research centers


Search results: Found 3

Listing 1 - 3 of 3
Sort by

Article
EXTRACTION AND PURIFICATION OF TWO OUTER MEMBRANE PROTEINS (PORINS) FROM KLEBSIELLA PNEUMONIAE LOCAL ISOLATE
استخلاص وتنقية بروتينات الغشاء الخارجي من عزله محليه لبكتريا الـ Klebsiella pneumoniae

Loading...
Loading...
Abstract

Background: The porins are present in large amounts in the outer membrane of gram negative bacteria and form water-filled channels that permit the diffusion of small hydrophilic solutes across the outer membrane. Porins are generally divided into two classes: nonspecific porins (e.g., OmpC and OmpF), which permit the general diffusion of small polar molecules (600 Da), and specific porins (e.g., LamB), which facilitate the diffusion of specific substrates.Objective: To purify and characterize outer membrane proteins (porins) from a local isolate of Klebsiella pneumoniae. Materials and methods: An identified local isolate of Klebsiella pneumoniae was used as a primary source for the isolation and purification of porins. Outer membrane protein (porins) was purified and characterized and the contaminating lipopolysaccharides (LPS) were detected by thiobarbituric acid assay. Results: The final preparation contained porins in a concentration of 3.2 mg/ml. The results of electrophoretic separation revealed that porins appeared as two distinct bands with molecular weights of porins were estimated to be 35 and 36 kDa, respectively. Conclusions: Porins were expressed by the local isolate of Klebsiella pneumoniae with molecular weights highly similar to that of porins preparations produced by other gram negative bacteria and Klebsiella pneumoniae expressed two types of porins under standard laboratory conditions.Keywords: Porins, Thiobarbituric acid, Gel filtration chromatography, Ketodeoxyoctinate.

خلفيه الدراسة: توجد بروتينات الغشاء الخرجي ( البورينات) بكميات كبيره في الغشاء الخارجي للبكتريا السالبه لصبغة الكرام حيث تكون قنوات مملوءة بالماء تسمح بتنافذ الجزيئات المحبه للماء خلال الغشاء الخارجي للخلايا البكتيريه. تقسم البورينات بصوره عامه الى بورينات لا نوعيه (مثل OmpC , OmpF) التي تسمح بتنافذ الجزيئات القطبيه الصغيره (600 Da) وبورينات نوعيه (مثل LamB) والتي تسهل تنافذ مواد اساسيه لعمل الانزيمات.هدف الدراسه: تنقية وتوصيف بروتينات الغشاء الخارجي (البورينات) من عزله محليه من بكتريا ال Klebsiella pneumoniae .طريقة العمل: استعملت احدى عزلات بكتريا ال Klebsiella pneumoniae المحليه كمصدر لعزل وتنقية بروتينات الغشاء الخارجي. تم تنقية وتوصيف بروتينات الغشاء الخارجي وتم كذلك التحري عن وجود متعدد السكريد الشحمي في المستحضر النهائي باستخدام طريقة الكشف عن حامض الثايوباربجوريك.النتائــج: احتوى المستحضر النهائي على بورينات وبنسبة 3.2 mg/ml. واظهرت نتائج عملية الترحيل الكهربائي ظهور البورينات بشكل حزمتين ذواتي وزنين جزيئيين هما 35 kDa , 36 على التوالي.الاستنتاجات: تنتج العزله المحليه لبكتريا ال Klebsiella pneumoniae قيد الدراسه بورينات باوزان جزيئيه مشابهه لما تنتجه البكتريا الاخرى السالبه لصبغة الكرام وتنتج نفس العزله نوعين من البورينات تحت الضروف المختبريه القياسيه.مفتاح الكلمات: البورينات, حامض الثايوباربجوريك, كروموتوكرافيا الهلام, كيتودياوكستنيت.


Article
Antiproliferative effects of porins extracted from Klebsiella pneumoniae on HL-60, NIH/3T3 and Human foreskin fibroblast cell (HFFC) lines measured by ELISA method
تاثير البورينات المستخلصه من بكتريا Klebsiella peumoniae المضاد لتكاثر خلايا HL-60, NIH/3T3, (HFFC) والمقاس بطريقة ELISA

Loading...
Loading...
Abstract

Approximately, 50% of the dry mass of the outer membrane of gram-negative bacteria consists of proteins, and more than 20 immunochemically distinct proteins (termed outer membrane proteins [OMPs]) have been identified. An identified local strain of Klebsiella pneumoniae was used as a primary source for the isolation and purification of porins. Multiple concentrations of purified porins (5, 10, 15, 20, 25) g/ml were incubated with three different cell lines for (24, 72 , 120) hrs, after the end of the incubation periods, the cells were treated with Cell proliferation ELISA, BrdU (colorimetric) kit to evaluate the antiproliferative effects of porins. The results revealed that porins are potent antiproliferative agent in a time and concentration dependent manner and thus could greatly affect prokaryote-eukaryote interaction as well as the whole inflammatory process resulted after infection with gram negative bacteria.

تشكل البروتينات حوالي 50% من الكتله الجافه للغشاء الخارجي للبكتريا السالبه لصبغة الكرام . ويوجد اكثر من 20 نوع مميزه مناعيا من بروتينات الغشاء الخارجي . استعملت عزله محليه من بكتريا Klebsiella pneumoniae كمصدر لعزل وتنقية بروتينات الغشاء الخارجي وقد استعملت عدة تراكيز من بروتينات الغشاء الخارجي (25, 20, 15, 10, 5) مايكروغرام/مليليتر وحضنت لثلاث مدد (24, 72, 120) ساعه مع ثلاثة انواع من الخلايا وبعد انتهاء مدة الحضن تم معاملة الخلايا مع عدة Cell proliferation ELISA, BrdU (colorimetric) . اظهرت نتائج الدراسه ان بروتينات الغشاء الخارجي عامل مثبط لتكاثر الخلايا بطريقه تعتمد على التركيز وفترة الحضن وهذا بدوره يؤثر على طريقة التاثر بين خلايا كاذبة النواة وخلايا حقيقية النواة وكذلك على العمليه الالتهابيه الناتجه عن الاصابه بالبكتريا السالبه لصبغة الكرام .

Keywords


Article
Antiproliferative effects of porins extracted from Klebsiella pneumoniae on HL-60, NIH/3T3 and Human foreskin fibroblast cell (HFFC) lines measured by ELISA method
تاثير البورينات المستخلصه من بكتريا Klebsiella peumoniae المضاد لتكاثر خلايا HL-60, NIH/3T3, (HFFC) والمقاس بطريقة ELISA

Loading...
Loading...
Abstract

Approximately, 50% of the dry mass of the outer membrane of gram-negative bacteria consists of proteins, and more than 20 immunochemically distinct proteins (termed outer membrane proteins [OMPs]) have been identified. An identified local strain of Klebsiella pneumoniae was used as a primary source for the isolation and purification of porins. Multiple concentrations of purified porins (5, 10, 15, 20, 25) g/ml were incubated with three different cell lines for (24, 72 , 120) hrs, after the end of the incubation periods, the cells were treated with Cell proliferation ELISA, BrdU (colorimetric) kit to evaluate the antiproliferative effects of porins. The results revealed that porins are potent antiproliferative agent in a time and concentration dependent manner and thus could greatly affect prokaryote-eukaryote interaction as well as the whole inflammatory process resulted after infection with gram negative bacteria.

تشكل البروتينات حوالي 50% من الكتله الجافه للغشاء الخارجي للبكتريا السالبه لصبغة الكرام . ويوجد اكثر من 20 نوع مميزه مناعيا من بروتينات الغشاء الخارجي . استعملت عزله محليه من بكتريا Klebsiella pneumoniae كمصدر لعزل وتنقية بروتينات الغشاء الخارجي وقد استعملت عدة تراكيز من بروتينات الغشاء الخارجي (25, 20, 15, 10, 5) مايكروغرام/مليليتر وحضنت لثلاث مدد (24, 72, 120) ساعه مع ثلاثة انواع من الخلايا وبعد انتهاء مدة الحضن تم معاملة الخلايا مع عدة Cell proliferation ELISA, BrdU (colorimetric) . اظهرت نتائج الدراسه ان بروتينات الغشاء الخارجي عامل مثبط لتكاثر الخلايا بطريقه تعتمد على التركيز وفترة الحضن وهذا بدوره يؤثر على طريقة التاثر بين خلايا كاذبة النواة وخلايا حقيقية النواة وكذلك على العمليه الالتهابيه الناتجه عن الاصابه بالبكتريا السالبه لصبغة الكرام .

Keywords

Listing 1 - 3 of 3
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (3)


Language

English (3)


Year
From To Submit

2010 (2)

2009 (1)