدة 15 دقيقة فى درجات الحرارة 20 -60 م فيما احتفظ بمعدل 50% من فعالهته الأصلية عند حضنه بالمدة نفسها بدرجة الحرارة 70 ‏م وانخفضت الفعالية الي اوط مستوى لها عند 80 ‏م اذ فقد اللكتين 93.75 % ‏من فعالهته ولقد كامل فعالهته عند درجة الحرارة 90 ‏م. احتفظ اللكتين بفعالهتة كاملة عند الخزن بدرجة ´حرارة -18 م لغاية الأسبوع السادس من الحزن ثم تدهورت الفعالية قليلا فى الأسبوعين السابع والثامن إذ فقد اللكتين 50 %‏ ‏من فعاليته الأصلية بعد هذه المدة . فيما شهدت الفعالية التلازنية انخفاضا واضحا بعد الأسبوع الأول من الخزن بدرجة الحرارة25 ‏م وبعد الأسبوع الثانى من الفزن بدرجة الحرارة 4 م .

Keywords


Article
SIMPLE METHOD FOR PURIFICATION OF WHEAT GERM LECTIN BY AFFINITY CHROMATOGRAPHY
طريقة مبسطة لتنقية لكتين جنين الحنطة بكروموتوكرافيا الالفة

Loading...
Loading...
Abstract

Because of various application of purified lectin ,the aim of this study was to extract it from wheat germ which is one of the byproducts from wheat processing. The extraction steps including fat elimination from wheat germ by heptan fellowed by lectin extraction by 0.05 M hydrochloric acid solution in ratio (1: 10)(w/v) for one hour at 25C . The crud extract was subjected to different purification steps including concentration by ultrafiltration by this step it was possible to eliminate high portion of low molecular wight compounds which is below 10000 dalton. The difiltration was done to concentrated the sample by 0.01 M Tris-HCL, pH 8.5 .The purification folds and yeild of the lectin were 5.71 and 98.34% respectively. Ion-exchange chromatography by bachwise procedure using Diethel amino ethel cellulose (DEAE¬Cellulose) then affinity chromatography by chitin column, where the chitin itself was prepared from outer shells of shrimp ,we obtained about 40 g chitin which is equel to 20% chitin from the dry shells then the chitin was used as a matrix and a ligand in affinity chromatography for purification of the lectin after this step the purification fold was 20 and yeild of the lectin was 19.51 % . The lectin was purified to homogeneity as indicated by presence of one band in polyacrylamide gel electrophoresis under denaturing conditions in presence and absence of the reducing agent 2-mercaptoethanol .The amount of lectin is about 60mg /1000 gm of wheat germ when using the steps which indicated in this study .

‏نظرا للاستخدامات المتعددة للكتين النقي فقد هدفت هذه الدراسة إلى استخلاصه من جنين الحنطة , وهو أحد النواتج العرضية لتصنيع الطحين .،وشملت خطوات الاستخلاص إزالة الدهن من جنين الحنطة باستخدام الهبتان تلا ه استخلاص اللكتين بمحلول حامض الهيدروكلوريك بتركيز 0.05 ‏ مولار بنسبة (1 :10 ) (وزن/حجم) مدة ساعة واحدة بدرجة حرارة 25 ‏م. واخضع المستخلص الخام لخطوات تنقية عدة تمثلت بتركيزه بالترشيح الفائق لازالة نسبة كبيرة من المركبات ذات الاوزان الجزيئية التي تقل عن 10000 ‏ دالتون. وأجريت عملية غسل وترشيح متكررة Diafiltration للاطموذج المركز باستخدام محلول Tris-HCI‏ الدارئ بتركيز0.01 ‏مولار ذي الأس الهيدروجيني8.5 ‏وحققت هذه الخطوة تنقية جزئية للكتين بلغت 5.71 ‏مرة وبحصيلة مقدارها 98.34 % . تلتها خطوة كروماتوكرافيا التبادل الأيوني _باسلوب الوجبة باستخدام المبادل شنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE- Cellulose وبلغت عدد مرات التنقية لجزء الغسل 7.5 ‏مرة في حين بلغت حصيلة اللكتين 80 ‏% و أخيرا جرت خطوة تفتية اللكتين باستخدام كروماتوكرافيا الألفة بعمود الكايتين والذي حضر مختبريا من الهيكل الخارجي للروبيان وأسفرت عملية التحضير عن الحصول على ما يقارب من 40 ‏غم كايتين أي ما يعادل20 % ‏كايتين من وزن القشور الجافة واستخدم الكايتين المحضر بوصفه شبكة للفصل وذراعا في كروماتوكرافيا الألفة لتنقية اللكتين. وبلغت عدد مرات التنقية بعد هذه الخطوة 20 ‏ مرة وبحصيلة متدارها 19.51 ‏% ‏. وقد تبين ان اللكتين المنقى يتميز بنقاوة عالية حد التجانس وذلك بظهوره حزمة واحدة عند ترحيله كهربائيا في هلام متعدد الاكريلامايد بظروف ماسخة بوجود المادة المختزلة 2 -ميركابتوايثانول وغيابها. وباتباع الخطوات المذكورة في هذه الدراسة بلغت كمية اللكتين المحصل عليها 60 ‏ ملغم/ 1000 ‏غم من جنين الحنطة .

Keywords

Listing 1 - 3 of 3
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (3)


Language

Arabic (2)

English (1)


Year
From To Submit

2016 (1)

2008 (2)