نفذت هذه الدراسة لغرض عزل وتشخيص البكتريا المحللة للبروتين والمنتجة لانزيم البروتيز وتشخيصها من بعض العينات السريرية للمرضى المراجعين لمستشفيات مدينة الرمادي ، وتحديد الظروف المثلى لإنتاج إنزيم البروتيز وتنقيته ودراسة خصائص الإنزيم والظروف المثلى لعمله. واستعمل للعزل اوساط زرعية مثل وسط اكار الماكونكي ووسط الجكليت اكار واكار الدم ووسط الجيلاتين الصلب فضلا عن الفحوصات المورفولوجية والكيموحيوية ، واختبرت قابلية العزلات على انتاج انزيم البروتيز باستعمال وسط الجيلاتين الصلب ووسط مسحوق قرون الاغنام ووسط مسحوق كوالح الذرة وتميزت العزلات بقدرتها على انتاج انزيم البروتيز مع وجود اختلاف في كفاءة هذه العزلات ، انتخبت العزلة المحلية p. aeruginosa المعزولة من الحروق لأنها الاكفأ في انتاج الانزيم. واختبرت كفأتها في مقاومة المضادات الحيوية ، واظهرت العزلة مقاومة لأغلب المضادات الحيوية المستعملة في الدراسة ، ولاسيما مضادات البيتا لاكتام والتتراسايكلينات ومجموعة الامينوكلايكوسيد ، الا انها كانت حساسة لمضاد الببراسلين . وحددت الظروف المثلى لإنتاج انزيم البروتيز ، اذ كان الوسط الزرعي مسحوق قرون الاغنام ، ذو الاس الهيدروجيني (7) ، والملقح بـ(10 6 x 1) خلية / مللتر مع الحضن لمدة (24) ساعة في (32) مْ هي افضل الظروف لإنتاج الانزيم . وأظهرت الخطوات المتسلسلة تنقية إنزيم البروتيز المنتج من العزلة المحليـة P. aeruginosa بالترسيب بملح كبريتات الامونيوم بنسبة إشباع تراوحت بين(80-20%) وان النسبة 60% هي الأفضل في الترسيب إذ أعطت فعالية نوعية قدرها 32.03 وحدة/ملغم بعدد مرات تنقية 1.60مرة وحصيلة إنزيمية33.69%, وأدى إمرار المحلول الإنزيمي على عمود المبادل الأيوني DEAE-Cellulose إلى زيادة نقاوة الإنزيم إذ ارتفعت الفعالية النوعية إلى 57.68 وحدة/ملغم وعدد مرات تنقية إلى 2.89مرة وبحصيلة إنزيمية 35%. جمعت الأجزاء التي أظهرت فعالية إنزيمية عالية وأخضعت لعملية الفصل بطريقة الترشيح الهلامي بعمود هلام Sephadex-G200أعطت هذه الخطوة فعالية نوعية 34.87وحدة/ملغم وعدد مرات تنقية 1.74مرة وحصيلة إنزيمية مقدارها 32.16%.وبينت نتائج توصيف الإنزيم ان الرقم الهيدروجيني الأمثل ودرجة الحرارة المثلى لفعاليته بلغت 6.5 و 45 م على التوالي, وأعطى الإنزيم أعلى فعالية إنزيمية عند حضنه عند الرقم الهيدروجيني ودرجة الحرارة أعلاه.

انزيم البروتيز_ بكتريا الزائفة الزنجارية _ انتاج وتنقية الانزيم

This study was aimed to extract the volatile oils from two medicinal plants (Mentha piperia, and Vitexagnus-castus)and evaluation of biological activity against the bacteria Pseudomonas aeruginosa isolated from burn injuries that collected from patients in Al Hussein Hospital / Karbala .The present experimental in vitro study was carried out to evaluate the antibacterial activities of essential oils on the isolates was determined by disc diffusion method . Microdilution broth susceptibility assay was used in order to determine the MICs of essential oils. The essential oils of M. piperia had strong antimicrobial activity (inhibition zone22.5–10 mm) when 0.5µl and 0.25 µl where as V. agnus castus had moderate antibacterial activity (inhibition zone reached 12.5mm at 0.5 µl) .According to the results, essential oils exhibited moderate to strong antibacterial activity against the tested bacteria

هدفت الدراسة استخلاص الزيوت الطيارة من نباتي النعناع وكف مريم ومن ثم تقييم الأثر التثبيطي ضد بكتريا الزائفة الزنجارية المعزولة من خمج الحروق من المرضى الراقدين في مستشفى الحسين (عليه السلام ) في كربلاء. تم اختبار هذه العزلات وتحديد التركيز المثبط الادنى لزيت النعناع وزيت كف مريم . من خلال النتائج لوحظ ان تلك الزيوت اعطت فعالية ضد ميكروبية عالية الى متوسطة وقد بلغت اقطار التثبيط لزيت النعناع 22.5-10ملم عند تركيز 0.5 مايكروليتر في حين بلغت 12.5 ملم عند تركيز 0.5 مايكروليتر لزيت كف مريم . وعليه فان زيت النعناع يكون ذو تأثير اقوى من زيت كف مريم

Burn --- p.aeruginosa --- M.piperia --- V.agnus-castus --- الحروق --- الزائفة الزنجارية --- نبات النعناع --- نبات كف مريم

Wounds, burns, urinary tract infection (UTI) and ear infections are often difficult to treat due to various bacterial pathogens. Pseudomonas aeruginosa is one of the common invaders of this infection . Precise diagnosis of this etiological agent in this infection is of critical importance particularly in treatment of problematic cases. The existing diagnostic methods have certain limitations particularly related to specificity. This study was aimed to reliable diagnosis of P. aeruginosa from samples enrichment in nutrient broth PCR was used to detect P. aeruginosa with two primers targeted one gene saved in housekeeping gene (gyr b). The first primer (gyr b190) amplified 190-bp fragment , whereas other bacteria did not yield any 190-bp fragment. The specificity of the assay was 100% . PCR method depending on primer gyr b190 is rapid and more accurate than other diagnostic methods for the identification of P. aeruginosa strains, and it can be used to detect P. aeruginosa from clinical samples without using a selective medium or additional biochemical tests. While second primer gyr b222 amplified gyr b with fragment 222bp only when using a selective medium, but in nutrient broth get false negative.

الجروح، والحروق، والتهاب المسالك البولية (UTI)، والتهاب الأذن غالبا ما يصعب علاجها ويرجع ذلك الى مختلف مسببات الأمراض البكتيرية. الزائفة الزنجارية Pseudomonas aeruginosa هي واحدة من الغزاة المشتركة لهذه العدوى. التشخيص الدقيق لهذا العامل المسبب للمرض في هذه الالتهابات ذو أهمية حاسمة خاصة في علاج الحالات المستعصية . الأساليب التشخيصية الموجودة لديها بعض القيود المتعلقة بشكل خاص للخصوصية. وتهدف هذه الدراسة إلى تشخيص موثوق للزائفة الزنجارية من عينات نميت في وسط معزز للنمو(Nutrient broth). تم استخدام تفاعل البلمرة المتسلسل PCR للكشف الزائفة الزنجارية مع اثنين من البوادء استهدفت أحد الجينات المحفوظة (Housekeeping genes) وهو (gyr b gene ). البادء الأول (gyr b190) ضخم قطعه قدرها 190 bp، في حين أن البكتيريا الأخرى لم تسفر عن أي قطعة عند 190 bp. كانت خصوصية الفحص 100٪. طريقة PCR التي اعتمدت على البادء gyr b190 سريعة وأكثر دقة من الطرق التشخيصية الأخرى لتحديد سلالات الزائفة الزنجارية ، ويمكن استخدامه للكشف عن الزائفة الزنجارية من العينات السريرية دون استخدام وسيلة انتقائية أو الاختبارات البيوكيميائية إلاضافية. في حين البادء الثاني gyr b222 ضخم قطعه قدرها 222bp فقط عند استخدام اوساط زرعية انتقائية ، ولكن في الاوساط المعززة للنمو اعطى نتيجة سلبية كاذبة.

Pseudomonas aeruginosa --- PCR --- clinical --- الجينات المحفوظة gyrB، الزائفة الزنجارية، تفاعل البلمرة المتسلسل ، سريري.

This study was conducted for the synthesis of silver nanoparticles by using olive leaves aqueous extract and evaluate its antibacterial activity against Pseudomonas aeruginosa in vitro. The synthesis and characterization of silver nanoparticles was confirmed by Ultra Violet Visible – spectrophotometer and Scanning Electron Microscopy. Well diffusion method was used to show the antibacterial action of silver nanoparticles against Pseudomonas aeruginosa in vitro in comparison with standard antibacterial silver sulfadiazine by using different concentrations of each agent ranged from 12.5-200 μg/ml. The results of this study showed it possible to produce silver nanoparticles in eco-friendly and easy process and UV-Visible absorption spectra of the silver nanoparticles revealed maximum absorbance at 420 and 430 nm. The Scanning Electron Microscopy analysis demonstrated the mean of the silver particles diameter was 26 nm. The antibacterial findings of the synthesized silver nanoparticles against Pseudomonas aeruginosa in vitro showed that the silver nanoparticles were more effective than silver sulfadiazine against Pseudomonas aeruginosa. It could be concluded that olive leaves extract can be used effectively in the production of silver nanoparticles and these synthesized nanoparticles had considerable antibacterial activity against Pseudomonas aeruginosa in vitro.

أجريت هذه الدراسة لتخليق دقائق الفضة النانوية باستعمال أوراق الزيتون وتحديد الفعالية المضادة لجراثيم الزائفة الزنجارية (Pseudomonas. aeruginosa) في المختبر. تم توصيف دقائق الفضة النانوية المخلقة حيوياً بواسطة جهاز المطياف الضوئي والمجهر الإلكتروني الماسح .وتم تحديد فعاليتها المضادة لجراثيم الزائفة الزنجارية بواسطة طريقة الانتشار بالأطباق مقارنة مع المضاد الحيوي سلفاديازين الفضة باستعمال تراكيز مختلفة لكل منهما تراوحت بين 12.5-200 مايكرغرام/مل. أظهرت نتائج هذه الدراسة أنه بالإمكان تخليق دقائق الفضة النانوية بطريقة سهلة وصديقة للبيئة، كما ان أقصى امتصاص لأطياف هذه الدقائق كان عند 420 و430 نانومتر بجهاز المطياف الضوئي. كما أظهر تحليل المجهر الالكتروني الماسح ان متوسط قطر هذه الدقائق كان 26 نانومتر. وأوضحت نتائج فعالية الفضة النانوية المضادة لجراثيم الزائفة الزنجارية في المختبر ان هذه الدقائق كانت أكثر فعالية من سلفاديازين الفضة ضد هذه الجرثومة. يمكن أن نخلص إلى أن مستخلص أوراق الزيتون يمكن استعماله بشكل فعال في إنتاج دقائق الفضة النانوية، وكان لهذه الجسيمات النانوية المخلقة نشاطا فعالا مضاد لجرثومة الزائفة الزنجارية في المختبر.

Silver nanoparticles --- Pseudomonas aeruginosa --- Antibacterial activity --- : دقائق الفضة النانوية، الزائفة الزنجارية، الفعالية المضادة للجراثيم

Water samples were collected from output of water for Al-Wahda plant where located in al-karrada area in Baghdad city to study water contamination with bacteria, fungi and Algae. The study lasted one year started on August, 2016 to July,2017.Results were acquired according to two tests performed, the first is biological test included total coliform,E.coli, pseudomonas aeruginosa, total fungi, Diatom and non Diatom Algae and the second is physiochemical test included temperature, turbidity and residual chlorine. The results of bacteria were within the permitted specification in the Iraqi standards no. 14/2270 for the year 2015 except August was exceeded the permitted standard for total coliform, it was 1.1< cell/100 ml.Total Fungi, Diatom and non Diatom Algae were exceeded the permitted standard for Syrian potable water no 45/2007. Total fungi between 0-10 cfu/ml, Diatom algae value between 7533-16300 cell/l and non diatom between 6533-39200 cell/l. Temperature for water 10.4-33.33 oC, turbidity value between 3.4-57 NTU and residual chlorine between 0.9-4.98 mg/l.

جُمعت عينات مياه من مصدر التجهيز الرئيسي لمشروع ماء الوحدة الواقع في منطقة الكرادة في مدينة بغداد لغرض دراسة تلوث مياه الشرب بالبكتريا والفطريات والطحالب، وكانت مدة الدراسة سنة كاملة ابتداءاً من شهر آب/2016 ولغاية تموز/2017، وقد تم الحصول على النتائج وفقا ً لنوعين من الفحوصات الأولى بايولوجية تضمنت بكتريا القولون الكلية والأشريكية القولونية والزائفة الزنجارية والفطريات الكلية والطحالب الدايتومية وغير الدايتومية، والثانية فيزوكيميائية تضمنت درجة الحرارة والعكارة والكلور المتبقي في مياه الشرب. أظهرت نتائج معدلات البكتريا في مياه الشرب لمشروع الوحدة مطابقتها الحدود المسموح بها في المواصفة القياسية العراقية رقم 14/2270 لسنة 2015 خلال مدة الدراسة اذ كانت أعداد بكتريا القولون الكلية والاشريكية القولونية <1.1 خلية/ 100 مل وبكتريا الزائفة الزنجاريةZero خلية لكل وحدة/ مل، في جميع أشهر الدراسة عدا شهر آب اذ بلغت أعداد بكتريا القولون الكلية 1.1 خلية/ 100 مل، اما بالنسبة لأعداد الفطريات الكلية والطحالب الكلية فقد كانت خارج الحدود المسموح بها لمواصفة مياه الشرب السورية رقم 45 /2007 اذا تراوحت أعداد الفطريات في مياه الشرب بين (0-10) خلية لكل وحدة/ مل، واعداد الطحالب الدايتومية بين (7533-61300) خلية/ لتر وغير الدايتومية بين (6533-39200) خلية/ لتر، اما درجة حرارة الماء فقد تراوحت بين (10.4-33.33)م، وقيم العكارة كانت بين (3.4-57) نفثالين وحدة كدرة وقيم الكلور المتبقي كانت بين (0.9- (4.98ملغم/ لتر. وعلى ضوء النتائج التي تم الحصول عليها تبين ان مشروع الوحدة كان ملوثاً بالفطريات والطحالب حسب مواصفة مياه الشرب السورية التي تنص على خلو مياه الشرب من الفطريات والطحالب.

Total coliform --- E.coli --- Pseudomonas aeruginosa --- Fungi --- Algae. --- القولون الكلية، الأشريكية القولونية، الزائفة الزنجارية، الفطريات، الطحالب.