In this study a new valve B had been designed and constructed in the analytical laboratory by using local available facilities and resources. This was applied to determine the total phenols (TP) in plants extracts using gallic acid (GA) as a standard. The results were compared to those obtained from a standard valve A. It was found that under the optimized experimental conditions and using calibration graphs with range of 1.0 - 40.0 mgL-1 (r2=0.9986) and 1.0–50.0 mgL-1 (r2=0.9993) for the valves A and B respectively, the limit of detection (LOD) in the aqueous solution was 0.05 mg.L-1 for both valves. Total phenol content and antioxidant activity of methanol extracts from mushroom were determined and compared to those values obtained for gallic acid. Flow injection analysis (FIA) determination of the TP content was performed using the Folin-Ciocalteu Reagent (FCR), while antioxidant activity was measured by reaction with 1,1-diphenyl-2-picry RCydrazyl radical (DPPH assay). The values of phenolic compounds content and antioxidants activity which were determined by valve B were notably higher than these in valve A. Finally, both valves A and B showed high sensitivity, flexibility, extend range of linearity, rapidity and ease of use. Also their material were not expensive, therefore using them is successful to determine the total phenols and antioxidants.

تم تصميم وتركيب صمام جديد (ب) لمنظومة الحقن الجرياني في مختبر الكيمياء التحليلية باستعمال مواد متوفرة تجاريا, وقد استعمل هذا الصمام في تقدير الفينولات الكلية ومضادات الاكسدة في المستخلصات النباتية باستخدام حامض الكاليك كمحلول قياسي. تم مقارنة النتائج مع تلك المستحصلة من استعمال الصمام (أ) وتحت نفس الظروف التجريبية للصمامين حيث وجدت الخطية ضمن مدى (1.0-40.0 mgL-1 ) (R2 = 0.9986 ( و( 1.0 -50.0 mgL-1 ) (R2 = 0.9993 ) للصمامين (أ) و (ب) على التوالي, مع حد كشف ((LOD = 0.05 mgL-1 لكلا الصمامين. المحتوى الكلي للفينولات وفعالية مضادات الاكسدة للمستخلص الكحولي للفطر قدرت وتمت المقارنة بين النتائج المستحصلة لحامض الكاليك حيث تم تقديرها باستعمال تقنية الحقن الجرياني واستعمال كاشف فولن للكشف عن الفينولات الكلية بينما استعمل كاشف (DPPH ) لقياس فعالية الاكسدة وقد لوحظ ان قيم المركبات الفينولية ومضادات الاكسدة التي قيست باستعمال الصمام (ب) كانت نوعا ما اعلى من تلك المقاسة باستعمال الصمام (أ). في النهاية كلا الصمامين اظهرا مرونة وحساسية عالية, مدى واسع من الخطية, سهولة في الاستعمال, سرعة في القياس كذلك فان المواد الاولية المستعملة في تركيب الصمامين متوفرة ورخيصة الثمن ولهذا تم استعمالها بنجاح في تقدير الفينولات الكلية ومضادات الاكسدة.

FIA --- Folin-Ciocalteu Reagent --- DPPH assay --- mushroom --- total phenols --- الفينولات الكلية --- مضادات الاكسدة --- تحليل الحقن الجرياني --- تصميم صمام حقن جرياني --- كاشف فولن

Background: Polyphenols are considered an important compound with a wide range of medical activities. Several plant families are rich with phenolics. Attempts have been carried out to increase them at the intact and cellular levels.Objective: The current study aimed to increase the production of polyphenols in Coleus blumei plant using two precursors at the whole and tissue culture levels. Materials and methods: Two precursors namely Tyrosine and phenylalanine at the concentrations 0.20 , 0.25 or 0.30 g.l-1 were added either by spraying on the vegetative parts or supplemented to the tissue culture medium. Total phenols were estimated in the whole plant and compared with the total phenolic content in callus tissues. They were estimated by Folin-ciocalteu and spectrophotometric methods. Induction and maintenance of Coleus callus cultures were carried out on Gamborg medium (B5) for 21 days supplemented with the growth regulators 2,4 dichlorophenoxy acetic acid (2-4-D) at 0.8 mg.l-1 , 2 mg.l-1 Benzyl adenine (BA) and 0.5 mg.l-1 Naphthalene acetic acid (NAA). Stem explants were used as a source for callus induction. Results: Results showed a significant increase in both fresh and dry weights of the fresh compared with control of intact plants in vivo after treatment with the two precursors. The fresh weight of shoots increased up to 15.9 g at 0.30 g.l-1 of Tyrosine treatment compared with the control which recorded 11.05 g. while the fresh weight of the shoots recorded 13.470 g at 0.30 g.l-1 after treatment with phenylalanine compared with the control which recorded 11.05 g. The dry weight of the shoots increased as well up to 3.127 g at 0.30 g.l-1 of Tyrosine treatment compared with control 1.837 g while the dry weight of shoot recorded 2.880 g at 0.30 g.l-1 phenylalanine treatment compared with the control 1.837g. Despite the slight increase in both root fresh and dry weights at 0.30 g.l-1 due to the treatment with Tyrosine or phenylalanine ,such increments were not significantly different with control. Total poly phenols in callus cultures accumulated more compared with mother plants after treatment with precursors. Phenols were also measured in both callus tissue and liquid medium then compared with the whole plant and control treatment. The highest value was recorded in callus cultures supplied with Tyrosine recording 348.36 µg.l-1 at 0.20 g.l-1 of Tyrosine while phenylalanine treatment recorded the highest weight 293.98 µg.l-1 when applied at 0.30 g.l-1 in both liquid medium and callus tissues. The intact plants however recorded the highest mean in total phenols in plants grown in vivo with mean values 68.58, 66.53 µg.l-1 for Tyrosine and phenylalanine respectively.Conclusion: It is concluded that both precursors are good candidates for increasing total phenols in Coleus blumei. Plant tissue culture techniques can be utilized commercially for this purpose.

خلفية الموضوع: تعتبر الفينولات المتعددة مركبات مهمة ذات مدى واسع من الاهمية الطبية. العديد من العوائل النباتية تكون غنية بالفينولات. بذلت المحاولات لغرض زيادة هذه المركبات علي مستوى النبات الكامل و المستويات الخلوية. الهدف من البحث: نفذت الدراسة الحالية بهدف زيادة انتاج بعض مركبات الايض الثانوي (الفينولات الكلية) في المجموع الخضري لنبات السجاد Coleus blumei وبغية زيادة انتاج هذه المركبات وظفت اثنان من البوادئ (الحامضيين الامينين) فنيل الينين وثايروسين و استخدمت على مستوى كل من النبات الكامل والمستويات الخلوية في المزارع النسيجية.المواد و طرائق العمل: استخدم الثايروسين و الفنيل النين بالتراكيز 0.20 ,0.25 , 0.30 غم. لتر-1 لتحقيق هدف الدراسة. تم تقدير الفينولات الكلية في النبات الكامل و مقارنتها مع محتوى الفينولات الكلية في انسجة الكالس. تم تقدير الفينولات بطريقة (Folin- ciocalteu) بجهاز الطيف الضوئي Sepectrophotometer. استحث الكالس و اديم نبات السجاد على وسط (Gamburg medium B5) لمدة 21 يوم و بفترات ضوئية 16 ساعة ضوء و 8ساعات ظلام و بشدة اضائة 1000 لوكس, و جهز بمنظمات النمو (0.8) ملغم. لتر-1 (2, 4- dichlorophenoxy acetic (acid و 2 ملغم. لتر-1 benzyle adenine و 0.5 ملغم. لتر-1 من Naphthalene acetic acid باستعمال اجزاء الساق لنبات السجاد كمصدر لنشوء الكالس.النتائج: اشارت النتائج الى زيادة معنوية في كل من الوزن الطري و الجاف للمجموع الخضري من النبات مقارنة مع معاملة السيطرة في النبات الاصل بعد معاملته بكلا البادئين. بعد اضافة البادئ ثايروسين ازداد الوزن الطري للمجموع الخضري الى 15.900 غم عند تركيز 0.30 غرام. لتر-1 مقارنة مع معامل السيطرة (11.05) غم في حين ازداد الوزن الطري للمجموع الخضري الى 13.470 غم عند تركيز 0.30 غم. لتر-1 بعد اضافة بادئ الفنيل الينين مقارنة مع معامل السيطرة (11.05) غم. اما الوزن الجاف للمجموع الخضري فقد ازداد الى 3.127 غم عند تركيز 0.30 غم. لتر-1 بعد اضافة بادئ الثايروسين مقارنة بمعامل السيطرة 1.837غم. في حين ازداد الوزن الجاف للمجموع الخضري الى 2.880 غم عند تركيز 0.30 غم.لتر-1 بعد اضافة بادئ فنيل الينين مقارنة مع معامل السيطرة 1.837 غم. تفوقت المزارع النسيجية لنبات السجاد في المحتوى الفينولي الكمي على انسجة النبات الكامل بعد المعاملة بكلا البادئين ثايروسين و فنيل الينين، قدرت الفينولات الكلية في كل من انسجة الكالس و الوسط السائل للمعلق الخلوي اذ سجلت اعلى قيمة للفينولات الكلية في مزارع الكالس المزودة بالثايروسين وصل الى 348.36 مايكروغرام.لتر-1 من الفينولات الكلية عند تركيز 0.20 غم.لتر-1 اما المعاملة بحامض فنيل الينين قد سجل اعلى قيمة للفينولات الكلية عند تركيز 0.30 غم.لتر-1 بمقدار 293.98 مايكروغرام.لتر-1 في كل من الوسط السائل و انسجة الكالس. سجلت النباتات الكاملة للسجاد في الحقل اعلى قيم للفينولات الكلية بلغت 68.58, 66.53 مايكروغرام.لتر-1 لكل من الثايروسين و الفنيل الينين على التوالي.الاستنتاج: نستنتج بانه كلا البايئين المستخدمين هما عاملين جيدين لزيادة الفينولات الكلية في نبات Coleus bumei. تقنيات الزراعة النسيجية في النبات يمكن ان تستخدم تجاريا لهذا الغرض.

Coleus blumei --- Tyrosine --- Phenylalanine --- Precursors --- fresh and dry weights --- total phenols --- in vivo --- in vitro. --- i، ثايروسين، فنيل الينين، البوادئ ، الاوزان الطرية و الجافة، الفينولات الكلية، داخل الجسم الحي، خارج الجسم الحي.