research centers


Search results: Found 4

Listing 1 - 4 of 4
Sort by

Article
Sequencing of Gliotoxin Genes in Clinical and Environmental Aspergillus fumigatus isolates in Iraq
تتابع الحمض النووي لـ جينات Gliotoxin في فطر Aspergillus fumigatus المعزولة من مصادر سريرية وبيئية في العراق

Authors: Russel S. abdulhadi رسل صالح عبدالهادي --- Nemat J. Abdulbaqi نعمت جميل عبد الباقي
Journal: Jornal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية ISSN: 18151140 Year: 2018 Volume: 12 Issue: 1 Pages: 33-39
Publisher: Al-Nahrain University جامعة النهرين

Loading...
Loading...
Abstract

Gliotoxin is an important virulence factors in Aspergillus fumigatus. The biosynthesis of this mycotoxin is regulated and expressed by the presence of gliP genes. This study aimed to identify Aspergillus fumigatus isolates in clinical and environmental sources with glip genes using conventional PCR and sequence. To achieve this, DNA was isolated from twenty A. fumigatus isolates using commercial kit. The range of the DNA extracted was 65-210 ng/μl with a purity of 1.5-1.9. Species identification of the A. fumigatus isolates was achieved to a high specificity by using tailored primer. The results showed that all isolates had positive results to the primer and all isolates were able to produce gliotoxin. PCR detected the gliotoxin genes, glip in five isolates. The five PCR product samples were sent for sequence analysis and 25 µl (10 pmol) from the forward primer. The results of all the samples indicated have a single band of the desired product of gliP gene of A.fumigatus and the samples sent for sequencing related to molecular weight 190 bp.

Gliotoxin هو عامل سمي مهم في Aspergillus fumigatus. وينظم التخليق الحيوي لهذا السموم الفطرية ويعبر عنه وجود الجينات Glip. هدفت هذه الدراسة إلى التعرف على عزلات A. fumigatus في السلالات السريرية والبيئية مع جينات Glip باستخدامpcr التقليدي وارسلت لتحليل التسلسل . لتحقيق ذلك، تم عزل الحمض النووي من عشرين عينة A. fumigatus باستخدام عدة التجارية. كان العائد من الحمض النووي المستخرجة في نطاق 65-210 نانوغرام / ميكرولتر مع نقاء 1.5-1.9. تم التعرف على الأنواع لعزل A. fumigatus إلى خصوصية عالية باستخدام بادء خاص . وأظهرت النتائج أن جميع العزلات كانت نتائج إيجابية على بادء Afumi. وأظهرت النتائج أن خمس عزلات كانت قادرة على إنتاج Gliotoxin باستخدام pcr تم الكشف عن وجود جينات Gliotoxinو Glip في جميع العزلات. وأظهرت النتائج أن عائد من مجموعة واحدة من المنتج المطلوب من جين Glip من A. fumigatus العينات أرسلت للتسلسل المتعلقة الوزن الجزيئي bp. 190 تم إرسال خمسة عينات من المنتجpcr لتحليل التسلسل.


Article
Cytotoxic Effect of Gliotoxin, Hemolysin, Protease and Melanin purified from Aspergillus fumigates on REF Cell Line, in vitro Study
التأثيرالسمي لسم الكلايوتوكسين و البروتيين المحلل للدم وانزيم البروتييز وصبغة الميلانين المنقاة من الرشاشيات الدخناء على خط الخلايا الليفية لجنين الجرذ، دراسة خارج الجسم الحي

Loading...
Loading...
Abstract

Aspergillus fumigates especially clinical isolate produces a series of toxic substances and proteinaceous hemolysin, protease and pigment like melanin which appear to act in an additive and synergic way on cells. In this study, gliotoxin, hemolysin, Protease, and Melanin were used in an experimental model to study their Cytotoxic activity by evaluating their effect on REF cell line (Rat embryonic fibroblast ), for exposure time of 24 hrs at three different concentrations of each compounds triplicate of each concentration were used, cytotoxicity of the purified compounds were active against REF cell line under study and a toxic effect was clear with a significant difference at the level of probability (p≤ 0.05) and this effect was contrasted among different concentrations for each purified compound growth inhibition of REF cell line was increase gradually with the increase of compound concentration.

الرشاشيات الدخناء وخصوصا العزلات السريرية تنتج سلسلة من المواد السامة والبروتينات المحلله للدم وانزيم البروتييز والصبغات مثل الميلانين والتي تبدوا أنها تعمل بصورة اضافية وطريقة تآزر على الخلايا. في هذه الدراسة تم استخدام سم الكلايوتوكسين, والبروتيين المحلل للدم وانزيم البروتييز والميلانيين في نموذج تجريبي لدراسة فعاليتها السمية من خلال تقييم تأثيرها على خط الخلايا الليفية الجنينية للجرذ بوقت تعرض 24 ساعة وبثلاث تراكيز مختلفة لكل مركب وبثلاث مكررات لكل منها سمية المركبات النقية قيد الدراسة فعالة والتأثير السمي واضح بفرق معنوي عند مستوى الاحتمالية(P≤0.05) تحت ظروف التجربة وكان هذا التأثير متباين بين التراكيز المختلفة لكل مركب من المركبات النقية، نسبة تثبيط نمو خط الخلايا اليفية لجنين الجرذ يزداد تدريجيا مع زيادة تركيز المركب.


Article
Detection of Gliotoxin in Patients with Pulmonary Aspergillosis

Author: Baheeja A.Hmood
Journal: Journal of University of Babylon مجلة جامعة بابل ISSN: 19920652 23128135 Year: 2017 Volume: 25 Issue: 2 Pages: 639-650
Publisher: Babylon University جامعة بابل

Loading...
Loading...
Abstract

Objective: This study was designed to detection of gliotoxin in patients with pulmonary Aspergillosis . Method: A total of 100 samples (sputum and blood) were selected from 100 outpatients who attended to Al-Qadissiyia Centre of Tuberculosis and Chest Diseases, , during the period from 2014 to May 2015. All patients had clinical manifestation in addition to 100 sample (sputum and blood) as control group.Results: All patients infected with fungi and three different genus isolated from sputum of patients ,these genus are Aspergillus sp. 60 Isolates( 60%)with three species were A.fumigatus (50%) A.flavus(33.3%) and A.niger (16.6% )Cryptococcus neoformans (20%) Penicillum sp.(14%) and Rhizopus sp.(6%). Seventy nine (79%) from patients had gliotoxin distributed in their sputum and serum by ratio (71%) and 5 (5%) had GT in their serum while 3 (3%) of them had GT in their sputum.. So this toxin was found in50(5%) in control group distributed in sputum and serum by (40%) , 6(6%)in sputum and 4(4%)in serum. The concentration of GT in sputum of patients was (40-63µg/kg) and in sputum of control group was (16-23µg/kg) and in serum of patients was (33-47µg/kg) and (10-21µg/kg) in serum of control group. and all A.fumigatus isolates 30 (100 %)were have gliz gene.Conclusion: Several species of Aspergillus and other fungi as well as possibly yeast, produced gliotoxin both in vitro and in vivo. More attention should be paid to this mycotoxin because of its multi-faceted toxic properties.

صممت هذه الدراسة للتحري عن سم الجليوتوكسين لدى المرضى المصابين بداء الفطار الرئوي. تضمنت الدراسة جمع 100 عينة من المرضى المراجعين الى مركز الصدرية والتدرن الرئوي في محافظة القادسية للفترة من اذار 2014 ولغاية اذار 2015 علما ان جميع المرضى كانوا يعانون من اعراض سريرية بالاضافة الى جمع 100 عينة كمجموعة سيطرة . اظهرت نتائج الدراسة ان جميع المرضى مصابون بالفطريات وتم عزل ثلاث اجناس من الفطريات من القشع ساد فيها الفطر Aspergillus sp. بنسبة 60% وظم ثلاث انواع هي Aspergillus fumigatus بنسبة50% وA.flavus بنسبة (33.3%) وA.niger بنسبة (16.6%) وخميرةCryptococcus neoformans بنسبة 20%والفطر Penicillium sp بنسبة 14%ومن ثم الفطر Rhizopus بنسبة6 %.تسع وسبعون بالمائة من المرضى المصابون كانوا حاملون لسم الجليوتوكسين في القشع والدم بنسبة 71% اذ ان 5% منهم كانوا حاملين لهذا السم في الدم و3 (3%) كانوا حاملين للسم في القشع كذلك وجد هذا السم في 5% من مجموعة السيطرة توزع بنسب 40% في القشع والدم و6% في القشع و4% في الدم . تراوح تركيز سم الجليوتوكسين في قشع المرضى المصابين بين (40-63 )مايكروغرام /كغم من وزن الجسم ومن(16-32)مايكروغرام /كغم في قشع مجموعة السيطرة في حين بلغ تركيزه (33-47%)مايكروغرام /كغم في دم مجموعة المرضى ومن (10-21)مايكروغرام /كغم في دم مجموعة السيطرة .وكانت جميع عزلات الفطر A.fumigatus (100%) حاوية على جين gliz . هناك بعض انواع الفطر Aspergillus وفطريات اخرى بالاضافة الى الخمائر لها القابيلة على انتاج سم الجليوتوكسين ويجب الانتباه الى هذا السم لما له من تاثيرات متعددة على الجسم .


Article
Improving Conditions for Gliotoxin Production by Local Isolates of Aspergillus fumigatus
تحسين الظروف من عزلات محلية من الفطر Aspergillus fumigatus لأنتاج مستويات عالية من الكلايوتوكسين

Loading...
Loading...
Abstract

Thirty two isolates of Aspergillus fumigatus were obtained from a total of 44 samples of sputum, nose swab and tracheal aspirate from suspected patient with aspergillosis were also collected from February 2014 to June 2014. A morphological examination of A. fumigatus was first made with naked eye and at low magnification power of microscope after that detailed examination was done by measuring the dimensions of the microscopic structures, photographing the microscopic structures and using relevant literature. Results appeared conical-shaped terminal vesicles, uniseriate row of phialides on the upper two thirds of the vesicle, conidiophore stipes were short, phialides arrange uniseriate upper vesicle conidia and parallel to axis of conidiophore, produced in chains of spore basipetally from phialides, the chains of spore were borne directly in the absence of metulae and represented by septet and branching hyphae. The ability of A. fumigatus for GT production was investigated using thin layer Chromatography (TLC) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) techniques and results showed that GT was produced by 81.25% of A. fumigatus isolates. Optimum conditions for GT production by A. fumigatus 16 (AF-16) isolate were determined by submerged fermentation using Yeast extract sucrose medium. Results indicated that AF-16 isolate was the highest GT producer on Yeast Exract Sucrose medium with inoculum size 2×107 conidium and incubation at 32ºC for 15 days and the concentration of gliotoxin was (4511µg mL-1).

جمعت عينات من المرضى المتوقع أصابتهم بداء الرشاشيات إذ حصل على 32 عزلة من مجموع 44 عينة من القشع ومسحات الانف والقصبة الهوائية للمرضى المتوقع اصابتهم بهذا الداء جمعت العينات للفترة من كانون الثاني للعام 2014 لغاية حزيران 2014.عملت فحوصات مظهرية بالعين المجردة وعلى القوة الصغرى للمجهر لفطر Aspergillus fumigatus ثم تلاها الفحص الدقيق للفطر من خلال قياس أبعاد التراكيب المجهرية وتصويرها بالاعتماد على مصادر سابقة. أظهرت النتائج بوجود تراكيب مخروطية الشكل ذات نهابة حوصلية ذات صف واحد من الفياليدات (تسمى احيانا بالذنيبات) مرتبة على الثلث الثاني من الحوصلة، يتميز الحامل الكونيدي بكونه قصير وتترتب الكونيدات على الفياليدات في أعلى الحوصلة وتكون موازية للحامل الكونيدي، وتتولد الأخيرة (الكونيدات) بشكل سلسلة من الفياليدات إذ تتولد سلسلة السبورات هذه مباشرة بغياب الذنيبات الأبتدائية اذ تتكون بحاجز وهايفات متفرعة. كشف عن قابلية Aspergillus fumigatus على إنتاج الغلايوتوكسين بإستخدام تقنية كروموتوغرافيا الطبقة الرقيقة. أظهرت النتائج قابلية 25 عزلة(81.25%) من عزلات A. fumigatusعلى إنتاج السم بينما لم تظهر عزلات الكانديدا جميعها القابليةعلى الإنتاج. تمثلت الظروف المثلى لإنتاج الغلايوتوكسين لتخمرات الحالة السائلة بإستخدام وسط خلاصة الخميرة كمادة أساس للعزلة المنتجة الأكفأ التي يرمز لهاAF-16وحجم اللقاح 2×710سبوربدرجة حرارة 32 ºم لمدة 15 يوما" إذ كان تركيزالغلايوتوكسين 4511ميكروغرام مل-1بإستخدام تقنية الكروموتوغرافيا السائلة ذات الإداء العالي.

Listing 1 - 4 of 4
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (4)


Language

English (4)


Year
From To Submit

2018 (1)

2017 (2)

2015 (1)