research centers


Search results: Found 3

Listing 1 - 3 of 3
Sort by

Article
PRODUCTION OF POLYGALACTURONASE FROM THERMOSTABLE MOLD ASPERGILLUS NIGER 1- ISOLATION AND SCREENING THE ENZYME PRODUCER THERMOSTABLE MOLDS AND IDENTIFYING THE PRODUCER ONE
إنتاج أنزيم POLGALACTYRONASE من العفن ASPERGILLUS NIGER المتحمل للحرارة1-عزل وغربلة الأعفان المتحملة للحرارة والمنتجة للأنزيم وتشخيص العزلة الأكثر إنتاجاً

Authors: Mohammed O. Muhyalddin محمد عمر محي الدين --- Rukaibaa A. Chechan رقيباء علي جيجان
Journal: Iraqi Journal of Agricultural Science مجلة العلوم الزراعية العراقية ISSN: 00750530/24100862 Year: 2013 Volume: 44 Issue: 1 Pages: 97-105
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

A total of 147 isolates of pectin hydrolysis enzymes producer molds were isolated from various sources(soil and decayed vegetables and fruit) using Czapek Dox Agar using 3% pectin as the sole carbon source by adding of 1M Hcl at PH5 and submitted to primary and secondary screening at 40 CO to select the best isolate that produces the highest level of polygalacturonase. It was found that 7 isolates were good producer but the isolate which designated TP4 was the highest producer one. The source of this isolate was deteriorated orange and identified as Aspergillus niger according to morphological, biochemical and molecular analysis which was achieved using PCR (Polymerase Chain Reactions) technique. This isolate was nominated as Aspergillus niger TP4 for distinguishing it from any other isolates used for production the same enzyme. This part of study was aimed to investigate the optimal condition of production the enzyme Polygalacturonase from Aspergillus niger TP4 by solid state fermentation using different wastes available locally. It was found that the higher level of production could be achieved on wheat bran and sunflower head extract moistened with water at a ratio 3:1 with an initial pH 5 inoculated with 107 spores/gm during an incubation time of 4 days at 4 C0.the polygalacturonase activity was assay by measuring reducing groups The productivity under these conditions was 325.45 unit/gm using wheat bran and 242.28 unit/gm using sunflower head with an increase estimated about 124.7% and 120.8% respectively in relationship with productivity before of the optimization.

تم الحصول على 146 من الأعفان المنتجة للأنزيمات المحللة للبكتين من مصادر متنوعة (التربة والخضروات والفواكه التالفة) باستخدام وسط العزل والمتمثل بوسط جابك دوكس المحور Czapek Dox Agar كوسط لعزل الاعفان باستبدال مصدر الكاربون فيه ببكتين التفاح وبتركيز 3 %, عدل الرقم الهيدروجيني للوسط على5 بمحلول 1 مولار حامض وأخضعت لعمليتي الغربلة الأولية والثانوية بغية انتقاء أكثرها مقدرة على أنتاج الأنزيم في 40 م0. فتبين أن سبع عزلات منها تميزت بقابليتها على إنتاج الأنزيم بنسبة تفوق غيرها. وأن العزلة التي رمز لهاTP4 ومصدرها ثمرة البرتقال التالفة، هي أكثرها إنتاجاً. و أظهرت فحوص التشخيص المورفولوجية والجزيئية وباستخدام سلسلة تفاعلات البلمرة الأنزيميةPCR (Polymerase Chain Reactions) أنها تعود الى العفن Aspergillus niger ورمز لها TP4) ) تمييزاً لها عن غيرها من العزلات المستخدمة لإنتاج الأنزيم نفسه كما استهدفت هــذه التجربة تعيين الظروف المثلى لإنتاج أنزيم Polygalacturonase من العفن Aspergillus niger TP4 وبطريقة تخمرات الحالة الصلبة تحققت أعلى إنتاجية باستخدام نخالة الحنطة ورؤوس زهرة الشمس المرطبة بنسبة 1:3 والملقحة بـمعدل 107 بوغ /غم من الوسط وبرقم هيدروجيني ابتدائي 5 بعد مدة حضن بلغت أربعة أيام عند 40 مº. جرى تقدير فعالية انزيم Polygalacturonase بولى كالاكتيورونيك باتباع طريقة 5,3 – ثنائى نايتروسالسليك حيث بلغت إنتاجية الأنزيم 325.45 وحدة /غم من وسط نخالة الحنطة و242.28 وحدة/غم من وسط زهرة الشمس وبزيادة قدرت بحوالي 124.7 % و120.8% نسبة الى الإنتاجية لما قبل تحديد الظروف المثلى ولكلا الوسطين على التوالي.


Article
PRODUCTION OF POLYGALACTURONASE FROM THERMOSTABLE MOLD ASPERGILLUS NIGER 2-OPTIMIZATION THE PRODUCTION BY SOLID STATE FERMENTATION
إنتاج أنزيم Polygalacturonases من العفن TP4 ASPERGILLUS NIGER المتحمل للحرارة 2- تعيين الظروف المثلى لإنتاج الأنزيم بطريقة تخمرات الحالة الصلبة

Authors: Mohammed O. Muhyalddin محمد عمر محي الدين --- Rukaibaa A. Chechan رقيباء علي جيجان
Journal: Iraqi Journal of Agricultural Science مجلة العلوم الزراعية العراقية ISSN: 00750530/24100862 Year: 2013 Volume: 44 Issue: 1 Pages: 106-113
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

This part of study was aimed to investigate the optimal condition of production the enzyme Polygalacturonase from Aspergillus niger TP4 by solid state fermentation using different wastes available locally. It was found that the higher level of production could be achieved on wheat bran and sunflower head extract moistened with water at a ratio 3:1 with an initial pH 5 inoculated with 107 spores/gm during an incubation time of 4 days at 40 C0.The crud enzyme was extracted by adding 15ml of water to each flask followed by filtration and centrifugation at 1000 for 15 min the resultant extract was used for enzyme assay polygalacturonase activity was assay by measuring reducing groups The productivity extract was used for enzyme assay polygalacturonase activity was assay by measuring reducing groups The productivity under these conditions was 325.45 unit/gm using wheat bran and 242.28 unit/gm using sunflower head with an increase estimated about 124.7% and 120.8% respectively in relationship with productivity before of the optimization Maximal levels of enzyme activityes were achieved upon growing upon growing the culture in amedium containing wheat bran after 4 days of incubation at temperature of 40 C0 with pH 5 .

تم تعين الظروف المثلى لإنتاج أنزيم Polygalacturonase من العفن Aspergillus niger TP4 بعد ان اظهرت فحوصات التشخيص المختلفة ان هذه العزلةTP4 تعود الى العفن Aspergillus niger باستخدام اسلوب تخمرات الحالة الصلبة المتمثلة بالمخلفات الزراعية المختلفة ووجد ان افضل طريقة لاستخلاص الانزيم هي باستخدام الماء المقطر تحققت أعلى إنتاجية باستخدام نخالة الحنطة ورؤوس زهرة الشمس مقارنة بالمخلفات الصناعية الاخرى والمتمثلة بنخالة الشعير وكوالح الذرة وسحالة الرز والمرطبة بمحلول الترطيب بنسبة 1:3 والملقحة بمليليتر واحد من معلق الابواغ بـمعدل 107 بوغ /غم من الوسط وبرقم هيدروجيني ابتدائي 5 بعد مدة حضن بلغت أربعة أيام عند 40 مº استخلص الانزيم من الوسط بإضافة 15 مليليتير مع التحريك مع ترشيح المستخلص, نبذ مركزي على سرعة 1000 دورة لمدة 15 دقيقة على درجة حرارة 5 مº وعد الجزء الرائق مستخلصا خام للأنزيم قدر حجمه وفعالية الانزيمPolygalacturonase بولى كالاكتيورونيك باتباع طريقة 5,3 – ثنائى نايتروسالسليك بلغت إنتاجية الأنزيم 325.45 وحدة /غم من وسط نخالة الحنطة و242.28 وحدة/غم من وسط زهرة الشمس وبزيادة قدرت بحوالي 124.7 % و120.8% نسبة الى الإنتاجية لما قبل تحديد الظروف المثلى ولكلا الوسطين على التوالي تم التوصل ان افضل وسط لإنتاج الانزيم بأسلوب تخمرات الحالة الصلبة هو وسط نخالة الحنطة المرطبة بمحلول الترطيب بنسبة 1:3 عند درجة حرارة 40 مº بعد تلقيح الوسط بلقاح حجمه 107 بوغ /غم من الوسط عند رقم هيدروجيني 5 وبعد ة فترة حضانة لمدة 4 ايام.


Article
Characterization of Purified Polygalacturonase Produced by The Local Isolate (B36) of Bacillus megaterium
توصيف إنزيم البولي كالاكتيورونيز Polygalacturonase المنتج من العزلة المحلية B36لبكترياBacillus megaterium

Loading...
Loading...
Abstract

Characterization of the purified polygalacturonase which was produced by the local isolate (B36) of Bacillus megaterium was studied. The isolate was gave maximum enzymatic activity by using submerged cultures. The molecular weight of the enzyme was 65kdalton by using SDS-PAGE, the optimal pH of the enzyme activity was 7.0, and the enzyme activity was 1639.256 unit/ml, the optimal temperature of the enzyme activity was 50C, and the activity was 1619.673 unit/ml. The pH of polygalacturonase stability was between (6.5-7.5) but the thermo stability of the enzyme was between (0-50)ºC. The effect of some ions, chelating compounds and reducing agents onenzyme stability was also studied, Mn+2, Fe+3 and Ca+2 were increased the enzymatic activity to 115%, 105% and 110% respectively at the concentration 5mM, but Cu+2 inhibited the enzymatic activity to 10% at 1mM and the inhibition was increased to 50% at 5mM, while Mg+2 increased the enzymatic activity to 110% at 1mM, and 130% at 5mM. The urea and EDTA did not effect on activity at 1mM but inhibited the activity to 30% and 60% respectively at 5mM, also SDS inhibited the activity at 0.1%(wt/v). The kinetics constants of the enzyme were 3.125%for Km and 0.043 unit/ml for Vmax.The activation energy for the enzymatic reaction was 38.613 kcal/mole.

تـمت دراسـة صفات أنزيــم البولـي كالاكتيورونيــزالمنقى والمنتـج مـن العزلـة المحليـة ((B36 لبكتريــاBacillusmegaterium والتـــي انتخبت كأفضـل عزلة محلية لبكتريـــا Bacillusssp. لإنتاج الأنزيم إذ أعطت أعلى فعالية أنزيمية باستعمال المزارع المغمــورة.كان الوزن الجزيئي للإنزيم65 كيلودالتون باستعمال تقنية الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الأكريلامايد بوجود SDS ,أما الدالة الحامضية المثلى لفعالية أنزيم البولي كالاكتيورونيز فكانت 7.0إذ بلغت الفعالية الأنزيمية 1639.256 وحدة/مل, والدرجة الحرارية المثلى للفعالية كانت 50م وقد أعطت فعالية مقدارها 1619.673 وحدة/مل. أما ثباتية إنزيم البولي كالاكتيورونيز فكانت الدالة الحامضية المثلى لها(6.5 – 7.5) في حين الدرجة الحرارية المثلى لها تراوحت بين(0 – 50) م لمدة 30 دقيقة. كما درس تأثير بعض الايونات والمركبات الكلابية والمختزلة في ثباتية الأنزيم والتي شملت Mn2+وFe3+وCa2+ التي زادت من فعالية الأنزيم عند تركيز 5 ملي مولاري فبلغت115% و105% و110% على التوالي , بينما عملت أيوناتCu2على تثبيط فعالية الإنزيم بنسبة 10% عند تركيز 1 ملي مولاري وازداد التثبيط للإنزيم عنـد تركيز 5 ملـي مولاري وبنسبـة 50% إمـاMg2+فقـد زادت مـن الفعالية بنسبـة 110% عنـد تركيـز 1 ملي مولاري وازدادت الفعالية لتصل إلى 130% عند تركيز5ملي مولاري , ولم تظهر كل من اليوريا وEDTAتأثيراً في الفعالية الأنزيمية عند تركيز 1 ملي مولاري ولكنهما ثبطا الفعالية بنسبة 30% و60% على التوالي عند تركيز 5 ملي مولاري. وانتركيز 0.1% (وزن/حجم) من مادة SDS قد ثبط10% من الفعالية الأنزيمية. بلغت الثوابت الحركية للأنزيم 3.125%لقيمةKmفي حين بلغت السرعة القصوى Vmax0.043وحدة/ملي مولاري,وكانت قيمة طاقة التنشيط للتفاعل الأنزيمي هي 38.613 كيلو سعره/مول.

Listing 1 - 3 of 3
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (3)


Language

Arabic (2)

Arabic and English (1)


Year
From To Submit

2016 (1)

2013 (2)