Abstract | Keywords | Fulltext | Export | TOC

Characterization of the purified polygalacturonase which was produced by the local isolate (B36) of Bacillus megaterium was studied. The isolate was gave maximum enzymatic activity by using submerged cultures. The molecular weight of the enzyme was 65kdalton by using SDS-PAGE, the optimal pH of the enzyme activity was 7.0, and the enzyme activity was 1639.256 unit/ml, the optimal temperature of the enzyme activity was 50C, and the activity was 1619.673 unit/ml. The pH of polygalacturonase stability was between (6.5-7.5) but the thermo stability of the enzyme was between (0-50)ºC. The effect of some ions, chelating compounds and reducing agents onenzyme stability was also studied, Mn+2, Fe+3 and Ca+2 were increased the enzymatic activity to 115%, 105% and 110% respectively at the concentration 5mM, but Cu+2 inhibited the enzymatic activity to 10% at 1mM and the inhibition was increased to 50% at 5mM, while Mg+2 increased the enzymatic activity to 110% at 1mM, and 130% at 5mM. The urea and EDTA did not effect on activity at 1mM but inhibited the activity to 30% and 60% respectively at 5mM, also SDS inhibited the activity at 0.1%(wt/v). The kinetics constants of the enzyme were 3.125%for Km and 0.043 unit/ml for Vmax.The activation energy for the enzymatic reaction was 38.613 kcal/mole.

تـمت دراسـة صفات أنزيــم البولـي كالاكتيورونيــزالمنقى والمنتـج مـن العزلـة المحليـة ((B36 لبكتريــاBacillusmegaterium والتـــي انتخبت كأفضـل عزلة محلية لبكتريـــا Bacillusssp. لإنتاج الأنزيم إذ أعطت أعلى فعالية أنزيمية باستعمال المزارع المغمــورة.كان الوزن الجزيئي للإنزيم65 كيلودالتون باستعمال تقنية الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الأكريلامايد بوجود SDS ,أما الدالة الحامضية المثلى لفعالية أنزيم البولي كالاكتيورونيز فكانت 7.0إذ بلغت الفعالية الأنزيمية 1639.256 وحدة/مل, والدرجة الحرارية المثلى للفعالية كانت 50م وقد أعطت فعالية مقدارها 1619.673 وحدة/مل. أما ثباتية إنزيم البولي كالاكتيورونيز فكانت الدالة الحامضية المثلى لها(6.5 – 7.5) في حين الدرجة الحرارية المثلى لها تراوحت بين(0 – 50) م لمدة 30 دقيقة. كما درس تأثير بعض الايونات والمركبات الكلابية والمختزلة في ثباتية الأنزيم والتي شملت Mn2+وFe3+وCa2+ التي زادت من فعالية الأنزيم عند تركيز 5 ملي مولاري فبلغت115% و105% و110% على التوالي , بينما عملت أيوناتCu2على تثبيط فعالية الإنزيم بنسبة 10% عند تركيز 1 ملي مولاري وازداد التثبيط للإنزيم عنـد تركيز 5 ملـي مولاري وبنسبـة 50% إمـاMg2+فقـد زادت مـن الفعالية بنسبـة 110% عنـد تركيـز 1 ملي مولاري وازدادت الفعالية لتصل إلى 130% عند تركيز5ملي مولاري , ولم تظهر كل من اليوريا وEDTAتأثيراً في الفعالية الأنزيمية عند تركيز 1 ملي مولاري ولكنهما ثبطا الفعالية بنسبة 30% و60% على التوالي عند تركيز 5 ملي مولاري. وانتركيز 0.1% (وزن/حجم) من مادة SDS قد ثبط10% من الفعالية الأنزيمية. بلغت الثوابت الحركية للأنزيم 3.125%لقيمةKmفي حين بلغت السرعة القصوى Vmax0.043وحدة/ملي مولاري,وكانت قيمة طاقة التنشيط للتفاعل الأنزيمي هي 38.613 كيلو سعره/مول.

Bacillus megaterium --- polygalacturonase --- molecular weight and kinetic constants --- بكترياBacillus megaterium --- إنزيم البولي كالاكتيورونيز --- الوزن الجزيئي --- الصفات