research centers


Search results: Found 1

Listing 1 - 1 of 1
Sort by

Article
Separation of X spermatozoa from cauda of epididymis prior to selection of female embryos in local goat
عزل النطف الأنثوية من ديل البربخ لغرض اختيار الأجنة الأنثوية في الماعز المحلي

Loading...
Loading...
Abstract

The objective of this study is the selection of X epididymal spermatozoa of local buck by discontinuous ficoll density gradient and using these spermatozoa for in vitro fertilization and identify the ratio of produced female embryos after identification by polymerase chain reaction (PCR). Epididymal spermatozoa were harvested from the cauda epididymis by slicing, and then spermatozoa were estimated and submitted to in vitro maturation and capacitation prior to separation of X from Y bearing spermatozoa and use for in vitro fertilization. Modified discontinuous ficoll density gradient method used for the separation of X and Y-bearing sperm by using 3 layers of discontinuous ficoll (60, 40, and 20%) or 4 layers of discontinuous ficoll (80, 72, 64, and 50%). The centrifugation applied at 200×g or 300×g. In the protocol of 3 layers of discontinuous ficoll (60, 40, and 20%) and centrifugation at 200×g and 300×g the results showed that the mean of the sperms at the 3rd was 79.014 ± 3.12 and 79.39 ± 2.11 respectively and this show the sperms was not completely separated. In the protocol of 4 layers of discontinuous ficoll (80, 72, 64, and 50%) and centrifugation at 200×g showed that the mean of the sperms at the 4th layer was (42.79 ± 1.38) as compared with the first three layers and with the protocol centrifugation at 300×g. The mean of the sperm lost showed (7.066 ± 0.56) and a little percent from centrifugation at 300×g showed 11.28 ± 1.55. Oocytes collected from ovaries which obtained from the slaughter house then matured oocyte was applied. The maturation rate for grade A and B used for IVF by spermatozoa after ficoll density gradient it was 67.60% and 52.74%, while the fertilization rate for the grade A and B was 70.68% and 78.26% respectively. The sex of embryos was determined by polymerase chain reaction (PCR) using specific primers for detection of SRY gene. The percentage of goat embryos obtained by IVF by sperms selected with ficoll density techniques after centrifugation at 200×g at different stage of development was 70.13%. The percentage of the male embryos was 16.67% while the female embryos was 83.33%. The results showed that the best method for selection of female embryos was by using 4 layers of discontinuous ficoll gradient method (80, 72, 64, and 50 %) with centrifugation at 200×g

الأهداف الرئيسة لهذه الدراسة هي فصل نطف ذيل البربخ التي تحملX عن الحاملة Y كروموسوم لذكور الماعز المحلي بواسطة تدرج الكثافة المتقطعة (Ficoll) واستخدام هذه النطف للإخصاب الخارجي لتقدير النسبة المئوية للأجنة الذكور والإناث المنتجة مختبريا بعد تطبيق التقنية. يتم تحديد جنس الأجنة بواسطة تفاعل سلسلة البلمرة (PCR). تم الحصول على خصى ذكور الماعز المحلي من المجزرة لغرض حصاد النطف من الذيل البربخ بواسطة التشطيب وثم تحديد تركيز النطف, العدد الكلي, الحركة الفردية, النطف الحية والميتة وقد تم تقييمها وتكييفها للإنضاج الخارجي قبل البدء بفصل النطف الحاملة X عن الحاملة Y واستخدامها في إخصاب بويضات مختبريا. اختبرت طريقة تدرج الكثافة المتقطعة والمحورة لفصل النطف الحاملةX وY باستخدام ثلاث طبقات من Ficoll المتقطع (60, 40, 20%) أو اربع طبقات من Ficoll متقطع (80, 72, 64 و50%). قوة الطرد المركزي طبقت 200×g و300×g. في نظام الثلاث طبقات من Ficoll متقطع (60, 40, 20%) وبقوة طرد مركزي 200×g و300×g أظهرت النتائج ان معدل النطف في الطبقة الثالثة كانت 79.014 ± 3.12 و79.39 ± 2.11 على التوالي وهذا يدل على ان الحيامن لم يتم فصلها بشكل كامل. في نظام الأربع طبقات من Ficoll متقطع (80, 72, 64 و50%) وبقوة طرد مركزي 200×g أظهرت ان معدل الحيامن في الطبقة الرابعة كان (42.79± 1.38) مقارنة بالطبقات الثلاث الأولى وأيضا مع الطبقات المستعملة في قوة الطرد المركزي 300×g. أما معدل الحيامن المفقودة ظهرت (7.066 ± 0.56) وبنسبة مئوية اقل من قوة الطرد المركزي 300×g التي ظهرت (11.28± 1.55). تم جمع البويضات من المبايض التي تم الحصول عليها من المجزرة وكانت 67.60% و52.74%. أما معدل الإخصاب الخارجي للبويضات من النوعين A وB بتقنية السباحة للأعلى كانت 73.08% و84.26% على التوالي, في حين بلغ معدل الإخصاب الخارجي للبويضات من النوعين AوB في تقنية الكثافة المتدرجة (Ficoll) 70.68% و78.26% على التوالي. تم تحديد جنس الأجنة عن طريق تقنية سلسلة تفاعل البلمرة (PCR) وباستخدام برايمر خاص للكشف عن جين SRY. بلغت مجموع نسب الأجنة التي تم الحصول عليها بواسطة الإخصاب الخارجي وبواسطة النطف المختارة بطريقة الفيكول وبعد قوة طرد مركزي 200×g وفقا لمراحل تطورها (77.05%) و(70.13%) على التوالي. سجلت نسبة الأجنة الذكور الأجنة الذكور (16.67%) بينما سجلت الأجنة الأنثوية (83.33)%. في نهاية البحث، أظهرت النتائج إمكانية استعمال النطف من ذيل بربخ ذكور الماعز في تقنية فصل نطف ذيل البربخ التي تحملX عن الحاملة Y كروموسوم، وإمكانية اختيار نسب عالية من الأجنة الأنثوية باستخدام اربع طبقات (80، 72، 64، 50٪) من تدرج الكثافة المتقطع (Ficoll) وبقوة الطرد المركزي 200 × g.

Listing 1 - 1 of 1
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (1)


Language

Arabic and English (1)


Year
From To Submit

2018 (1)