ABSTRACT: BACKGROUND : Gastric cancer is the the fourth most common cancer and the second leading cause of cancer-related deaths. Gastric cancer is a major cause of cancer morbidity and mortality worldwide.OBJECTIVE:To estimate the immunohistochemical expression of epidermal growth factor receptor(EGFR) in the gastric cancer in relation to other parameters like grade and stage.METHODS: Formaline fixed ,paraffin-embedded blocks from 51 patients (29 male and 22 female) with gastric carcinoma were included in this study. Ten biopsies of normal gastric tissue were selected as a control group. Envision (DAKO) technique was applied to study the immunohistochem- ical expression of EGFR in paraffin embedded sections of gastric cancer. RESULTS: Positive immunohistochemical expression of EGFR was seen in 41.2% of cases as both membranous and cytoplasmic brown staining while there was negative staining in the normal control group (p<0.05). EGFR immunoexpression was correlated with the histological type( more in the intestinal variant than the diffuse type) (p<0.0.5).CONCLUSION: These findings provides further evidence for the role of EGFR in the tumorgenensis of gastric cancer. However, EGFR could not be well correlated with stage of tumor and hence may be poor prognostic parameters of the state of malignancy.

KEY WORD:EGFR --- gastric carcinoma.

The aim of this study was to design a new model of polymerase chain reaction (PCR) based diagnostic method using mouse genome for one rare epidermal growth factor receptor (EGFR) gene mutations with diagnostic and prognostic values in lung cancer (this mutation are not covered by commercial test kits). From the systematic database search, one rare mutations identified which is within the tyrosine kinase (TK) domain of EGFR, with an insertion mutation in exon 20 namely A763_Y764insFQEA. For designing primers to detect the targeted regions surrounding the rare mutations, Primer3 Plus was carried out to design two sets of PCR primers for exon 20 of mouse EGFR gene. UCSC (University of California Santa Cruz) in silico PCR testing along with BLASTN search were used for primer specificity in terms of predicted target location (chromosome 11 for exon 20) and predicted amplicon sizes (276 bp for exon 20). PCR was partially optimised for the exon 20 with the presence of expected amplicon bands, along with unspecific and primer-dimer bands. The amplicon was sequenced and revealed the presence of the mutation. The mutation of interest selected was A763_Y764insFQEA (insertion of phenylalanine, glutamine, glutamic acid and alanine in between codon 763 and 764) in exon 20, the mutation was in the kinase domain of EGFR. The Identification and Analysis for rare mutations via this way is sensitive, simple, accurate and inexpensive technique. It is used as genetic markers for allelic and mutational sequence variation.

هدفت هذه الدراسة هو تصميم نموذج جديد لتقنية التشخيص المعتمد على تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) باستخدام جينوم الفأر لاحد الطفرات الجينية النادرة لمستقبل عامل نمو الادمة (EGFR) مع القيم التشخيصية والنذيرية في سرطان الرئة (هذه الطفرة لم تغطى باستخدام عدد تجارية). من البحث في نظام قاعدة البيانات، حددت واحدة من الطفرات النادرة التي تقع ضمن نطاق انزيم التيروسين كاينيز (TK) من EGFR كطفرة مدرجة في اكسون 20 وهي .A763_Y764insFQEA لتصميم الشعيلة للكشف عن المناطق المستهدفة المحيطة الطفرات النادرة نفذت Primer3 Plus لتصميم مجموعتين من شعيلات لاكسون 20 من جين EGFR للفار. استخدمت تقنية جامعة كاليفورنيا سانت كروز (UCSC) في silico PCR مع البحث BLASTN لخصوصية الشعيلات من حيث تنبأ الموقع المستهدف (الكروموسوم 11 لاكسون 20) وتوقع حجم الامبليكون بـ (276 لاكسون 20) و حسنت جزئيا تقنية PCR للاكسون 20 مع وجود حزم امبليكون متوقعة، جنبا إلى جنب مع الخطوط غير محددة. حيث الامبليكون تسلسل وكشف وجود الطفرة. وكانت الطفرة المهم اختيارها كانتA763_Y764insFQEA المدرج من الفنيل الأنين، الجلوتامين، حمض الجلوتاميك وألالنين بين كودون 763 و 764 في اكسون 20، كانت طفرة في المجال كاينيز من .EGFR ان تحديد وتحليل الطفرات النادرة باستخدام هذه التقنية كانت حساسة وبسيطة ودقيقة و غير مكلفة، وهو يستخدم كدلائل وراثية لمختلف التسلسلات الأليلة والطفرية.

Lung cancer --- EGFR --- mutation --- Exon 20 --- سرطان الكبد، طفرة EGFR، اكسون 20

Background: Colorectal Adenocarcinoma contributes one of the most common malignancies and the second leading cause of death from cancer in the western world. Epidermal growth factor receptor (EGFR) belongs to a family (ErbB-tyrosine receptors), EGFR plays an important role in the pathogenesis of colorectal cancer.Objectives : to evaluate the immunohistochemical expression of epidermal growth factor receptors (EGFR) in colorectal adenocarcinoma and to correlate this expression with different clinicopathological parameters.Pateints and method: In this study clinicopathological parameters of twenty five colorectal adenocarcinoma cases diagnosed in private pathology laboratories in Baghdad /Iraq from November 2012 to September 2013 were respectively evaluated in terms of age, gender, pathological diagnosis including; tumor location, lymph node status. EGFR expression was investigated immunohistochemically. Results: twenty five colorectal cancer patients were included in this study with median age 54.5, range from (28-81)years, 15 cases (60%) were female and 10 (40%) cases were male. Tumor size range from 3-10 cm with mean 6.5 cm, 10 (40%) cases were from rectum, 7 (28%) from the right side colon & 8 (32%) cases were from from left side colon. Twenty three (92%) cases were moderately differentiated, and two (8%) cases were poorly differentiated, five (20%) cases were T1, 10 (40%) cases were T2, 5 (20%) cases were each T3 & T4 respectively. 3 (12%) cases were N1, 7 (28%) cases were N2, and fifteen (60%) cases have no lymph node involvement. Three (12%) cases with distant metastasis. Eighteen (72%) cases of colorectal adenocarcinoma demonstrate EGFR reactivity in > 1% of the tumor cells. No significant statistical correlation was noticed between EGFR expression and each of age, gender, site of the tumor and grade of tumor (P value > 0.05). A significant statistical correlation was noted between EGFR expression and local tumor invasion (T) and lymph node involvement (p value <0.05). Conclusion: Epidermal growth factor receptor plays an important role in colorectal adenocarcinoma oncogenesis. EGFR expression appears to have a value as a prognostic biomarker, since it's expression by the tumor cells is significantly correlated to lymph node involvement and tumor local invasion. Keywords: Colorectal Adenocarcinoma, EGFR

المقدمة: يعتبر سرطان القولون واحدا من اكثر الاورام الخبيثة شيوعا و انتشارا, و السبب الثاني للوفاة بسبب السرطان في العالم الغربي. ينتمي مستقبل عامل النمو البشري الى عائلة ( Erb-B ) مستقبلات التايروسين و يلعب دورا مهما في تطور سرطان القولون و المستقيم.هدف الدراسة:تحديد نسبة و شكل التعبير المناعي لمستقبلات عامل النمو البشري في السرطانات الغدية للقولون و المستقيم بواسطة الفحوص المناعية و النسيجية و تقييم العلاقة بين التعبير المناعي مع مختلف الدلالات السريرية و المرضبة.المواد و الاسلوب: تم دراسة خمس و عشرون حالة لمرضى بسرطانات القولون و المستقيم و هذة الحالات تم تشخيصها في مختبرات اهلية في بغداد من شهر تشرين ثاني 2012 و لغاية ايلول 2013. هذه الحالات تم تقيمها من ناحية العمرو الجنس , التشخيص النسيجي و تشمل حجم الورم, مكان الورم, عدد الغدد اللمفاوية , تمايز الورم و مراحل انتشاره . تم تقييم التعبير المناعي لجميع الحالات بواسطة فحوصات المناعة النسيجية الكيميائية.النتائج: الدراسة تضمنت خمس و عشرين حالة من السرطانات الغدية للقولون و المستقيم اعمارهم تراوحت بين (28-81) سنة مع متوسط عمر 54,5 سنة . 15 (60%) حالة من الاناث و 10 (40%) حالة من الذكور. حجم الورم يتراوح بين (3-10) سم مع متوسط 6.5 سم . عشر حالات (40%) كانت من المستقيم , 7 (28%) حالات من القولون الايمن و 8 (32%) حالات من القولون الايسر. ثلاث و عشرون (92%) حالة كانت متوسطة التمايز و 2 (8%) كانت فقيرة التمايز.بالنسبة الى مراحل السرطان تبين ان 5 (20%) حالات هي T1 , 10 (40%) هي T2 و 5 (20%) حالات هي T3 , T4 . بالنسبة الى اصابة الغدد اللمفاوية وجدت النتائج التالية: ثلاث (12%) حالات N1 , وسبع (28%) حالات N 2 و 15 (60%) حالة خالية من الاصابات و ان السرطان منتشر في 3 (12%) من الحلات و ان التعبير الناعي النسيجي لعامل النمو البشري كانت موجبة في 18 (72%) حالة في اكثر من 1% من الخلايا السرطانية.لم يلاحظ وجود علاقة احصائية بين التعبير المناعي للمعلم السرطاني لمستقبل النمو البشري و بين كل من العمر, الجنس, مكان وجود الورم, درجة تمايز الورم (P>0.05). و وجدت علاقة بين التعبير المناعي للمعلم السرطاني و درجة انتشار الورم (T), و اصابة الغدد اللمفاوية (P< 0.05).الاستنتاج: يلعب المعلم السرطاني (مستقبل عامل النمو البشري ) دورا مهما في عملية تطور سرطان القولون و المستقيم. و يعتبر هذا العامل ذو قيمة تنبوئية في هذا السرطان, حيث وجدت علاقة احصائية بين تعبيره المناعي من قبل الخلايا السرطانية و درجة انتشار الورم و اصابة الغدد اللمفاوية.مفتاح الكلمات: سرطان الفولون و المستقيم الغدي , مستقبلات عامل النمو البشري.

Colorectal Adenocarcinoma --- EGFR --- سرطان الفولون و المستقيم الغدي --- مستقبلات عامل النمو البشري.