research centers


Search results: Found 2

Listing 1 - 2 of 2
Sort by

Article
Comparison between three different protocols for isolation and culture of mouse bone marrow derived mesenchymal stem cells
دراسة مقارنة لثلاثة طرق لعزل وزراعة الخلايا الجذعية اللحمية المشتقة من نخاع عظم الفأر

Loading...
Loading...
Abstract

Bone marrow derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) represent a promising source for cell therapy, As they can differentiate into bone, cartilage, fat, tendon and many other organ progenitor cells. Although the culture of MSCs has been studied for over 30 years. The identification of standard protocol for isolation and characterization have yet to be developed. A comparison study was made on three different isolation techniques, which include: direct plating, red blood lysis buffer strategies, and density gradient (DG) method (using two different gradient media: Ficoll and Percoll) to find the optimal isolation and culture condition for adequate amount of MSCs for clinical use.The results demonstrate that direct plating of whole bone marrow (BM) suspension provides a suitable alternative protocol for isolation of BM-MSCs with minimal requirements, which mainly based on the frequent medium change in primary culture. The BM crud cell suspension were isolated by aspiration from albino mice and cultured in fresh complete isolation media (CIM) RPMI-1640/10%FBS. Adherent cells from BM cells suspension were MSCs which then expanded by complete expansion media (CEM) α-MEM/ 10% FBS. By concluding, direct plating of whole bone marrow represent the alternative method for isolating of mesenchymal stem cells from small specimen of bone marrow. By concluding, the present study was designed to investigate the optimal technique for the isolation of BM-MSCs for use in tissue engineering and regenerative medicine.

تعد الخلايا الجذعية اللحمية المشتقة من نخاع العظم مصدرا واعدا في العلاج الخلوي. لقابليتها على التمايز الى خلاياانسجة العظم، الغضروف،الخلايا الدهنية والوتر والكثير من الخلايا المولدة للأعضاء. رغم ان زراعة الخلايا الجذعية اللحمية درست خلال الثلاثين السنة الماضية الا انها لم توفر نمط قياسي لعزل وتمايز هذه الخلايا لحد الان لذلك تم في هذه الدراسة مقارنه ثلاث طرق مختلفة لعزل الخلايا الجذعية المشتقة من نخاع العظم وهي: العزل بواسطة الطريقة المباشرة، استعمال الدارئ المحلل لكريات الدم الحمر، وباستعمال الوسط المتدرج الكثافة وذلك لإيجاد الطريقة والظروف المثلى للعزل والزراعة لحصد كميات ملائمة من الخلايا الجذعية اللحمية. أوضحت النتائج ان الطريقة المباشرة لزراعه معلق نخاع العظم الخام تمثل أفضل طريقه لعزل الخلايا اللحمية، والتي تقوم أساسا على التغيير المتكرر للوسط الزرعي في المزرعة الأولية. تم جمع عالق نخاع العظم الخام من الفئران البيض وانمائها في الوسط الزرعي العازل(RPMI-1640/10%FBS). كانت الخلايا الملتصقة من معلق نخاع العظم في اوعية الزرع هي الخلايا الجذعية اللحمية والتي تم ادامتها بالوسط الزرعي (MEM/ 10% FBS). وعلية صممت الدراسة الحالية لايجاد الطريقة المثلى لعزل الخلايا الجذعية اللحمية من نخاع العظم المستخدمة في هندسة الانسجة والطب التجديدي.


Article
Isolationand Identification of mouse bone marrow derived mesenchymal stem cells
عزل وتشخيص الخلايا الجذعية اللحمية المشتقة من نخاع عظم الفئران

Loading...
Loading...
Abstract

Bone marrow derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) were successfully used in regenerative medicine. The purpose of this study was to isolate and characterize mesenchymal stem cells from mouse bone marrow for their subsequent use in researches. Previous data suggest that BM-MSCs are typically enriched by plastic adherent cultures, fibroplastoid cell fraction. However, Identification of MSCs achieved through their morphology, phenotypic characteristics and their biological behavior. The cellular morphology played a major part in identifying MSCs in vitro. In general, immature MSCs appeared as small, spindle-shaped cells, whereas mature MSCs was displayed as larger cells with a flat, polygonal morphology. Cells also tended to be locally confluent, growing in distinct colonies. Immunophenotypic analysis demonstrated that mouse BM-MSCs at passage three uniformly positive for CD44, CD90, CD105 and CD106. However, MSCs were always found to be negative for heamatopoietic specific markers CD34, CD45, and endothelial marker CD31. By concluding, mesenchymal stem cells can be successfully derived from mouse bone marrow by direct plating method. These cells represent a valuable source of stem cells for restoring the damaged organs.

استخدمت الخلايا الجذعية اللحمية المشتقة من نخاع العظم بنجاح في الطب التجديدي. هدفت الدراسة الحالية الى عزل وتوصيف الخلايا الجذعية اللحمية من نخاع عظم الفأر لغرض استخدامها في المجالات البحثية.أوضحت معطيات البحوث السابقة بأن الخلايا الجذعية اللحمية المشتقة من نخاع العظم يمكن اغناؤها فقط بواسطة التصاقها بالمزارع البلاستيكية.وفصل الخلايا الليفية المولدة. ان تشخيص الخلايا الجذعية اللحميةيتم من خلال الشكل، والصفات الوراثية المظهرية، والسلوك البيولوجي لها. ويلعب الشكل الخلوي دورا مهما لتشخيص الخلايا الجذعة اللحمية في المزرعة. وبشكل عام، تظهر الخلايا الجذعية اللحمية الفتية صغيرة الحجم ومغزليه بينما تظهر الناضجة منها بشكل خلايا كبيرة الحجم، مسطحة ومتعددة الاضلع. وتميل الخلايا الى التجمع موضعيا والنمو في مستعمرات محددة.أظهرت نتائج تحليل الكيمياء النسيجية المناعية للخلايا الجذعية اللحمية بانها ذات استجابة موجبة لل CD44، CD90، CD105، CD106، وبنسبه منخفضه لل nestin. وذات استجابة سالبة للمعلمات المتخصصة بالخلايا الدميةCD34، CD45، والمعلم الظهاريCD31. ويمكن الاستنتاج بإمكانية عزل الخلايا الجذعية اللحمية وبنجاح من نخاع عظم الفئران البيض بالطريقة المباشرة والتي تعتبر مصدرمهم للخلايا الجذعية لتعويض الأعضاء المتضررة.

Listing 1 - 2 of 2
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (2)


Language

English (2)


Year
From To Submit

2014 (2)