Lipopolysaccharide was extracted from invasive local isolate Klebsiella pneumonia previously isolated from neonate blood samples. LPS was extracted by phenol hot water method and partial purified by gel filtration chromatography on sepharose CL-6B gel. The results showed that the percentage of carbohydrate amount in the partially purified LPS extract was 9.5% while the percentage of protein in the same extract was 0.06% with no nucleic acids. Intravenous administration of (0.1and1)µg/kg of partial purified LPS in the rabbit led to increase body temperature in dose dependent manner (38.8° and 40.2°)C respectively. Intraperitonial administration with the dose 10µg/mouse cause an increasein serum cytokine (IL-1α, IL-6 and TNFα) level after 4 hr of the injection. Conclusion: LPS extracted from pathogenic isolate of K.pneumoniae with high purity, has immunomodulator effect by increasing serum cytokine (IL-6 & IL-1α) level which play a role in the elevation of body temperature, and TNFα after 4hr of intraperitonial administration of LPS.

استخلص متعدد السكريد الشحمي باستعمال طريقه الفينول الساخن المحوره من عزله محليه لبكتريا K.pneumoniae من الدم. اجريت التنقية باستخدام عمود الترشيح الهلامي sepharoseCL-6B. اظهرت النتائج ان المستخلص على درجة من النقاوة ولم تتاثر الفعالية بعوامل التنقية وان كمية الكربوهدرات والبروتين كانت %9.5 و%0.09 على التوالي. اظهرت النتائج ان حقن جرعتين من متعدد السكريد الشحمي المنقى جزئيا بمقدار g/kgµ(0.1 و1) داخل الوريد في الارنب ادى الى رفع درجة الحرارة جسم الارنب الى ( 38.8 و 40.2) درجة مؤويه على التوالي. اما حقن الفئران داخل البريتون بالجرعة g/mouseµ 10 ادى الى زياده معنوية في مستوى المدورات الخلويه في المصل ((IL-1α,IL-6 and TNF-α مقارنة بالسيطرة بعد 4 ساعات.الاستنتاجات ان متعدد السكريد الشحمي المعزول من الكلبسيلا الرئويه الغازية له القابليه على تحوير الاستجابه المناعية ورفع السايتوكينات في المصل، والذي يؤدي بدوره الى رفع درجة حرارة الجسم بعد 4 ساعات.

K.pneumoniae --- LPS --- cytokine

Total of 46 isolates ofKlebsiella pneumoniae were collected from patients attending (Al-Yarmook Hospital and Education Labs / medical city), and isolates were re-identified,depending on morphology and biochemical tests. Disk diffusion method was employed to determine antibiotic susceptibility of forty six isolates by using eleven antibiotics.The results revealed the sensitivity of six isolates (9.3%) to Imipenem and Meropenem. On the other hand the isolates were showed 23.9% resistant against Ciprofloxacin, while some isolates shown higher resistant against several antimicrobial agents such as 65.2%, 69.0% for Amikacin and Cefepime consequently , 71.1%, 71.7 % for Amoxicillin -Clauvulanic acid and Gentamicin and 82.6% against Piperacillin , Nitrofurantoin and Ceftazidime.The isolates also appeared high level of resistance against Cefotaxime at a percentage 91.3% .Depending on the obtained results 6 isolates were selected assigned (K21, K32, K33, K37, K38, K43) for detection of blaTEM,blaSHV, blaKPC and AmpCbecause of its resistance of almost chosen antibiotics.The selected isolates were PCR-positive for blaTEM which showed bands in 209 pb.,on the other hand the resultrevealed that the isolates K33,K32possesencoding to blaSHVof 509pbin size,. In regard to blaKPC gene only K37 (16%)gave 811pb. All selected isolate gave negative results to AmpC.The selected isolates were detected of beta-lactamase productionby using acidimetric tests (tube method) , all isolates gave positive result.

جمعت ( 46) عزلهلKlebsiellapneumoniae منمستشفى اليروموك والمختبرات التعليميه في مدينه الطب . اعيد تشخيصها اعتمادا على الاختبارات الكيموحيوية .اظهرت نتائج اختبارحساسيه العزلات تجاه احدى عشر مضاد حيوي وتضمنت مقاومه 9.3% لكل منImipenem وMeropenemو3.9% مقاومه لمضادCiprofloxacinفضلا عن امتلاك العزلات مقاومه عاليه للعديد من المضادات شملت 65.2% لمضادAmikacinو69.0% لمضاد Cefepime و71.1% لمضاد Amoxicillin-Clavulanic acidو71.7 %لمضاد Gentamicin و82.6% لكل من Piperacillin ,itrofurantoinوCeftazidimeفي حين اظهرت العزلات91.3% مقاومه للمضاد Cefotaxime . وبناءا على نتائج اختبار الحساسيه اختيرت 6عزلات(K21, K32, K33, K37, K38, K43) والتي تمثل الاكثر مقاومه لمعظم المضادات البكتيريه المستعمله . تم استخدام تقنيه PCR للتحري عن امتلاك العزلات 6 المختاره على المورثات المشفرهbla TEM blaSHV, blaKPC,AmpC. اظهرتالعزلات جميعها امتلاكهاللمورث المشفرbla TEM ذو حجم 209زوج قاعديوامتلاك العزلتين 33,32 للمورث المشفرblaSHVذو حجم 509 زوج قاعدي واظهرت عزله واحده امتلاكها للمورث المشفر bla KPC ذوحجم 811 زوج قاعديولكن جميع العزلا ت لم تمتلك المورث المشفرAmpC.اختبرت قابليه العزلاتعلى انتاجها لانزيم البتالاكتميز باستخدام طريقه acidimetric tests (tube method) اظهرت النتائج ان جميع العزلات منتجه لانزيم البيتالاكتميز.

K. Pneumoniae --- antibiotics resistance --- genes.

Klebsiella pneumoniae causes a wide range of bacterial diseases like pneumonia, UTI and sepsis. Therefore, this study was done to assess the prevalence and molecular characteristics of K. pneumoniae in 24 samples of men and women isolated from Iraqi patients which was suffering from urinary tract infection (UTI) compared with (10) of healthy individuals. All samples were collected from Educational laboratories of Medical city/Iraqi Health Ministry. The samples were screened for the presence of kfu and k2A genes through PCR. The results of this study represented by (7 out of 24) isolates percent with (29.17%) positive for kfu gene and (9 out of 24) isolates (37.5%) were positive for k2A gene while the other (8) isolates were none of these genes. The two genes revealed significant differences between them (p< 0.5), so as with healthy group (p< 0.01). The study concluded that two genes kfu and k2A may affect on pathological of K. pneumoniae. The aim of this study represented by detection of kfu (iron uptake system gene) and k2A genes in patients with UTI which have a role in the pathogenicity of K. pneumoniae isolates.

K. pneumoniae --- kfu and k2A genes --- UTI

Background and objective: The increase in the incidence of Beta-lactam resistance in Gram-negative bacteria has become a main clinical problem worldwide that limits therapeutic options. The production of extended-spectrum blactamases is the major source of resistance to newer beta-lactam antibiotics in Enterobacteriaceae. This study aimed to check the presence of extended-spectrum β-lactamase producing K. pneumoniae and E. coli and the evaluation of ESBL among those isolates.Methods: A total of 120 E. coli and K. pneumoniae clinical isolates were obtained from Rizgary Teaching Hospital in Erbil City, Iraqi Kurdistan Region, during the first six months of 2016. All isolates were identified and checked for the production of ESBL using Vitek 2 automated system. The technique of PCR was performed for the detection of the presence of blaSHV gene from these isolates. The antibiotic resistant profiles for these isolates were also investigated.Results: The overall proportion of ESBL-producing E. coli and K. pneumoniae isolates, 77 (76.2%) and 15 (78.9%) isolates were ESBL producers, respectively. ESBL-producing isolates were significantly more resistant than Non-ESBL-producers (P < 0.05). PCR performed on 30 ESBL positive isolates, 21(70%) isolates were of E. coli, and 9 (30%) isolates were of K.pneumoniae. The ESBL B-lactamase related SHV gene was detected only in 11 (36.6%) isolates, 6 (28.5 %) of E. coli and 5(55.5%) of K. pneumoniae isolates respectively. All isolates were susceptible to carbapenems.Conclusion: The great diversity of ESBL and the prevalences of clinical isolates of E. coli and K. pneumoniae producing these enzymes indicate that this is an important problem in our region. The most active antimicrobial agent against isolates used in this study was carbapenem. It is, therefore strongly recommended to consider carbapenems as the drug of choice for such multi-drug resistant ESBL-producing microorganisms.

ESBL --- blaSHV gene --- E. coli --- K. pneumoniae

Biofilms as a major virulence factor of bacteria ,therelationship between bacteria persistence in the urinary tract and genes responsible for biofilms production was studied.The aim is to detect the presence,frequency of the,fimA, fimH, mrkA and mrkD, genes and biofilms production in two species isolated from UTI patients and their effect on some innate immunity aspects.Sixty five isolates of E.coli and fifty of K.pneumoniae isolates were collected. All isolates were initially diagnosed as genus Esherichiacoli andKlebsiella pneumonia. Final identification for the isolates was done by Vitek 2 compact system. The ability to form biofilm was carried out by using Tissue culture plate method (TCP).Adhesion average to epithelial cells of E.coli and K.pneumoniae was studied. Detection of genes were done to by using PCR technique .Immunological experiments were done by using bactericidal activity and opsonization factor.UTI infection were more common in female than male. 75% (49/65) females, 25%(16/65) males ofE.coli isolates and 88% (44/50) females,12%(6/50) males of K.pneumoniaeisolates. Patients ages in children between (2 months -18years) in UTI caused by E.coli was 35%(23/65) while in k.pneumoniae was 74%(37/50),Ages between (18 years-50 years) in E.coli was 37%(24/65) while in K.pneumoniae was 18%(9/50) finally,Ages between (50 years-72years) in E.coli was 28%(18/65) while in K.pneumoniae was 8%(4/50).69% of E.coli isolates and 72% of k.pneumoniae isolates were higher biofilm producers. . Adhesion average to epithial cells of E.coli and K.pneumoniae was 42.9% and 44% respectively. Both E.coli and K.pneumoniae showed that 100% 0f the 12 isolate harbored the fimA, fimH, mrkA and mrkD genes. The bactericidal average was higher in E.coli than K.pneumoniae , P- value( 0.01) for mice injected with fimbriae, Opsonization factor was higher in E.coli than K.pneumoniae the P value (0.05) . Conclusion: A strong relationship between biofilms production and presence of genes of different species isolated from same clinical source that has effected on resistance of bacteria to innate immunity.

شملت الدراسة الحالية الاغشية الحيوية والعلاقة بين قدرة البكتريا على البقاء في القناة البولية والجينات المسؤلة عن انتاج الاغشية الحيوية .هدفت الدراسة الى تحديد الجيناتfimA , fimH, mrkAmrkD, وتأثيرها على انتاج الاغشية الحيوية وكذلك دراسة مدى تردد هذة الجينات في جنسين مختلفين الكليبسيلا الرئوية والاشريشيا كولاي المعزولة من نفس المصدر السريري للمصابين بألتهاب المجاري البولية وتاثير وجود هذة الجينات وترددها على المناعة المتأصلة.خمسة وستون عزلة من بكتريا الاشريشيا القولونية وخمسون عزلة من بكتريا الكليبسيلا الرئوية جمعت من مصابين بألتهاب المجاري البولية, جميع العزلات شخصت ابتداءا وكانت تعود الى الاجناس قيد الدراسة ,التديد النهائي للتشخيص عمل بأستخدام اختبار الفايتك Vitek 2 compact system . اختبرت قابلية انتاج الاغشية الحيوية من خلال استخدام طريقة الاطباق من ناحية اخرى معدل الالتصاق على الخلايا الطلائية للاجناس السابقة تم تحديده.فيما استخدمت تقنية البي سي ار للكشف عن الجينات.اخيرا درست التاثيرات المناعية باستخدام تجربة التأثير القاتل للبكتريا bactericidal activity وتجربة عامل الطهي opsonization factor.اظهرت النتائج ان اصابات القناة البولية في الاناث اكثر منها في الذكور 75% (49/65) في الاناث ,12%(6/50) في الذكور في الاصابات المتسببة عن بكتريا الاشيريشيا القولونية . فيما كانت النسب 88% (44/50) في الاناث , 25%(16/65) في الذكور في الاصابات المتسببة عن بكتريا الكليبسيلا الرئوية. اعمار المصابين بين ( 2 شهر الى 18 سنة) كانت بنسبة 35%(23/65) للاصابات المتسببة عن الجنس الاشريشيل القولونية فيما كانت النسبة 74%(37/50) لاصابات الكليبسيلا الرئوية من ناحية اخرى كانت النسب للفئة العمرية ( 18 الى50 سنة)37%(24/65) للاشيريشيا القولونية و كانت 18%(9/50). الفئة العمرية الاخيرة حسب الدراسة تراوحت ( 50 الى 72 سنة) 28%(18/65) للاشريشيا كولاي , 8%(4/50) لبى الكليبسيلا الرئوية . نتائج تجربة قابلية انتاج الاغشية الحيوية كشفت ان 69% من غزلات جنس الاشريشيا كانت منتجة للاغشية الحيوية ,فيما كانت النسبة اعلى فيما يخص عزلات جنس الكليبسيلا الرئوية اذ اظهرت ان 72% كانت منتجة. نتائج معدل الالتصاق لعزلات الجنسين الاشيريشيا كولاي و الكليبسيلا الرئوية كانت 42.9% و44% على التوالي . كلا الجنسين اظهرت ان 12 عزلة كانت حاوية بنسبة 100% للجينات المدروسة fimA, fimH, mrkA.mrkDمعدل نتائج اختبار الفالية القاتلة للبكتريا كانت اعلى بالنسبة الى غزلات جنس الاشيريشيا القولونية مقارنة بعزلات جنس الكليبسيلا الرئوية استنادا الى نتائج التحليل الاحصائي بمستوى معنوية ( 0.01) للفأران البيضاء المحقونة بالفامبيريا fimbriae المنقاة جزئيا من كلا الجنسين . فيما اشارت نتائج التحليل الاحصائي ان معدل عامل الطهي كان اعلى بالنسبة الى جنس الاشيريشيا كولاي مقارنة مع جنس الكليبسيلا الرئوية بمستوى معنوية (0.05).الاستنتاجاستنادا الى هذه الدراسة المحلية نستنتج ان هنالك علاقة قوية بين قابلية انتاج الاغشية الحيوية ووجود الجينات المدروسة لاجناس مختلفة معزولة من نفس المصدر الاصابة السريرية والتي بالامكان ان تؤثر على مقاومة هذة الاجناس للمناعة المتأصلة

K.pneumoniae --- E.coli --- fimA --- fimH --- mrkA --- mrkD --- innate immunity.