research centers


Search results: Found 16

Listing 1 - 10 of 16 << page
of 2
>>
Sort by

Article
The effect of aqueous extracts and isolation proteinous compound from clove buds on serumglucose, triglyceride , glutathione and malnodialdehyde levels in alloxan induced diabetic mice
تأثيرالمستخلصات والمركب البروتيني المعزول من براعم نبات القرنفل CLOVE BUDS على مستوى الكلوكوز والدهون والكلوتاثايون والمالوندايالديهايد في الفئران المصابة بداء السكر المستحدث بالالوكسان

Authors: Israa Sahel Ahmed Al-Flyah إسراء سهل احمد آل.فليح --- Kinda Masood Bilal Al_Taee كندة مسعود بلال الطائي --- Nhida Saieed Hamoodi ناهدة سعيد حمودي الجلبي
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2010 Volume: 7 Issue: عدد خاص بمؤتمر العلمي النسوي 1 Pages: 554-563
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

This study was included preparing acold aqueous extract of clove buds The study also comprised the isolation and studying the proteinous compound,which was seperated using gel filtration technique and determined approximately molecular weight of this isolated compound(6799) dalton . The aim of the study demonstrate effects of the crude aqueous, non proteinous extract, proteinous precipitate and proteinous compound on serum glucose, total cholesterol, triglyceride and high density lipoprotein-cholesterol levels, also glutathione and malondialdehyde levels in liver and kidney tissues in diabetic mice-induced alloxan.Extracts were administerated interaperitioneally. The results were indicated that the crude aqueous, non proteinous extract, proteinous precipitate and proteinous compound which were caused asignificant decrease in serum glucose, total cholesterol, triglyceride levels and malondialdehyde level in liver and kidney tissues, while aproteinous precipitate don’t show asignificant decrease in serum cholesterol level but all extracts don’t show asignificant changes in serum high density lipoprotein-cholesterol level in alloxan induced diabetic mice, on other wise all extractsshowed asignificant increase in glutathione level in liver and kidney tissues except non proteinous extract and proteinous precipitate which were caused asignificant increase in glutathione level in liver tissue only.

تضمنت هذه الدراسـة تحضير مستخلص مائي بارد لبراعم نبات القرنفل (Clove buds)، إذ تم عزل ودراسة المركب البروتيني المفصول بتقنية الترشيح الهلامي من الراسب البروتيني البارد ، كما تم تحديد الوزن الجزيئي التقريبي للمركب البروتيني المفصول وكان (6799) دالتون . يهدف البحث إلى دراسة تأثير المستخلص المائي الخام وغير البروتيني و الراسب البروتيني والمركب البروتيني المفصول منه في مستويات الكلوكوز ، الكوليسترول الكلي ، الكليسيريدات الثلاثية وكوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة في مصل الدم ، وكذلك مستويات الكلوتاثايون والمالوندايالديهايد في أنسجة الكبد والكلية في ذكور الفئران المصابة بداء السكر المستحدث بالالوكسان عن طريق الحقن بالتجويف البريتوني . وأشارت النتائج إلى أن المستخلص المائي الخام وغير البروتيني والراسب البروتيني والمركب البروتيني المفصول منه قد أدت إلى انخفاض معنوي في مستوى الكلوكوز والكوليسترول الكلي والكليسسيريدات الثلاثية في مصل الدم ومستوى المالوندايالديهايد في أنسجة الكبد والكلية ، في حين لم يظهر الراسب البروتيني انخفاض معنوي في مستوى الكوليسترول ، بينما لم تظهر أي من المستخلصات المذكورة آنفاً تأثيرا معنويا في مستوى البروتين الدهني عالي الكثافة في مصل الدم لذكور الفئران المصابة بداء السكر المستحدث بالالوكسان ، بينما احدثت المستخلصات ارتفاعا معنويا في مستوى الكلوتاثايون في أنسجة الكبد والكلية ماعدا المستخلص غير البروتيني والراسب البروتيني فقد احدثا ارتفاعا معنويا في مستوى الكلوتاثايون في نسيج الكبد فقط .


Article
دراسة التأثير التثبيطي وتقدير كمية البروتين والتنقية الجزئية للبروتسين المستخلص من بكتريا Proteus mirabilis المعزولة من عينة إدرار

Authors: رغد حربي العزاوي --- رباب كزار --- الاء رحيم
Journal: Al-Nahrain Journal of Science مجلة النهرين للعلوم ISSN: (print)26635453,(online)26635461 Year: 2011 Volume: 14 Issue: 3 Pages: 40-45
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

Proteus mirabilis is one of the most important species of the genus Proteus, and it comes after E. coli in urinary tract infection. The results showed that the isolate of P. mirabilis was resistant to antibiotics of Tetracyclin (30 µg), Amoxicillin (25µg) and Gentamycin (30 µg), While it was sensitive to Ciprofloxacin (5µg). The isolate showed good proticine production that it was inhibit the bacterial growth of other Proteus and other genus like Serratia , Pseudomonas and E.coli, also the extracted proticine from P. mirabilis showed inhibition effect on bacterial growth of Proteus and other genus like Serratia, Pseudomonas and E.col. The amount of protein in this extract was 0.47 mg/ml.The proticin concentration in partially purified by gel filtration chromatography (Sephacryl S1000) was 0.15 mg/ ml and specific activity 513.3 U/ mg protein and with purification folds of 12.1 folds.

تعد بكتريا Proteus mirabilis من أهم الأنواع التابعة لجنس المتقلبات Proteus ويأتي النوع P. mirabilis بعد E. coli في اصابات المجرى البولي. وقد تبين من النتائج بأن عزلة P. mirabilis كانت مقاومة للمضادات الحيوية Tetracyclin (30 µg) و Amoxicillin (25µg) و Gentamycin (30 µg) ولكنها حساسة فقط للمضاد Ciprofloxacin (5µg). وقد تميزت العزلة بإنتاجها للبروتسين وذلك بتثبيط النمو البكتيري لأنواع اخرى من المتقلبات وعزلات لاجناس اخرى مثل Serratia و Pseudomonas و E.coli وان البروتسين المستخلص من بكتريا P. mirabilis كان له تأثيرا تثبيطيا على البكتريا من نفس الجنس والأجناس الأخرى المستخدمة. وأظهرت النتائج بأن تركيز البروتسين في هذا المستخلص كان 0.47 ملغـم/ مـل .وفـي البروتسيـن المنقـى جزئيـا بأستـخدام الترشيـح الهلامي بالمبادل الايوني (Sephcryl S1000) كان البروتين بتركيز 0.15 ملغم/ مل وبفعالية نوعية مقدارها 513.3 وحدة/ ملغم بروتين وبعدد مرات تنقية مقدارها12.1 مرة.


Article
Extraction and Purification of the Urease Enzyme from the Proteus mirabilis Bacteria
استخلاص وتنقية انزيم اليورييز من بكتريا Proteus mirabilis

Authors: Entesar Hussain Ali انتصار حسين علي --- Hadeel Hameed Dawud هديل حميد داود
Journal: Jornal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية ISSN: 18151140 Year: 2017 Volume: 11 Issue: 2 Pages: 46-51
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

Bacterial isolate was identified using vitek diagnosis; it's obtained from burns from Al-imam Ali Hospital which proved its ability to produce Urease by using Luria broth culture media because it is suitable for growing bacterial cells and for extraction of enzyme. Enzyme purification processes include precipitation with Ammonium sulfate, ion exchange chromatography and gel filtration then the enzyme activity was measured for each purification step. The results of Urease purification that extracted from the isolate of Proteus mirabilis using ammonium sulphate showed that the specific activity was 4.71 unit/mg, and the best saturation ratio was (60%), the number of purification times and yield were 3.5and14.6% respectively. Furthermore, the result of purification using Ionic exchange - Cellulose DEAE was gave the specific activity 12.29 units/mg, the number of purification times and the enzymatic yield were 9.2, 8% respectively while the specific activity was 15.1units/mg and the number of purification times and the enzymatic yield 11.27and 14% respectively by using gel filtration.

حصل على العزلة البكتيرية من الاشخاص المصابين بالحروق من مستشفى الإمام علي في مدينة الصدر وبعد ان شخصت مظهريا ومجهريا بجهاز Vitek ومن ثم اثبتت قدرتها على انتاج اليورييز باستخدام وسط الإنتاج الزرعي مرق اللوريا Luria broth لانه وسط مناسب لتنمية خلايا البكتريا واستخلاص الانزيم ثم اجريت عمليات تنقية للانزيم تضمنت الترسيب بكبريتات الامونيوم كخطوة تنقية اولية، ثم التبادل الايوني, والترشيح الهلامي ثم حددت فعالية الانزيم لكل خطوة تنقية. وقد اظهرت نتائج تنقية اليورييز المستخلص من عزلة Proteus mirabilis باستخدام كبريتات الامونيوم ان الفعالية النوعية كانت4.71 وحدة/ملغم, وان افضل نسبة اشباع كانت 60%, وعدد مرات التنقية والحصيلة الانزيميةهما 3.5و %14.6على التوالي. وظهرت نتائج التنقية باستخدام عمود التبادل الايوني -Cellulose DEAE ان الفعالية النوعية كانت 12.29 وحدة/ملغم, وعدد مرات التنقية والحصيلة الإنزيمية 9.2و8 % على التوالي بينما كانت الفعالية النوعية15.1 وحدة/ملغم وعدد مرات التنقية والحصيلة الانزيمية 11.27, 14% على التوالي باستخدام عمود الترشيح الهلامي.


Article
Purification and Characterization &#946; - lactamase produce from local isolate Klebsiella pneumonia
تنقية وتوصيف انزيم البيتالاكتميز المنتج من العزلة المحلية pneumoniae K.

Authors: Munatha A. Al-Safar منتهى عبد الكريم الصفار --- Zuher A. S. Al-Taeei زهير شفيق الطائي --- Essam F. Al-Jumaily عصام فاضل الجميلي
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2009 Volume: 6 Issue: 1 Pages: 50-60
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Beta-lactamase was purified from local isolate Klebsiella pneumonia by several steps included precipitation with ammonium sulphate at 20-40% saturation, DEAE- ion exchange chromatography and gel filtration on Sephacryl S-200 column. The obtained purification fold and recovery were 32.66; 47.04% respectively. The characterization of the purified beta-lactamase showed that the molecular weight was about 4000 daltons as determined by gel filtration.Purified enzyme had an optimal pH of 7 for activity and an optimal stability between pH 6.5-7.5, results shows that the optimal temperature appear to be 35 ه C .During storage the enzyme retained 72% at -20 ه C and retained 25% of the activity at the same period at 4 ه C.

نقي البيتالاكتميز المنتج من العزلة المحلية pneumoniae K. بثلاث خطوات شملت الترسيب بكبريتات الامونيوم عند نسبة اشباع 20-40% والتبادل الايوني باستخدام المبادل الايوني DEAE وعمود السيفاكريل S-200 بعدد مرات تنقية وحصيلة بلغت 32.66 و 47.04% على التوالي . بينت نتائج توصيف الانزيم ان الوزن الجزيئي 40000 عند تعينه بطريقة الترشيح الهلامي وان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية الانزيم (7) بينما كان الرقم الهيدروجيني الامثل لثبات الانزيم عند المدى 6.5-7.5 ، في حين بلغت اقصى فعالية للانزيم عند درجة حرارة 35 ه م , ولوحظ احتفاظ الانزيم 72% من فعاليته عند خزنه بدرجة (-20 م) ولمدة 28 يوماً مقارنه ب 20% عند خزنه بدرجة حرارة 4 ه م وللمدة نفسها .


Article
Qualitative and Quantitive Analysis of Amino Acids Isolated from Protein of Phoenix dactylifera and Determination of Molecular Weight by Gel Filtration (part I)
التحليل النوعي والكمي للأحماض الامينية للبروتين المعزول من نوى التمر Phoenix dactyliferaوتقدير وزنه الجزيئي بتقنية الترشيح الهلامي (الجزء 1)

Author: Dina I. M. Al-Sawaf دينا إدريس محمد الصواف
Journal: Rafidain journal of science مجلة علوم الرافدين ISSN: 16089391 Year: 2011 Volume: 22 Issue: 2A Pages: 111-128
Publisher: Mosul University جامعة الموصل

Loading...
Loading...
Abstract

The research was concerned with Amino Acid Analysis of the protein isolated from the crude aqueous extract of ground date seeds Phoenix dactylifera. Two types of analysis acidic and basic hydrolysis were performed for (72 hours). Acidic hydrolysis showed absence of some amino acids and a decrease in the intensity of the peaks. On the other hand, basic hydrolysis showed higher intensity of peaks for the same aqueous extract. The research also involved separation of the proteinous components from the aqueous extract of ground date seeds Phoenix dactylifera. Three major proteins (a, b, c) were isolated and their molecular weight were determined by gel filtration and showed the following values (>2000000, 45000, 251) Dalton Respectively

تضمن البحث تحليل الاحماض الامينية للبروتين المعزول من المستخلص المائي الخام لنوى التمر Phoenix dactylifera استخدم نوعان من التحاليل المائية الحامضية والقاعدية ولمدة (72 ساعة). لوحظ بالتحلل المائي الحامضي غياب قسم من الاحماض الامينية والنقصان في شدة الحزمة ومن جهة اخرى يلاحظ زيادة في شدة الحزمة بالتحلل المائي القاعدي لنفس المستخلص المائي . كما تضمن البحث فصل مركبات بروتينية من المستخلص المائي لنوى التمر، إذ تم فصل ثلاثة بروتينات رئيسة (a, b, c) وقدرت اوزانها الجزيئية بتقنية الترشيح الهلامي واعطت قيماً متتالية (2000000>, 45000, 251) دالتون.


Article
EXTRACTION AND PURIFICATION OF PROTEASE FROM LOCALLY OKRA PODS (ABELMOSCHUS ESCULENTUS)
استخلاص وتنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية

Authors: A. W. Mohi Rayitali84@gmail.com --- Kh. A. Shakir dr_khalida55@yahoo.com
Journal: Iraqi Journal of Agricultural Science مجلة العلوم الزراعية العراقية ISSN: 00750530/24100862 Year: 2015 Volume: 46 Issue: 3 Pages: 426-432
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

This study aimed to extract, purify, and characterize the protease of local Okra Abelmoschus esculentus pods. The extraction process was conducted using ten extraction solutions with different pH and ionic strength values. Phosphate buffer solution with (pH 7, 0.05M, containing 2% sodium chloride) gave the highest activity which was (7.2 Unit/ml) as compared to other solutions, which ranged from 0.8-5.9 Unit/ml. The extracted enzyme purified by several stages. Being, precipitation by gradual addition of Ammonium sulphate from 20 to 85% saturation, then the precipitated enzyme was dialyzed and fractionated through DEAE-Cellulose (22X1.1cm), the enzymic fractions were pooled. The specific activity, purification fold and the enzyme yield values were 21.52 units/mg, 1.24 and 82.83% respectively. For further purification the enzyme fractions applied to G-75 Sephadex column (65x 1.5cm), the specific activity, enzyme yield and purification fold value were 98.82Unit/mg, 46.70%, 5.1, respectively .Electrophoresis analysis in the absence of SDS showed single band as indicator for enzyme purity. In conclusion, Okra pods could be one of natural source for proteases and this study recommended further studies regarding the adequate means for removal of the mucilage in order to increase the extraction efficiency.

هدفت هذه الدراسة إلى استخلاص وتنقية بروتييز قرنات البامياAbelmoschus esculentus المحلية إذ اجريت عملية الاستخلاص باستخدام عشرة محاليل مختلفة في الرقم الهيدروجيني والقوة الأيونية، إذ أعطى محلول دارئ الفوسفات برقم هيدروجيني 7 وتركيز 0.05 مولار بوجود 2% كلوريد الصوديوم اعلى فعالية بالمقارنة بالمحاليل الأخرى بلغت الفعالية 7.2 وحدة/مل في حين تراوحت الاخريات بين 0.8-5.9 وحدة/مل. تلى ذلك عملية تنقية الأنزيم على عدة مراحل شملت الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع بين 20-85% إذ أعطت فعالية نوعية وعدد مرات تنقية وحصيلة أنزيمية (21.52 وحدة/ملغم و1.24 مرة و82.83%) بالتتابع، ثم مرر الأنزيم على عمود DEAE-cellulose بأبعاد 1.1×22 سم والذي نتج عنها فعالية نوعية بلغت 88.50 وحدة/ملغم، فعالية كلية 566.40، في حين كانت عدد مرات التنقية والحصيلة الإنزيمية لها 5.1 و46.67% بالتتابع، واستكملت عملية التنقية باستخدام الترشيح الهلامي باستخدام هلام السيفادكس G-75بأبعاد 1.5×65 سم إذ أعطت فعالية نوعية وعدد مرات تنقية وحصيلة إنزيمية (98.82 وحدة/ملغم و5.7 مرة و40.17%) بالتتابع، في حين أجريت عملية التأكد من نقاوة الإنزيم باستخدام الترحيل الكهربائي لهلام الاكريل امايد 10% NATIVE-PAGE بغياب المواد الماسخة والتي أظهرت وجود حزمة بروتينية واحدة تابعة لبروتييز قرنات الباميا, وبالنتيجةً، يمكن لقرون الباميا ان تكون أحد المصادر الطبيعية للبروتييزات، وتوصي الدراسة الحالية بمزيد من البحوث بشأن الوسائل الملائمة لإزالة المادة الصمغية ومن ثم زيادة كفاءة الاستخلاص الأنزيمي.


Article
Extraction and characterization of Arylesterase enzyme from (peel and pulp) of Annona muricata fruit.
استخلاص وتوصيف انزيم اريل استيريز من لب وقشره ثمره القشطه

Loading...
Loading...
Abstract

The extraction of arylesterase from the aqueous extract of (peel and pulp) of Annona muricata fruit was conducted using different biochemical techniques. It was shown that, max activity was obtained in the pulp than in peel, and by using gel filtration chromatography on sephadex G-75 for the pulp part, the solution of the proteinous precipitate produced by acetone precipitation, contained three proteinous peaks. The activity for peak A (1653) and peak B(2310.9) but the third peak C was very low. while maximum specific activity was obtained in the second peak (B) which showed (23107), (18366 ) IU/ml /mg for (A) and very low for the third one (C), and (12.58),(26.531) folds of purification for B and A peaks respectively .Furthermore, the comparative molecular weight of the partially purified isoenzymes arylesterase (peaks B and A) using gel filtration were found to be (92,129), (86,895) Dalton respectively. The optimum conditions of arylesterase were determined as maximum activity was obtained using (9 mM) Tris – HCl as a buffer at pH (7.2), with incubation temperature (37ºC), incubation time (25min) and (4mM) of phenyl acetate as a substrate. Using Linweaver–Burk plot, it was found that maximum velocity (Vmax) and Michaela’s constant (Km) had the values of (211UI/ml) and (2.8 mM) respectively.

تضمن البحث استخلاص وتوصيف انزيم اريل استيريز من المستخلص المائي للب وقشره ثمره القشطة باستخدام التقنيات الحيوية المختلفة. اظهرت النتائج ان اللب يحتوي على اعلى فعالية للأنزيم من القشرة كما وظهرت نتائج تقنيه الترشيح الهلامي على عمود الفصل الحاوي على Sephadex G-75 احتواء محلول الراسب البروتيني الناتج من الترسيب بالأسيتون للمستخلص المائي للب ثمره القشطة على ثلاث حزم بروتينيه متباينة الفعالية لأنزيم اريل استيريز, الفعالية للحزمة A 1653 والحزمة B 2310.9 لكن الحزمةC كانت قليلة جدا, وقد اظهرت الحزمة الاولى والثانية فعالية نوعيه 23107,18366 IU/ml/mg وبنقاوة على التوالي 26.531, 12.58 مره اما الحزمة الثالثة فتحتوي على اقل فعالية نوعيه للأنزيم وقد تم تقدير الوزن الجزيئي للنظير الأنزيمي الاول والثاني وكان مقدارها92.129,86.89 كيلو دالتون على التوالي باستخدام تقنيه الترشيح الهلامي ثم حددت الظروف المثلى لعمل الانزيم المنقى جزئيا، وبينت النتائج ان الانزيم يعمل في المحلول المنظم (Tris-HCI) وبتركيزmM 9 واس هيدروجيني امثل(7.2) ودرجه حراره مثلى( ͦ C37) و زمن حضن مقداره25 دقيقه‌ وباستخدام منحني لاينريفر-بيرك وجد ان السرعة القصوى التي يعمل بها الانزيم تساوي211U/ml وان قيمه ثابت ميكالس- منتن تساوي (2.8mM)


Article
Isolation of Protein Compounds from Elettaria cardamomum Fruits Plant and
فصل المركبات البروتينية من ثمار نبات الهيل Elettaria cardamomum وتقدير اوزانها الجزيئية

Authors: Nahida S. Al-Chalabi ناهدة سعيد حمودي الجلبي --- Rasha H. Al –Juboory رشا حسين علي الجبوري
Journal: Rafidain journal of science مجلة علوم الرافدين ISSN: 16089391 Year: 2018 Volume: 27 Issue: 5A-Botany Pages: 53-63
Publisher: Mosul University جامعة الموصل

Loading...
Loading...
Abstract

This study included preparation of aqueous extract for fruits of Elettaria cardamomum plant,isolation of their proteins and precipitation takes place by using acetone. The precipitate of theisolated proteins were purified using gel filtration chromatography depending on the volume oftheir molecules (proteins) and their molecular weights by a gel of Sephadex G – 75. The resultswere shown that there are two protein compounds A and B isolated from the protein precipitateresulted from cold aqueous extract for this plant by gel filtration chromatography. Then themolecular weight was determined for these compounds isolated using the same techniques (gelfiltration) by comparison these compounds with proteins known molecular weights. Theapproximate molecular weight of two compounds A and B are 29940, 10627 Dalton respectively

تضمنت هذه الدراسة تحضير المستخلص المائي لثمار Elettaria cardamomumنبات الهيل وعزل البرووترسيبها بواسطة المذيب العضوي الاسيتون ومن ثم فصل البروتينات المتحصل عليها وتنقيتها بتقنية كروماتوغرافيا الترشيح.Sephadex G – الهلامي اعتمادا على حجم جزيئاتها وعلى اوزانها الجزيئية باستخدام مادة الهلام السفدكس من نوع 75من الراسب البروتيني الناتج من المستخلص المائي البارد لثمار نبات الهيل B و A أوضحت النتائج فصل مركبين بروتينبتقنية كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي، فضلا عن ذلك تم تعيين الاوزان الجزيئية التقريبية لهذه المركبات البروتينية المفصولةوباستخدام نفس التقنية (الترشيح الهلامي) وذلك بمقارنتها مع مواد بروتينية معلومة الوزن الجزيئي، وكانت الاوزان الجزيئيةهي 29940 و 10627 دالتون على التوالي. B و A التقريبية للمركبينتينات


Article
Biochemical Study of Dipeptidylpeptidase-4 from Normal Human Serum
دراسة كيموحيوية لإنزيم الداي ببتيدايل ببتيديز-4 من مصل دم شخص طبيعي

Authors: Tareq Y. Ahmad طارق يونس أحمد --- Fadwa KH. Tawfeeq فدوى خالد توفيق --- Safaa A. AL-Ameen صفاء عبد العزيز الامين
Journal: Rafidain journal of science مجلة علوم الرافدين ISSN: 16089391 Year: 2018 Volume: 27 Issue: 2E Pages: 32-41
Publisher: Mosul University جامعة الموصل

Loading...
Loading...
Abstract

The research includes partial purification of dipeptidylpeptidase-4 (DPP-4) from serum of normal person aging 14 years in Mosul city. Gel filtration of dialysate precipitate produced by 50% ammonium sulphate saturation has given two major proteinous components. One of them (peak A) possesses a high DPP-4 activity using sephedex G-100. The apparent molecular weight of the isolated DPP-4 was 176.6 KD. High performance liquid chromatography HPLC revealed a single peak à at retention time 5.829 min by application the top of peak A which was isolated from gel filtration. Maximum activity of DPP-4 was obtained using 0.1 M Tris-HCl buffer at pH 8, 40°C, 4 mM of gly-pro-p-nitroanilide hydrochloride as a substrate. The concentration 0.35 mg/ml partially purified DPP-4 was used for next experiments. Maximum velocity (Vmax) was 50 μM according to Line Weaver-Burk plot while Michaelis–Menten constant (Km) was 0.5 mM. Mercuric chloride and strontium chloride hexahydrate at 5 mM revealed maximum inhibitory effect of DPP4 activity by 30.2% and 42.9% respectively.

تضمن البحث تنقية انزيم الداي ببتيدايل ببتيديز-4 من مصل دم شخص طبيعي بعمر14 سنة من مركز مدينة الموصل.باستخدام تقنية الترشيح الهلامي تم الحصول على حزمتين بروتينيتين رئيسيتين للراسب الناتج من الترسيب بكبريتات الامونيوم المشبع وبنسبة 50% والمطبق عليه عملية الديلزة. اظهرت الحزمة البروتينية A فعالية عالية لإنزيم الداي ببتيدايل ببتيديز-4 وقدر الوزن الجزيئي التقريبي لها وكان بحدود 176.6كيلو دالتون. استخدمت تقنية كروماتوغرافي السائل عالي الاداء على الحزمة Ã وكان زمن الاحتباس 5.829 دقيقة. بعد ذلك تم تحديد الظروف المثلى لعمل الإنزيم المنقى جزئيا واظهرت النتائج ان الإنزيم اعطى اعلى فعالية باستخدام المحلول المنظم Tris HCl بتركيز.10 مولاري وعند الاس الهيدروجيني 8 عند درجة حرارة 40 درجة مئوية وتركيز 4 ملي مولار من مادة كلايسين –برولين-بارانتروانيليد هيدروكلوريد بوصفها مادة اساس. أستخدم التركيز 0.35 ملغم بروتين/مل كمصدر للإنزيم للتجارب الاخرى .وبتطبيق علاقة لاين ويفر-برك وجد ان السرعة القصوى (Vmax) التي يعمل بها الانزيم تساوي 50 وحدة انزيمية/لتر وان قيمة ثابت ميكلس– منتن (Km) كانت0.5 ملي مولار. كذلك اظهرت النتائج ان هناك مركبات كيميائية لها تأثير تثبيطي لفعالية الإنزيم وهي كلوريد الزئبقيك وكلوريد السترونتيوم سداسي الماء بتركيز 5 ملي مولار بنسبة (% 42.9,% 30.2) على التوالي.


Article
Purification and determination the molecular weight and study the kinetic properties of Glucose-6-phosphate dehydrogenase from Diabetic patients
دراسة الخصائص الحركية لإنزيم [G6PD] المستخلص والمنقى من مرضى السكري وتقدير الوزن الجزيئي له

Loading...
Loading...
Abstract

This study was conducted to purifity Glucose 6-phosphate dehydrogenase from diabetic patients by gel filtration technique on Sephadex G100 and determine the molecular weight of enzyme, concentration and kinetic constant [Km, Vmax], study the effect of optimum temperature, substrate, pH. The study includes [60] patients with diabetes mellitus and [60] healthy individual as control. The activity of G6PD was measured after precipitated by [75%] Ammonium Sulfate concentration, using [Tris-HCl] buffer at pH 8.2. The specific activity was calculated [21.5UImg], total activity [706.8UI], number of purification [3.45] enzyme yield [23.188%] and enzyme activity [17.67UIml]. and the molecular weight were [57.82] k.D. The effect of substrate concentration was found to be increased with increasing substrate concentration. The optimum pH was found to be [8.4] and the optimum temperature was [38C]. Michaelis- Menten [Km] value for the enzyme was [3.33mM] and Vmax value was [0.263IUml ].

تنقية إنزيم [G6PD] من مرضى السكري باستخدام تقنية بسيطة هي الترشيح الهلامي بواسطة هلام السيفادكس G-100 وتقدير الوزن الجزيئي للأنزيم في المرضى ومقارنته مع الوزن الجزيئي ومقارنته مع النسبة الطبيعية للوزن الجزيئي وكذلك تقدير الثوابت الحركية للإنزيم وهي ثابت ميكاليس- منتن Kmوقيمة السرعة القصوى Vmax وتقدير قيم تركيز المادة الأساس ودرجة الحرارة والأس الهيدروجيني الأمثل للإنزيم. تتضمن الدراسة 60 عينة من مرضى السكري و60 عينة من الأصحاء حيث تم قياس الكلوكوز وفعالية الإنزيم في المصل وأظهرت النتائج ارتباط معنوي بين نقصان فعالية الإنزيم ومرض السكري وكذلك تم ترسيب الإنزيم باستخدام كبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع [75%] ثم بعد ذلك تم تنقية الإنزيم بتقنية الترشيح الهلامي على هلام السيفادكس G-100 واعتمادا على الطريقة ذاتها تم تقدير الوزن الجزيئي للإنزيم. تم حساب الفعالية النوعية [21.5وحدة/ملغم والفعالية الكلية [706.8 وحدة] وعدد مرات تنقية بلغت 3.45مرة والحصيلة الإنزيمية [23.188%] والفعالية الإنزيمية [17.67وحدة/مل]. وتم قياس الوزن الجزيئي باستخدام نفس الطريقة وكان مقدار الوزن الجزيئي للإنزيم [57.82] كيلو دالتون وتم قياس تأثير زيادة تركيز المادة الأساس على فعالية الإنزيم فوجد إن فعالية الإنزيم تزداد بزيادة تركيز المادة الأساس إلى أن تبلغ مستوى ثابت تتوقف فيه الفعالية عن الزيادة مهما زاد تركيز المادة الأساس وأظهر الرسم البياني بينهما بشكل قطع زائد وتم دراسة تأثير الأس الهيدروجيني على الإنزيم فوجد إن الأس الهيدروجيني الأمثل هو [8.4] وتم دراسة تأثير درجة الحرارة على فعالية الإنزيم فوجد إن درجة الحرارة المثلى لعمل الإنزيم هي [38] وتم تقدير الثوابت الحركية فوجد إن قيمة ثابت ميكاليس – منتن هو [Km=3.33mM] وكانت قيمة السرعة القصوى [Vmax=0.263IUml] .

Listing 1 - 10 of 16 << page
of 2
>>
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (16)


Language

Arabic (11)

English (5)


Year
From To Submit

2019 (1)

2018 (3)

2017 (2)

2016 (1)

2015 (1)

More...