Background There is rapid increase in bacterial resistance to antibiotics resulted in increased morbidity and mortality among patients in hospitals. Aims Monitoring of antibiotic resistance to provide data for antibiotic therapy and resistance control prescription programs. Materials and Methods Sixty seven clinical samples were collected from urine, stool, pus, wound of the patients and operating theater from some of Baghdad hospitals in 2010. Sixty two isolates of Escherichia coli were detected by bacteriological and biochemical tests, these isolates were submitted to hemolysis test and antibiotic susceptibility to 10 kinds of antibiotic disks on Mueller Hinton agar by disk diffusion method. The detection of β-lactamase production was also done and Extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) for all the isolates. Results Hemolysis test was positive for two isolates. All the isolates of E. coli were resistant to ampicillin and cephalothin (100%) and high resistance was observed to cephalixin (95.1%), tobramycin (90.3%), doxycycline (82.2%) and nalidixic acid (70.9%). Both ciprofloxacin and nitrofurantoin was (67.7%). Low resistance was noticed to amikacin (11.2%) and trimethoprime (8.1%). β-lactamase test was positive for 57 isolates (91.9%), while three isolates (4.8%) showed positive result for extended-spectrum beta-lactamase. Conclusions Isolates of E.coli showed high resistance to ampicillin,cephalothin and cephalixin. Low resistance was revealed to amikacin and trimethoprime .Most of the isolates were positive for β-lactamase test (91.9%) and (4.8%) of the isolates were positive for extended-spectrum beta-lactamase.

E. coli --- antimicrobial susceptibility --- β‐lactamase --- ESBL.

Abstract:Out of 200 clinical samples (blood ,pus,stool,urine,wound and vaginalswabs) were collected from Baghdad hospitals during June2009-January 2010,96 Gram negative and positive bacterial isolates were identified bybacteriological and biochemical tests. Escherichia coli was the dominantbacteria (27.08%), followed by Salmonella typhi (12.5%), Klebsiellapneumoniae (10.4%), Proteus vulgaris (9.3%), and Staphylococcus aureus(8.3%).Antimicrobial susceptibility test was done against ciprofloxacin disk(5μg) by disk diffusion method and the resistant isolates were 22 (23%);

الخلاصة:جمعت 200 عینة سریریة (الدم والقیح والبراز والجروح ومسحات المهبل) خلال الفترة من حزیران2009 لغایة كانون الثاني 2010 ، وشخصت 96 عزلة بكتیریة سالبة وموجبة لصبغة غرام بالأختباراتالبكتریولوجیة والبیوكیمیائیة.Salmonella هي السائدة بنسبة ( 27.08 %) تبعتها بكتریا Escherichia coli كانت بكتریاProteus بنسبة ( 10.4 %) وبكتریا Klebsiella pneumoniae بنسبة ( 12.5 %) ثم بكتریا typhi.(% بنسبة ( 8.3 Staphylococcus aureus بنسبة ( 9.3 %) وبكتریا vulgaris5) بطریقة الأنتشار μg) أجري أختبار الحساسیة ضد مضاد السایبروفلوكساسین بتركیزبالأقراص وكان عدد العزلات المقاومة 22 عزلة بنسبة ( 23 %) توزعت هذه العزلات فكان عدد بكتریا3) عزلات، ) S.typhi 4) عزلات, تبعتها بكتریا ) K.pneumoniae 10 ) عزلات وبكتریا ) E.coliالمقاومة للسایبروفلوكساسین عزلتان فقط Enterobacter و Shigella flexner بینما كانت عدد عزلاتكانت العزلات المقاومة للسایبروفلوكساسین والمنتجة لأنزیم .S.aureus لكل منهما, وعزلة واحدة لبكتریاالبیتالاكتامیز سبعة عزلات.ان نتائج تحدید تركیز المثبط الأدنى للسایبروفلوكساسین للعزلات المنتجة لأنزیم البیتالاكتامیزE.coli و 2 S.flexneri و K.pneumoniae و Enterobacter و 2 Enterobacter و 1 E.coli 18) مایكروغرام/مللیلتر على التوالي. ,16,16, 16 ,32,32 , كانت ( 64 S.aureus

Keywords: Ciprofloxacin resistance bacteria --- MIC --- β-lactamase .

Around fifty Escherichia coli isolates were isolated from sixty midstream urine specimens collected from patients visiting hospitals in Baghdad city. Approximately, 52% of all isolates were identified as extended spectrum beta lactamases (ESBL) producer. Results demonstrated that 92% of these isolates were sensitive to carbapenems. Only four β-lactamase coding genes were detected; blaTEM, blaPER, blaVIM and blaCTX-M-2. As a conclusion, this work revealed that local E. coli isolates harboured ESBL coding genes which may contribute in its pathogenicity.

عزلت خمسون عزلة من الايشريكية القولونية من ستين عينة ادرار وسط المجرى جمعت من مرضى يزورون مستشفيات مدينة بغداد. شخص ما نسبته 52% من العزلات على انها منتجة لانزيمات بيتا- لاكتاميز موسعة الطيف. كما اظهرت النتائج ان 92% من هذه العزلات كان حساسا لمضادات الكاربابينيمات. تم التعرف على اربعة مورثات من مورثات البيتالاكتاميز و هي blaTEM و blaPER و blaVIM و blaCTX-M-2. و يمكن ان نخلص الى ان عزلات الايشريكية القولونية المحلية تحمل جينات البيتالاكتاميز موسعة الطيف.

Escherichia coli --- ESBL --- β-lactamase genes

The total 22 isolate of K. pneumoniae which isolated from different infected cases has been active through their growth on the Brain Heart Infusion Broth Media, and then the processes of detection for bacterial producing to the Beta lactamase was done.19 isolate (86.4%) showed ability to produce β-Lactamase enzyme , also have the ability to produce the Extendended spectrum β-Lactamase enzyme by using Disc Approximation , where was 9 isolates (40.9%), testing has been its ability to produce enzymes Metalloβ-Lactamase and using the Imp-EDTA combination disc as managed 12 isolates (54.5%) production of the enzyme.All isolates showed pattern of multiple drug resistance towards 16 anti biotics , as were all isolates (100%) were resistance to antibiotics Ampicillin , Carbencillin , and Pipracillin, while most of the isolates were sensitive to Imipenem and chloramphenicol, and varied resistance ratio for the rest of antibiotics.Detection tolerate of bacteria to different concentrations of heavy metals and that their growing them on media containing different concentrations (3, 1.5, 0.03, 0.03 and 1.5) mmol. of metals (copper, cobalt, mercury, silver, and zinc) respectively where the highest concentration tolerance the bacteria to copper(3) mmol. , and the lowest concentration tolerance to metallic mercury and silver (0.01) In the current study was conducted the bacterial conjugation for a group of bacterial isolates that have shown high resistance to antibiotics and heavy metals as well as the production of enzymes β-Lactamase with the standard strain E.coliMM294, and the Isolates were unable to achieve the conjugation in the liquid media or solid agar by Seldeen method, while 18 isolates which contain plasmids were able to achieve conjugation (100%) on solid agar by Miller method where depended on heavy growth and direct contact between the donor and recipient strains .The current study found by investigation the plasmid profile for conjugated cells that the most of the plasmids had transferred from donor strain which represent by the isolates under study to standard strain , where 15 trans conjugated isolates (83.3%) from 18 isolate can produce β-Lactamase enzyme , while 9 trans conjugated isolate (50%) can produce extended spectrum β-Lactamase enzyme , and 10 trans conjugated isolate 55.6)%) can produce Metallo β-Lactamase enzyme , in addition to the multi drug resistance and the heavy metal tolerance were transferred to the trans conjugated cells , a condition implying that they are plasmid mediated.

نُشطت 22 عزلة لبكتريا K.pneumoniae المعزولة سابقا من أصابات مرضية مختلفة (ألتهابات مجاري بولية , حروق , جروح , قشع) وذلك بتنميتها على وسط Brain Heart Infusion Broth ثم أجريت عملية الكشف عن إنتاج البكتريا لأنزيمات البيتالاكتاميز β-Lactamase .أظهرت نتائج هذه الدراسة ان 19 عزلة (86.4%) لهاالقابلية على إنتاج أنزيمات البيتا لاكتاميز، و كان 9 عزلات لها القابلية على انتاج انزيمات البيتالاكتاميز الواسعة الطيف و بنسبة (40.9%) ,وكانت 12 عزلة (54.5%) قادرة على انتاج انزيمات البيتالاكتاميز المعدنية.اختبرت حساسية العزلات نمط المقاومة المتعددة تجاه 16 مضاداً حيوياً، وكانت جميع العزلات وبنسبة 100% مقاومة لمضادات الامبسيلين، و الكاربنسيلين، والببراسيلين، في حين كانت معظم العزلات حساسة لمضادي الاميبينيم والكلورامفينيكول، وتفاوتت نسبة المقاومة لباقي المضادات .تم تحديد تحمل البكتريا لتراكيز مختلفة من المعادن الثقيلة وذلك بتنميتها على أوساط تحتوي على تراكيز مختلفة ( 3 ، 1.5 ، 0.03 ، 0.03 و 1.5 ) ملي مول من معادن (النحاس، الكوبلت، الزئبق، الفضة، والزنك) على التوالي حيث كان أعلى تركيز تحملته البكتريا لمعدن النحاس (3) ملي مول، وأقل تركيز تحملته كان لمعدني الزئبق والفضة (0.01) ملي مول.تم إجراء عملية الأقتران البكتيري Conjugation لمجموعة من العزلات التي أبدت مقاومة عالية للمضادات الحيوية والمعادن الثقيلة فضلاً عن إنتاجها لأنزيمات البيتا لاكتاميز مع السلالة القياسية E.coliMM294 ولم تستطع العزلات تحقيق الأقتران في الوسط السائل والوسط الصلب ، بينما أستطاعت جميع العزلات الحاوية على بلازميدات والبالغة 18 عزلة تحقيق الأقتران بنسبة 100% على الوسط الصلب تم التحري عن المحتوى البلازميدي للخلايا الأقترانية ووجد أن اغلب البلازميدات كانت قد أنتقلت من السلالة الواهبة الى السلالة المستقبلة وقد أستطاعت 15 عزلة إقترانية (83.3%) من 18 عزلة إقترانية من إنتاج أنزيم البيتا لاكتاميز، وأستطاعت 9 عزلات إقترانية (50%) من إنتاج أنزيمات البيتا لاكتاميز الواسعة الطيف، وتمكنت 10 عزلات إقترانية 55.6)%) من إنتاج أنزيمات البيتالاكتاميزالمعدنية، فضلاً عن ذلك قد أنتقلت مقاومة مشتركة لاكثر من مضاد حيوي ومعدن ثقيل للخلايا الاقترانية مما يدل على ان هذه الصفات محمولة بلازميديا.

Klebsiella pneumoniae --- β-Lactamase --- Metallo β-Lactamase --- Conjugation --- انزیمات البیتالاكتامیز --- انزیمات البیتالاكتامیز الواسعة الطیف --- الاقتران

AbstractBackground: Acinetobacter infections have become more difficult to treat owing to the emergence of isolates resistant to all commonly prescribed antimicrobial drugs, particularly pan-drug resistant Acinetobacter baumannii.Aim of Study: to investigate the incidence of pan-drug resistance in a sample of A. baumannii clinical isolates obtained from Al-Ramadi Teaching HospitalMaterials and Methods: Twenty-six A. baumannii were isolated from 130 wound and burn patients obtained from operative theatres and burn centre, in Al-Ramadi Teaching Hospital from October 2012 to May, 2011. Identifications were performed by standard microbiological techniques and by means of a commercial identification gallery (API 20E) and further confirmed by (API 20NE). The susceptibility of the isolates to selected major classes of anti-A. Baumannii agents were determined by the standard disk diffusion method as described in the guidelines of the Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI). Appropriate tests were performed for detecting carbapenemase and metallo-β-lactamase production.Result: Out of 26 isolates of A. baumannii, 6/26 (23%) were imipenem-resistant pandrug resistant (IR-PDR) A. baumannii, i.e. resistant to all representative drugs of available anti-A. baumannii in Iraq. One out of 26 (4%) was imipenem-resistant multidrug resistant (IR-MDR). All the (7) imipenem-resistant A. baumannii isolates were obtained from the Burn Centre, six were isolated from patients have taken meropenem in their treatment and only one patient who had not taken meropenem but admitted to the centre at the same time with other two patients suffering from Steven-Johnson syndrome have been given meropenem, all showed positive results in the metallo-β-lactamase production screening tests.Conclusion: It is concluded that the presence of carbapenem, multidrug and pandrug resistance is evident in our sample of A. baumannii isolates and may be associated with the use of meropenem and inadequate infection control measures particularly in burn patients.Key words: Acinetobacter baumannii, Pan-drug resistance, Metallo-β-lactamase, Ramadi

الخلاصةالخلفية: عدوى الاساينيتوباكتر اصبحت صعبة العلاج بسبب ظهور عزلات مقاومة لكل المضادات الحيوية الموصوفة والمتوفرة, خاصة بكتريا الاساينيتوباكتر بوماني ذات المقاومة الشاملة. الاهداف: التحري و ملاحظة ضهور المقاومة الشاملة في عزلات الاساينيتوباكتر بوماني السريرية المأخوذة من مستشفى الرمادي التعليمي.طرائق العمل: 26عزلة لبكتريا الاساينيتوباكتر بوماني عزلت من مجموع 130 مريض مأخوذة من مركز الحروق و صالات العمليات في مستشفى الرمادي التعليمي للفترة من تشرين الأول 2010 لغاية أيار 2011 التشخيص اجري باستخدام الطريقة المايكروبايولوجية القياسية و بواسطة التشخيص التجاري، اجري اختبار الحساسية للعزلات للاصناف الرئيسية لمضادات الاساينيتوباكتر بوماني بطريقة الانتشار حول الاقراص. استخدم فحص مناسب للكشف عن انتاج انزيم carbapenemase و metallo-β-lactamase.النتائج: من اصل 26عزلة لبكتريا الاساينيتوباكتر بوماني, 6/26 (23%) عزلة لبكتريا الاساينيتوباكتر بوماني كانت مقاومة لجميع الادوية (مقاومة لكل مضادات الاساينيتوباكتر بوماني المتوفرة في العراق) بينما 1 من اصل 26(4%) مقاومة للعديد من الادوية. الـ(7) عزلات المذكورة اعلاه عزلت من مركز الحروق و كانت جميعها مقاومة للاميبينيم, (6) عزلات من مرضى اخذوا الميروبينيم ضمن العلاج و(1) عزلت من مريض لم ياخذ الميروبينيم لكن دخل للمركز مع مرضى كانوا ياخذون الميروبينيم. كل العزلات اظهرت نتائج موجبة لفحص انتاج ال MBL.الاستنتاجات: يستنتج من هذه الدراسة بان المقاومة لمجموعة كاربابينيم والمتعددة والشاملة ظهرت في عزلات هذه الدراسة وان هذه المقاومة من المحتمل ان تكون مرتبطة باستخدام المضاد الحيوي ميروبينيم واجراءات السيطرة غير الكافية للعدوى خصوصا في مرضى الحروق.

Acinetobacter baumannii --- Pan-drug resistance --- Metallo-β-lactamase --- Ramadi