research centers


Search results: Found 15

Listing 1 - 10 of 15 << page
of 2
>>
Sort by

Article
The Effect of some inducer agents in increase the production of Enterocin U36 produced byEnterococcus faecalis U36 that isolated from Urinary Tract Infection
تاثير بعض المحثات في زيادة انتاجية الانتروسين U36 المنتج مـن بكترياfaecalis U36 Enterococcusالمعزولة محليا من التهابات السبيل البولي

Authors: Hausain Khanika حسين خانقاه --- Ghazi M. Aziz غازي منعم عزيز --- Nuha J. Kandela نهى جوزيف قندلا
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2010 Volume: 7 Issue: عدد خاص بمؤتمر العلمي النسوي 1 Pages: 290-299
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Enterocin U36 (ENT U36), is a bacteriocin produced by Enterococcus faecalis U36 , strain isolated from urine samples have collected from patients suffering from urinary tract infections . The Bacteriocin is an antimicrobial proteins or peptides that inhibit growth of bacteria closely related to the producing organism. The results has been shown that ENT U36 active against Enterococcus faecalis S10 Lactococcus lactis ,Lactobacillus fermentum and few other gram positive pathogens bacteria including Listeria monocytogenes, Staphylococcus auraus ,Bacillus subtilis and Streptococcus spp. The optimum conditions for enterocin production from selective local isolates EFU36 were determined by using the cultural submerged and the results showed that the optimum media for production of enterocin contained carbon sources , nitrogen source and some mineral salts with an inoculum size of 2% which contains 1x109 cell/ml. at an optimum pH 6 in optimum degree(35-37) in shaker incubator 120 cycle/ min reached to the specific activity of 91x103 unit/mg.The effect of some inducers of production like chloramphenicol, folic acid, vitamin B12 and mitomycin-c was studied. The results showed that 1.5% of mitomycin gave specific activity of about 103x103 unit/mg when added to the optimum media after 3 hours from optimum production period.

الانتروسين U36 ( (ENT U36, هو بكتريوسين منتج من بكترياfaecalis U36 Enterococcus المعزولة محليا من عينات ادرار اخذت من مرضى يعانون من التهابات السبيل البولي ، ذي فعالية مثبطة لعدد من الانواع البكتيرية القريبة الصلة التي تعود للبكتريا المنتجة لحامض اللاكتيك Lactic acid bacteria والتي شملت E. faecalis S10. و Lactococcus lactis و L. fermentum، بالاضافة الى فعاليته التثبيطية ضد بعض الممرضات البكتيرية والتي تضمنت الانواع الاتية Listeria mono cytogenesو Staphylococcus auraus وStreptococcus spp. و Escherchia coli والعصيات المكونة للسبورات s Bacillus subtili. حددت الظروف المثلى لانتاج الانتروسين من العزلة المحلية EFU36 باستخدام المزارع المغمورة اذ اظهرت النتائج ان وسط الانتاجية الامثل للانتروسين اشتمل على مصادر كاربونية ومصادر نايتروجينية وبعض الاملاح ولقح الوسط بحجم نهائي 2% من لقاح بعدد خلايا حية 1X910 خلية / مليلتر و رقم هيدروجيني امثل 6 عند درجة حرارة مثلى (35 – 37) ْم بسرعة 120 دورة / دقيقة اذ بلغت الفعالية النوعية 310 x 91 وحدة/ مليغرام بروتين. ودرس تاثير عدد من المحفزات للانتاجية مثل Chloramphenicol و B12 Vitamin وFolic Acid و Mitomycin-C في الوسط الامثل للانتاجية للعزلة المنتخبة وقد لوحظ ان استخدام 1.5% من المايتومايسين –C قد اعطى اعلى فعالية نوعية عندما بلغت X 103 310 وحدة / مليغرام بروتين عند اضافته بعد 3 ساعات من المدة المثلى للانتاج.


Article
Determination of the optimum conditions for Gelatinase production from local isolate Enterococcus faecalis B91
تحديـد الظروف المثلى لانتـاج انزيـم الجيلاتينيـز مـن العزلـة المحليـة لبكتريـا B91 Enterococcus faecalis

Authors: Ghazi M. Aziz غازي منعم عزيز --- Sahar I. Hussien سحر ارحيم حسين
Journal: Jornal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية ISSN: 18151140 Year: 2011 Volume: 5 Issue: 2 Pages: 75-84
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

A total of 70 isolates belonged to Enterococcus faecalis collected from different clinical sources : (29 urine sample, 22 stool sample, 9 blood sample, 1 vagina sample, 2 sputum sample, 1 pleural fluid sample, 1 peritoneal fluid sample and 5 wounds sample). Seven isolates were able to produce gelatinase since they were able to liquefied the gelatin medium and clear zone were observed around the bacterial growth after floating the plate with freizer's reagent. Enterococcus faecalis B91 was higher producer of gelatinase in submerged culture by using Yeast extract gelatin Medium. Optimization study revealed that fructose was the best carbon source at 2.5% and 1% gelatin as inducible source to production the enzyme and inoculum size 1x109 cfu/ml at initial pH7, incubated for 24 hours at 40°C by using shaking incubator at 150 rpm.

تم الحصول على 70عزلة محلية تعود لبكتريا المكورات المعوية البرازية Enterococcus faecalis المعزولة من مصادر سريرية مختلفة شملتها الدراسة وعلى النحو الاتي : 29 عزلة من عينات الادرار ، 22 عزلة من عينات البراز ، 9 عزلات من عينات الدم ، عزلة واحدة من المهبل ، عزلتان من مسحات القشع ، عزلة واحدة من سائل الجنب ، عزلة من سائل الخلب ، 5 عزلات من مسحات الجروح . تميزت 7 عزلات بقابليتها على انتاج الانزيم ، وذلك بقدرتها على اسالة وسط الجيلاتين شبه الصلب وتحويله الى الحالة السائلة ، وتكوينها هالة شفافة حول المستعمرة البكتيرية بعد تغطية الطبق بكاشف فرازير ، ثم انتخبت العزلة المحلية B91 Enterococcus faecalis كونها الاغزر انتاجا للانزيم بفعالية نوعية 18 وحدة / ملغم بروتين باستعمال الوسط الغذائي السائل Yeast extract gelatin . حددت الظروف المثلى لانتاج الانزيم من العزلة B91 ، وكان الفركتوز هو الافضل بوصفه مصدرا كاربونيا بتركيز2.5 % ، والجيلاتين عاملا محفزا لانتاج الانزيم بتركيـز 1% ، وبعدد خلايـا لقاح 1×910 cfu/ml عند رقم هيدروجيني ابتدائي مقداره 7 ، ثم الحضن لمدة 24 ساعة بدرجة حرارة 40 م بالحاضنة الهزازة بسرعة 150 دورة / دقيقة .

Keywords


Article
Purification and characterization of amylase from local isolate Pseudomonas sp.SPH4
تنقية وتوصيف انزيم الاميليز من العزلة المحلية لبكتيريا الـPseudomonas sp. SPH4

Authors: Hala M. Ali هالة مشعل علي --- Ghazi M. Aziz غازي منعم عزيز
Journal: Jornal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية ISSN: 18151140 Year: 2012 Volume: 6 Issue: 1 Pages: 69-79
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

The amylase produced from local isolate Pseudomonas sp. SPH4 was purified by precipitation with 30% saturation ammonium sulphate, followed by ion-exchange chromotography using DEAE-cellulose column, and Gel filtration using Sephacryl S-300 column.The two iso-enzymes (a, b) were purified to (2.83, 3.47) times in the last step with an enzymes yields of (32.36, 76.34)% respectively. Enzyme characterization of the two iso-enzymes indicated that the optimum pH for the two iso-enzymes a and b were (7, 7.5) respectively, while the optimum pH for the iso-enzymes stability were (6.5, 7) respectively. The maximum activity for iso-enzymes (a, b) appeared at 45ºC and stable for 15 min at 30-50ºC and lost approximately 50% of it's activity at rang above 75ºC. Enzyme characterization results showed that the chlorides of silver and mercury had inhibitory effect on enzyme activity, the remaining enzyme activity for the iso-enzymes (a, b) were (46.66, 36.36)% for silver ions and (41.33, 33.63)% for mercury ions at 5 mM respectively, and (28, 28.18)% for silver ions and (25.33, 19.09)% for mercury ions at 10 mM respectively. The iso-enzymes a and b were affected by chelating agent ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) at concentration 2mM the remaining activity (45.33, 43.63)% respectively, and 5mM the remaining activity (28, 28.18)% respectivily, and these iso-enzymes (a, b) refered to metalloenzymes. The iso-enzymes (a, b) were kept their activity when treated by reducing agent (2-mercaptoethanol) at 2 mM the remaining activity (92, 92.72)% respectively, and 5 mM the remaining activity (85.3, 89.09)% respectivily. The iso-enzymes (a, b) were kept their activity when treated by phenyl methyl sulphonyl fluoride (PMSF) at concentration 1mM the remaining activity (93.33, 90.90)% respectivily,and 5 mM the remaining activity (90.66, 87.27)% respectivily, and these indicated that these iso-enzymes didnot referred to serineamylases group.

نقي انزيم الاميليز من العزلة المحلية لبكتيريا الـPseudomonas sp.SPH4 بخطوات عدة تضمنت الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة اشباع 30% وتقنية كروموتوغرافيا التبادل الايوني و الترشيح الهلامي . لوحظ ظهور متناظرين للانزيم (a،b) عند خطوة التبادل الايوني باستعمال المبادل الايوني DEAE-cellulose والترشيح الهلامي بواسطة هلام Sephacryl S-300 و قد بلغ عدد مرات التنقية للمتناظرين 2.83(2.83 ،3.47 ) بحصيلة انزيمية مقدارها( 32.36 ، 76.34)% على التوالي . بينت نتائج التوصيف للمتناظرين a) ، b) ان الارقام الهيدروجينية المثلى لفعالية المتناظرين (a ، b) ضمن 7 ،7.5 على التوالي ، وتراوح الرقم الهيدروجيني الامثل لثبات المتناظرين 6.5 ، 7 على التوالي . وظهرت اعلى فعالية للمتناظرين عند درجة 45 م . واحتفظ المتناظران بكامل فعاليتهما عند حضنهما مدة 15 دقيقة في درجة حرارة (30-50)م بينما فقدا 50% من فعاليتهما عند حضنهما بدرجة حرارة اعلى من 75م . اوضحت نتائج تاثير بعض المركبات في فعالية الانزيم ان لكل من كلوريد الزئبق والفضة تاثيرا تثبيطيا واضحا في فعالية المتناظرين و لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (46.66 ، 36.36)% بالنسبة لايونات الفضة و(41.33 ، 33.63)% بالنسبة لايونات الزئبق عند التركيز 5 ملي مولر، على التوالي ولم تتجاوزالفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (28 ، 28.18)% بالنسبة لايونات الفضة و(25.33 ، 19.09)% بالنسبة لايونات الزئبق عند التركيز 10 ملي مولر، على التوالي . وتاثيرا مثبطا للمادة الكلابية الـ (EDTA) Ethylene Diamine Tetra Acetic acid عند معاملةالمتناظرين بـ 2 ملي مولر من المادة الكلابية اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (45.33 ،34.63)% على التوالي ، و5 ملي مولر من المادة الكلابية اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (28 ، 28.18)% على التوالي مما يدل ان الانزيم من الانزيمات المعدنية (Metalloenzymes) . فضلا عن ذلك فقد احتفظ المتناظرين (a،(b بفعاليتهما تقريبا عند معاملتهما بـ 2 ملي مولرمن المركبتوايثانول 2-mercaptoethanol اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (92 ، 92.72)% على التوالي ، و 5 ملي مولرمن المركبتوايثانولmercaptoethanol 2-اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (85.3 ، 89.09)% على التوالي . واحتفظ المتناظرين a) ، (bبفعاليتها تقريبا عند معاملتهما بـ 1 ملي مولر من المركب (PMSF) phenyl methyl sulphonyl flouride اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (93.33 ، 90.90)% على التوالي ، و5 ملي مولر من المركب (PMSF) phenyl methyl sulphonyl flouride اذ لم تتجاوز الفعالية الانزيمية المتبقية لهما عن (90.66 ، 87.27)% على التوالي مما يؤكد عدم انتماء المتناظرين الى مجموعة الاميليزات السيرينية .

Keywords

Ghazi M. Aziz


Article
Study the Effect of Enterocin produced by Enterococcus faecalisU36 Against Some Food Borne Pathogenic Bacteria
تاثير الانتروسين U36 المنتج مـن بكترياfaecalis U36Enterococcus ضد بعض الممرضات البكتيرية المسببة لتلوث الاغذية

Loading...
Loading...
Abstract

Enterocin U36 (ENT U36), is a bacteriocin produced by Enterococcus faecalisU36, strain isolated from urine samples have collected from patients suffering from urinary tract infections. The Bacteriocin is an antimicrobial proteins or peptides that inhibit growth of bacteria closely related to the producing organism. The results has been shown that ENT U36 active against Enterococcus faecalis S10 Lactococcuslactis,Lactobacillusfermentumand few other food borne gram positive pathogens bacteria including Listeria monocytogenes, Staphylococcus auraus,Bacillussubtilis and Streptococcusspp . The inhibitory type and mode of action of purified ENT U36 were tested against some isolates test bacteria which includedL.monocytogenes and E.coli It was observed that purified ENT U36 have bacteriostatic effect when the numbers of inhibited test bacteria increased in parallel with the increased activity of ENT U36 (unit/ml) . The treatment period also has its effect on reducing the numbers of test bacteria. The results showed that 400 unit/ml was enough to kill L.monocytogenes viable count of in 3.1 x105 cell/ml in 2 hours when treated with ENT U36, and E.coli in 3.7x105 cell/ml in 24 hour'. And when lytic activity of purified ENT U36 studied, it was observed that its mode of action was on cell membrane and did not show any lytic activity on the isolated cell walls of test bacteria or any lytic activity on DNA. This beneficial trait has led to utilization of purified enterocinas as food additives.

الانتروسين U36 ( (ENT U36, هو بكتريوسين منتج من بكترياU36faecalisEnterococcusالمعزولة محليا من عينات ادراراخذت من مرضى يعانون من التهابات السبيل البولي ، ذي فعالية مثبطة لعدد من الانواع البكتيرية القريبة الصلة التي تعود للبكتريا المنتجة لحامض اللاكتيك Lactic acid bacteria والتي شملت E. faecalis S10. و Lactococcuslactis و L. fermentum، بالاضافة الى فعاليته التثبيطية ضد بعض الممرضات البكتيرية الملوثة الاغذية والتي تضمنت الانواع الاتية Listeria mono cytogenesو Staphylococcus auraus وStreptococcusspp. و Escherchia coli والعصياتالمكونة للسبورات Bacillus subtilis والتي غالبا ما تلوث عمليات انتاج الغذاء. درس النمط التثبيطي والية عمل الانتروسين المنقى تجاه بعض العزلات من بكتريا الاختبارL.monocytogenesوS.aureus. وقد اظهرت النتائج ان الانتروسين ENT U36 ذي تاثير مثبط من خلال خفض العدد الحي لبكتريـا الاختبار L. monocytogenes وS.aurausمن لوغارتم7.9) ،77. )الى لوغارتم ( 2،3) على التوالي بعد مرور 24 ساعة من المعاملة بالانتروسين بفعالية مثلى للتحلل 400وحدة / مليلتر، كما لوحظ وجود تاثير واضح لتركيز الانتروسين (ENTU36) U36ومدة المعاملة تجاه كل من بكتريا الاختبارL.monocytogenes و S.auraus ، حيث امتلك ENTU36بفعالية 400 وحدة/ مليلترتاثيرا قاتلا بعد ساعتين من المعاملة تجاه بكتريا الاختبارL.monocytogenes بعدد3.1x510 خلية / مليلتر ، كذلك ابدى تاثير مثبطا تجاه بكتريا S.aurausبعدد3.8 x510خلية/ مليلتر بعد 24 ساعة من المعاملة بالفعالية اعلاه . وعند دراسة الفعالية الحالة للانتروسينلوحظ ان الية عمله كانت على الغشاء الخلوي فقطولم يظهر اي فعالية تحللية تجاه الجدار الخلوي المستخلص من خلايا بكتريا الاختبار اعلاه او فعالية حالة للدناDNA)) . لذلك يمكن اعتبار الانتروسين قيد الدراسة مادة حافظة للاغذية في المستقبل يمنع نمو الممرضات البكتيرية الملوثة للاغذية مما يزيد من إمكانية إطالة فترة حفظ الأغذية التي تضاف إليها .

Keywords


Article
Purification and Properties of -Galactosidase From A Thermophilic Fungus Rhizmmucor Pusillus IB8.
تنقية وتوصيف انزيم بيتا – كالاكتوسيديز المنتج من عزلة محلية من العفن الآلف للحرارة العالية Rhizomucor pusillus IB8

Authors: Mohammed Omer محمد عمر --- Ghazi M Aziz غازي منعم عزيز --- Khalid Jaber Alzwany خالد جابر الزويني
Journal: Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم ISSN: 00672904/23121637 Year: 2013 Volume: 54 Issue: 2 Pages: 307-315
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

An extracellular -galactosidase from the thermophilic fungus Rhizomucor Pusillus IB8 has been purified via several steps included precipitation by ammonium sulphate at 80 % saturation, DEAE- Cellulose Ion exchange chromatography and gel filteration on sepharose CL-6B column. The Final purification folds and the yield of the enzyme were 42.5 and 24.8 % respectively. The purified -galactosidase has an optimum pH for its activity between 4.5 to 5, while the optimum pH for enzyme stability was between 5 to 5.5. Futhermore, it was found that the optimum temperature for its activity was 60 C°. The purified enzyme retained approximatly 98% of its original activity when incubated at 60 C° for 60 min. However, 25 % of its activity was lost when incubated for 120 min at the same tmperaure. Activation energy for conversion of the substrate ONPG to products was 6.15 Kcal / mol, whereas, for enzyme denaturation it was 99.3 Kcal / mol. The molecular weight of the purified enzyme was 232000 dalton as determined by gel filtration on sepharose CL-6B. Kinetic studies showed that the Michaelis constant (Km) and maximum velocity (Vmax) values for the purified enzyme using ONPG as a substrate were 0.46 mM and 223 μM /min respectively.

نقي أنزيم بيتا-كالاكتوسيديز الخارج خلوي والمنتج من العزلة المحلية للعفن Rhizomucor pusillus IB8 بعدة خطوات اشتملت على الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة إشباع 80 % وكروماتوغرافيا التبادل الايوني بعمود DEAE-Cellulose ، ومن ثم الترشيح الهلامي في عمود Sepharose CL– 6B وبلغ عدد مرات التنقية 42.2 مرة بحصيلة مقدارها 24.8 %. بينت نتائج توصيف الانزيم ان الرقم الهيدروجيني الأمثل لفعالية الأنزيم تراوح بين 5 -4.5 في حين كان الرقم الهيدروجيني الامثل لثبات الانزيم بين 5– 5.5 ، ان درجة الحرارة المثلى لفعالية الانزيم هي 60 م. وتبين ان الانزيم ذو ثبات حراري عال إلى حد ما اذ احتفظ الأنزيم بحوالي 98 % من فعاليته عند حضنة مدة 60 دقيقة في درجة حرارة 60 م في حين فقد حوالي 25 % عند حضنه مدة 120 دقيقة في درجة الحرارة نفسها . بلغت قيمة طاقة التنشيط لتحويل المادة الأساس ONPG إلى ناتج 6.15 كيلو سعرة/مول بينما بلغت قيمة طاقة التنشيط لمسخ الأنزيم99.3 كيلو سعرة / مول . وبلغ الوزن الجزيئي للأنزيم 232000 دالتون عند تقديرة بطريقة الترشيح الهلامي وكانت معدلات قيم ثابت ميكالس Km والسرعة القصوى Vmax للأنزيم هي 0.46 ملي مولار و 223 مايكرومولار/دقيقة على الترتيب باستخدام ONPG بوصفها مادة أساس .

Keywords


Article
Extraction conditions of polyphenol oxidase from banana peel
ظروف استخلاص انزيم بولي فينول اوكسيديز من قشور الموز

Authors: Ghazi M. Aziz غازي منعم عزيز --- Ali J. R. AL-Sa'ady علي جبار رشك الساعدي
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2016 Volume: 13 Issue: 3 Pages: 469-474
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Polyphenol oxidase (PPO) is an enzyme containing copper, presents in various fruits and vegetables. It is responsible for the browning reactions when the cells are damaged during handling. The best conditions for extraction of polyphenol oxidase from banana peel was by using an extraction buffer containing phosphate buffer (0.05 M, pH 7), 0.01 M ascorbic acid and 0.5% polyethylene glycol, with extraction ratio 1:4 (w:v) for one minute by using blender. The enzyme activity was measured spectrophotometrically at 425 nm. PPO was studied to prevent the browning of banana peel which results in the loss of their marketability. The aim of this study was to determine the optimum conditions for polyphenol oxidase extraction from banana peel.

بولي فينول اوكسيديز من الانزيمات المحتوية على النحاس والتي توجد في مختلف الفواكه والخضروات. هذه الانزيمات تكون مسؤولة عن ظهور اللون البني عندما تتعرض الخلايا الى الجروح خلال المحمل (النقل). تحديد الظروف المثلى لاستخلاص انزيم البولي فينول اوكسيديز من قشور الموز باستعمال دارئ الاستخلاص المتكون من دارئ فوسفات البوتاسيوم بتركيز 0,05 مولر ورقم هيدروجيني 7,0,وحامض الاسكوربيك اسد بتركيز 0,01 مولر و 0,5% بولي اثلين كلايكول وبنسبة استخلاص 1:4 ( لحجم: وزن) لمدة دقيقة واحدة في الخلاط الكهربائي .تم قياس الفعالية الانزيمية باستعمال جهاز المطياف الضوئي وعلى الطول الموجي 425 نانوميتر. وقد دٌرس انزيم البولي فينول اوكسيديز المستخلص من قشور الموز لتحديد كيفية منع ظهور اللون البني مما يؤدي إلى فقدان تسويقها. الهدف من هذه الدراسة هو تحديد الظروف المثلى لاستخلاص انزيم البولي فينول اوكسيديز من قشر الموز.


Article
Improvement of thermostable productivity α-amylase from local isolate Bacillus licheniformis H14.
تحسين انتاجية انزيم الفا –اميليز( (α-amylaseالثابت حراريا˝ من العزلة المحلية .Bacillus licheniformis H14

Authors: Subhi J. Hamza صبحي جواد حمزة --- Ghazi M . Aziz غازي منعم عزيز --- Hala M . Ali هالة مشعل علي
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2010 Volume: 7 Issue: عدد خاص بمؤتمر العلمي النسوي 1 Pages: 349-356
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

(28)Bacterial local isolates of Bacillus sp. were obtained from soil samples. Isolates were tested for thermostable alpha- amylase production on solid media; fifteen isolates were able to develop clear zone around the bacterial growth after floating the plates with iodine reagent (Lugol's solution). There were further tested in submerged culture which led to selection of Bacillus sp. H14since it was the most efficient .Microbial and biochemical tests showed that the local isolate Bacillus sp.H14was refered to the species B.licheniformis that signed as H14 was refered to the species B.licheniformis H14 .,To get ahigher yield of alpha – amylase(48.70unit/mg protein) production from the local isolate B.licheniformis H14 . This study used different mutation ways such as physical way by using the physical mutagen (ultraviolet light) and chemical way by using the chemical mutagen (nitrosoguanidine). Physical mutation results showed that the local isolate B.licheniformis HM14 get higher yield of alpha – amylase production(102.10 unit/mg protein) according to killing percentage (90%) while the chemical mutation results showed that the local isolate B.licheniformis HM4 get higher yield of alpha –amylase production(100.94 unit/mg protein) from the two mutant local isolates (HM14 and HM4)were the best carbon source starch (1.5%), peptone (1.5%) as nitrogen source, calcium chloride (0.02%), sodium chloride (0.05%), magnicium phosphate (0.05%), sodium di –hydrogen phosphate (0.16%), at initial pH (5) and inoculum size 1*108 cfu/ml at (50C) For (72) hours, using shaking incubator at (150) rpm.

تم الحصول على(28) عزلة من البكتريا العائدة الى جنس الـBacillusالمعزولة من التربة,واختبرت قابليتها على انتاج انزيم الفا –اميليزالثابت حراريا باستخدام الوسط الانتاجي الصلب ، وتميزت (15) عزله بقابليتها المختلفة على انتاج الانزيم وذلك بتكوينها هالة شفافة حول المستعمرة البكتيرية بعد تغطية الطبق بمحلول اليود (كاشف لوكال ), ثم انتخبت العزلة المحليةBacillus sp.H14 كونها الاغزر انتاجا للانزيم بفعاليه نوعيه (48.70وحدة /ملغم بروتين) باستخدام المزارع المغمورة واظهرت فحوص التشخيص ان العزلة Bacillussp.H14 تعود الى البكتريا B.licheniformisورمزت لها B.licheniformis H14 .تم تحسين انتاجية الانزيم من العزلة المحلية B.licheniformis H14 باستخدام الطريقة الفيزيائية باستخدام المطفر الفيزيائي (الاشعة فوق البنفسجية (Ultraviolet light والطريقة الكيميائية باستخدام المطفر الكيميائي (النايتروزوكوانيدين (Nitrosoguanidine.اظهرت نتائج التطفير الفيزيائي بالاشعة فوق البنفسجية واعتماد نسبه القتل 90% تميز العزلة المحلية الطافرة B.licheniformis HM14 بانتاجها العالي للالفا- اميليز بفعالية نوعية (102.10وحدة /ملغم بروتين )كذلك اظهرت نتائج التطفير الكيميائي بالنايتروزوكوانيدين واعتماد نسبة القتل 90% تميز العزلة المحلية الطافرة B.licheniformis HM4 بانتاجها العالي للالفا –اميليزبفعالية نوعية (100.94وحدة /ملغم بروتين ) . حددت الظروف المثلى لانتاج الانزيم بطريقة المزارع المغمورة لكلا العزلتين الطافرتين B.licheniformis HM14و4 B.licheniformis HMبإستخدام النشأ مصدراً كاربونياً 1.5% ، و الببتون مصدرًا نايتروجينياً بتركيز1.5 % ، و كلوريد الكالسيوم 0.02% ، و كلوريد الصوديوم 0.05% ، و فوسفات المغنيسوم 0.05% و فوسفات الصوديوم ثنائية الهيدروجين 0.16% على التوالي ، و لقح الوسط الانتاجي بعدد خلايا 1×108 خلية / مليليتر عند رقم هيدروجيني ابتدائي مقداره 5 بعد 72 ساعة من الحضن بدرجة حرارة 50م بالحاضنة الهزازة بسرعة 150 دورة/دقيقة.


Article
Extraction and purification of bovine pancreatic Deoxyribonuclease I
استخلاص و تنقية الانزيم Deoxyribonuclease I من البنكرياس البقري

Loading...
Loading...
Abstract

Samples of bovine pancreatic and calf thymus glands were collected from local slaughterers to extract deoxyribonuclease I enzyme (DNase I) and DNA respectively. Crude extract was prepared by using cooled distilled water and 0.25 N sulfuric acid .This study show that the best condition for the crude extract activity was 17 U/ml and 1 hr. Incubated period reaction with its substrate.The bovine pancreatic DNase I was purified by several steps of precipitation using ammonium sulphate to 529.4 times, with an enzymes yield 6.35%. Enzyme characterization studies indicate that: it is active at 2.7 U/ml, and 50 µg /ml DNA after 30 min of reaction time, the enzyme activity was higher at pH 6.5 and it showed stability at pH 9. The maximum enzyme activity was reported at 50 °C The results obtained from the role of metal ions (Mg+2, Mn+2) on enzyme activity indicate that these ions stimulated the enzyme activity while the Ca+2 and Cu+2 had lower stimulating activity on the enzyme but Ag+1 and Hg+2 showed inhibitory effect on enzyme activity. In addition the enzyme activity was inhibited by using denaturing Sodium dodecyl sulphate (SDS), chelating agents Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA), and reducing agents (2-Merceptoethanol and Urea) , and maintained it's activity when incubated with Phenyl Methyl Sulphonyl Floride (PMSF) .

جُمِعَت عينات من البنكرياس البقري والغدة الزعترية للعجول من المجازر المحلية لاستخلاص الانزيمDeoxyribonuclease I (DNaseI ) والمادة الاساس(DNA) على التوالي . وقد تم الحصول على المستخلص الانزيمي الخام باستخدام الماء المقطر المثلج و0.25 عياري من حامض الكبريتيك برقم هيدروجيني 3 ولمدة 18 ساعة بدرجة حرارة 5 م بفعالية انزيمية 8500 وحدة/مللتر . حُدِدَت بعض العوامل المؤثرة في فعالية الانزيم الخام التي تضمنت استعمال 17 وحدة/مللتر من الانزيم و ساعة واحدة مدة تفاعل للانزيم مع مادته الاساس . نُقيَ الانزيم باستخدام خطوات متتالية من الترسيب باستعمال كبريتات الامونيوم والتي اعطت عدد مرات تنقية مقدارها 529.4 بحصيلة انزيمية 6.35 %. اتصف الانزيم المنقى جزئيا بكونه فعالاً عند تركيز 2.7وحدة / مللتر و50 مايكروغرام / مللترمن DNA الغدة الزعترية بعد 30 دقيقة من زمن التفاعل وامتلك الانزيم ثباتاًعند رقم هيدروجيني 9 وكان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعاليته 6.5 كما وأظهَرالانزيم اعلى فعالية عند درجة حرارة 50 م . وكان لايونات المغنيسيوم والمنغنيز المضافة الى مزيج التفاعل تأثيراً تحفيزياً كبيراً في الفعالية الانزيمية مع امتلاك الكالسيوم والنحاسيك أثراً تحفيزياً قليلاً، بينما كان لايونات الزئبقيك والفضة تأثيراً تثبيطياً واضحاً في فعالية الانزيم . ثبطت فعالية الانزيم بوجود بعض العوامل المدنترة للبروتين والتي منها (SDS) Sodium dodecyl sulphate والعامل الكلاَّبي Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) وبصورة شـبه كاملة عنـد معاملـته ببعـض العوامل المخـتزلة مثـل 2- مركبتوايثانول واليوريا مع احتفاظ الانزيم بفعاليته عند وجود مادةPhenyl methyl sulphonyl floride (PMSF) .

Keywords


Article
Purification and Characterization of Nitrate Reductase (NAR) from Pseudomonas sp. SH7 Isolate
تنقية وتوصيف انزيمNitrate Reductase (NAR) المنتج من بكتيرياPseudomonas sp. العزلة SH7

Loading...
Loading...
Abstract

Sixty five soil samples and fifteen water samples were collected from different places in which previously explosions were occurred in Iraq. Seven isolates showed ability to utilize 0.1mM trinitrotoluene (TNT) and/or 0.2mM glycerol trinitrate (GTN) as a sole carbon and nitrogen source and one of these isolates showed the highest nitrate reduction which was classified and coded as Pseudomonas sp. SH7. The highest nitrate reductase activity extracted by sonication while optimum conditions for enzyme production in minimal media pH 7 containing 0.25mM GTN at 35oC for 3 days under aerobic condition. Nitrate reductase was purified by 40-60% ammonium sulphate, ion exchange and gel filtration. Nitrate reductase molecular weight determined by SDS-PAGE was 115 kD. The characterization of purified enzyme activity and stability was higher at a pH between 6.5-7.5 and. Maximum activity was at 35oC and stable at 30-40oC for 15 min., while for heat sensitivity 100% activity observed at 45oC for 20 min. Treatment with 200 µM azide and 500 µM cyanide inhibited the activity by 76 and 91% respectively.

جمعت خمسه وستون عينة تربه وخمسة عشر عينة من الماء من مختلف المناطق التي تعرضت للانفجارات في العراق . لقد تميزت سبع عزلات بأعطائها نسبه اختزال عالية mM 0.1 من (TNT) و mM 0.2 من (GTN) كمصدر كاربوني ونتروجيني وحيدين . وبعد عدة خطوات من الغربله الاوليه انتخبت العزله SH7 كونها العزله الاعلى اختزالا للنترات مقارنة مع بقيه العزلات هي من نوع Pseudomonas. ان اعلى فعاليه لانزيمNAR تم الحصول عليها عند معامله الخلايا بالامواج فوق الصوتية . بينما الظروف المثلى للانتاج كانت بتنمية الخلايا في الوسط الادنى المحتوي على 0.25 mM من (GTN) عند رقم هيدروجيني 7.0 وحضن بدرجة حرارة35 م لمدة ثلاثة ايام تحت ظروف هوائية . تضمنت خطوات تنقية ألــNAR الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة اشباع 60-40% والتبادل الايوني والترشيح الهلامي . كما ان الوزن الجزيئي للانزيم 115 كيلو دالتون عند تعينه بأجراء الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد بوجود المادة الماسخة للبروتين SDS . واظهرت النتائج ان اعلى فعالية وثبات للانزيم كانت من الرقم الهيدروجيني 7.5-6.5. ولوحظ ان اقصى فعالية للانزيم كانت عند درجة حرارة35 م واحتفظ الانزيم بفعاليته عند حضن لمدة 15 دقيقة بدرجات حرارة40 – 30) )م . كما احتفظ الانزيم بكامل فعاليته عند حضن لمدة 20 دقيقة بدرجة حرارة45 oم. وقد وجد ان فعالية الانزيم قد ثبطت عند معاملته بــ200 µM من الازايد وµM 500 من السيانيد الى انخفاض في الفعالية بلغ 76)، (91% ، على التوالي .


Article
Optimum conditions for Inulinase production by Aspergillus niger using solid state fermentation
تحديد الظروف المثلى لأنتاج أنزيم الأنيولينيز من فطر Aspergillus niger بوساطة تخمرات الحالة الصلبة

Authors: Zainab W. Abdulameer زينب وليد عبد الأمير --- Bahaa N. Essa بهاء نظام عيسى --- Ghazi M. Aziz غازي منعم عزيز
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2015 Volume: 12 Issue: 2 Pages: 307-316
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Thirty local fungal isolates according to Aspergillus niger were screened for Inulinase production on synthetic solid medium depending on inulin hydrolysis appear as clear zone around fungal colony. Semi-quantitative screening was performed to select the most efficient isolate for inulinase production. the most efficient isolate was AN20. The optimum condition for enzyme production from A. niger isolate was determined by busing a medium composed of sugar cane moisten with corn steep liquor 5;5 (v/w) at initial pH 5.0 for 96 hours at 30 0C . Enzyme productivity was tested for each of the yeast Kluyveromyces marxianus, the fungus A. niger AN20 and for a mixed culture of A. niger and K. marxianus. The productivity of A. niger gave the highest specific activity of 153 U/mg, as compared with K. marxianus which gave 86 U/mg.

غربلت قابلية ثلاثون عزلة محلية من الفطر Aspergillus niger على انتاج انزيم الأنيولينيز بأستعمال الوسط التركيبي الصلب اعتمادا على تحلل الأنيولين وظهور المناطق الشفافة حول المستعمرات الفطرية قيد الدراسة. نشطت جميع العزلات بأستمرار كل اسبوعين وحفظت في 30 5م، غربلت هذه العزلات بطريقة شبه كمية لأختبار العزلة الأكثر كفاءة في انتاج أنزيم الأنيولينيز، أختبرت العزلة الأكثر أنتاجية للأنزيم وأعطيت الرمزA. niger AN20. حددت الظروف المثلى لأنتاج الأنزيم من العزلة A. niger AN20 بأستعمال الوسط الغذائي المتكون من قصب السكر المرطب بمستخلص نقيع الذرة بنسبة 5:5 (V/W) برقم هيدروجيني 5 عند درجة 30 5م لمدة 96 ساعة. أختبرت انتاجية الأنزيم لكل من الخميرة Kluyveromyces marxianus والعفنA. niger AN20 والمزارع المختلطة من الخميرة والعفن، فوجد تفوق العزلة A. niger AN20 في انتاج الأنزيم بفعالية نوعية مقدارها 153 وحدة/ملغم بروتين مقارنة مع استعمال الخميرة حيث أعطت 86 وحدة/ملغم بروتين.

Listing 1 - 10 of 15 << page
of 2
>>
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (15)


Language

Arabic (7)

English (6)

Arabic and English (2)


Year
From To Submit

2019 (2)

2016 (3)

2015 (1)

2013 (1)

2012 (1)

More...